法医第十章亲子鉴定

第10子鉴 思考题1、亲子鉴定的原理是2、法医学常用的遗传标记有哪些 回史记三国时期滴骨２文学戏秦剧《三滴《甄嬛传》描绘的合血•３上世纪初(1901年 Landsteiner•４术Southern1980WhymanandwhiteRFLP•５ＤＮＡ1985 DNA•６扫 1990STRbased（identificationindisputed亲子鉴定的类常见于1涉及民事纠纷的亲子鉴涉及婚生 抚育责任 继承 案怀疑医院调错婴儿 配子错配 案2涉及刑 的亲子鉴案或违法 对婴儿（ ）亲生父亲的确定碎尸案中的身源认杀婴、拐骗儿童 中孩子身源的认定3涉及行政事务的亲子鉴 失散亲人亲缘关系的认定计划 责任人的确认及 户籍 最常见父权鉴定（paternity亲子鉴定的依妊娠期非遗传特 能遗传特征（主要亲子鉴定的依人类的遗传性

单纯遗传特复杂遗传特法医遗传标记（genetic血液细胞表面的遗传标记（红细胞型、白细胞型血小板型血液蛋白质的遗传标记（红细胞酶型 型DNADNA序列多态DNA长度多态分析 遗传特征是亲子鉴定最可靠、最基本和最常用的方法

子 亲子鉴定原亲子鉴定的基本原理有以下两点①在肯定孩子的某个等位 必须来自生父，而假设父 ②在肯定孩子的某个等位 必须来自生父，而假设父 DNA信息传父亲给一半母亲给一

TheMonkandhisAnAustrianmonk,Gregor分离自由组合根据遗传标记排除父母亲生父可以排除 不能排除 aaa、bbb、aaa、bbb、aaa、ba、- 3、在相应地区、民族中该血型系统 况已有准 结果4、血 响5、检验方法操作简单，重复性好，结果明确可靠（等 表型（型ABO9O型4MNN抗MN型6P1型（P1P1、P1P2型（P21EccdeeCcdeeCcDeeccdEeCCdEECcDEECcdeeccDeeCCDeeCcdEeccDEeCCDEeCcdEEccDEECCDEE遗传标红红细胞血ABO，Ph,MN,Kell,ABO血型的分正试验 反 A型红细胞B型红细＋——＋A—＋＋—B＋＋——AB——＋＋O 子：O或 型父：O或 型：OO;HH或酶谱技术（zymogram血型系生理功等表红细胞酸性磷酸酶（EAP型正磷酸单酯＋ 磷酸＋2酯酶（ESD型酯＋脂肪酸＋12-12葡糖磷酸变位酶1（PGM1亚型葡糖-1PGM11PGM11＋磷PGM11PGM11＋1－PGM21PGM11－PGM21PGM12＋1＋葡糖-PGM12＋1－磷PGM12－1＋PGM12－1－PGM12＋PGM12＋2－PGM12－乙二醛酶Ⅰ（GLO甲基乙二S-乳酸谷胱甘6GLOⅠ1GLO12-12谷丙转氨酶（GPT型丙氨 α-酮戊二酸谷氨12-12遗传标同同工酶型EsD蛋白型（polymorphismofserumprotein）又 （serum和再利1241F23α1－抗胰蛋白酶亚型间α-（ITIH1型解酶活31 2 3 遗传标蛋白Hp（结合珠蛋白分型白细胞主要是指人类白细胞抗原（humanleukocyteantigen，HLA）又称为移植抗原或组织相容性抗原系统，是迄今发现的最复杂的人类遗传标记。HLA---6号 主要HLA-Ⅰ和HLAHLA-Ⅰ--HLA-A、B、C、E、F、G、H及HLA-Ⅱ--DR、DQ、遗传标白白细胞血HLA-A，-B，-C，--DP，-DQ，-DR表面抗原多态具有活性的淋巴细微量细胞毒试的淋巴细DNA水平的遗传标DNA的结构与功功能：把遗传信息从亲代传给子代DNA多态性的分子学基多态性DNA区域中等位 （或片段存在两种或两种以上形式，其本质是生物体在进化过程中DNA的核苷酸排列顺序改变的结果。 别核苷酸不同而产生的差异。主要原因是单个碱nucleotidepolymorphism，SNP）。碱基替代包括转换 1、散在重复序列单拷贝DNA序列以其单体形式散在地分布于 组中2、串联重复序列具有特定的重复单位，各重复单位头尾相连形 星DNA， DNA 星DNA， DNA具有极高的态性，是用于亲子鉴定的重要遗传标3、倒位重复序列重复单位是互补序列，并在同一条DNA链上呈星 串联重复序列（variablenumberoftandemrepeats， （shorttandemrepeats，STRs）。STR分 SourcesofBiologicalBriefHistoryofForensicDNA1980-RayWhitedescribesfirstpolymorphicRFLPmarker1985-AlecJeffreysdiscoversmultilocusVNTRprobes1985-firstpaper 1988-FBIstartsDNA1991-firstSTR1995-FSSstartsUKDNA1998-FBIlaunchesCODISStepsinDNASampleSampleObtainedCrimeSceneorPaternity

PCRofMultipleSTRSeparationandDetectionPCR(STR

SampleComparisonofSampleGenotypetoOtherSampleResults

GenerationofCaseReportwithProbabilityofRandomMatchIfmatchoccurs,comparisonofDNAprofiletopopulationSourcesofBiological

BloodOnlyaverysmallamountofbloodisneededtoobtainaDNAprofileDNAinthecellRegionforRegionforDNAShortTandemRepeats 78therepeatregionisvariablebetweensampleswhiletheflankingregionswherePCRprimersbindareHomozygote=bothallelesarethesameHeterozygote=allelesdifferandcanberesolvedfromone195

170DifferentprimersetsproducedifferentPCRproductsizesforsameSTRPCRCopiesDNAExponentiallythroughMultipleThermalCyclesOriginal ThermalIn32cyclesat100%efficiency,1.07edDNAregionedDNAregionareMultiplexOver10MarkersCanBeCopiedatOnceSensitivitiestolevelslessthan1ngofDNAAbilitytoHandleandDegradedDifferentFluorescentDyesUsedtoDistinguishSTRAlleleswithOverlapSizeAnExampleForensicSTRMultiplexAmpFlSTR®ProfilerKitavailablefromPEBiosystems(FosterCity,100

200Size

300

400Color JOEColorNEDROXGS500-internallane9STRsamplifiedalongwithsex- markeramelogenininasinglePCRAvailableKitsfor KitsmakeiteasyforlabstojustaddDNAsamplestoapre-mademix13CODIScoreProfilerPlusandCOfiler(PEAppliedPowerPlex1.1and2.1(PromegaIncreasedpowerofCTT(1994):1inSGMPlus™(1999):1in3PowerPlex™16(2000):1in2xABIPRISM®310 AutomatedAutomatedgelAutomatedCapillaryelectrophoresiswithmulti-colordetectioncapabilitiesABIABIPrism310 SyringewithpolymerSyringewithpolymersolutionClose-upofABIPrism310SampleLoading Sample Autosampler SeeTechnologysectionformoreinformationonHumanIdentityTestingwithMultiplexAmpFlSTR®SGMPlus™

D8

DNASize(base probabilityprobabilityofarandommatch:~1in3trillionResultsobtainedResultsobtainedinlessthan5hourswithaspotofbloodthesizeofapinhead

TwoTwodifferent ysisof10STRsandGenderSTR isperformedbyofofsampledatatoallelicSTRAllele50 Numberof

TH01CaucasiansCaucasians(N=427)Blacks(N=414)Hispanics*Proc.Int.Sym.Hum.ID(Promega)1997,p.34FBI’sCODISDNACombinedDNAIndexUsedforlinkingserialcrimesandunsolvedcaseswithrepeatoffendersLaunchedOctoberLinksall50Requires>4RFLPmarkersand/or13coreSTRmarkersCurrentbacklogof>600,000

13CODISCoreSTRLociwithChromosomalPositions

亲子鉴定效能的父权排除概率（excludingprobabilityofpaternity,EPP）又称非父排除概率（probabilityofexcluding衡量从事亲子鉴定的质量控制标准之一。的遗传方式、等位数目以及各等位在群体中亲子鉴定效能的1、 2、 父排除概率（cumulativechanceof亲子鉴定应具备的条1、鉴定人的资应的检验技术，③由具有一定工作经验的专业对检验结果进行解2、鉴定机构的条 3、被鉴定人的要 检验标本，严格避免将被检者或血液样品等调错；③被检者在被检者是否患有某种特殊疾病亲子鉴定结果的评排除亲权关肯定亲权关单亲亲子鉴定结果的评排除亲权关1、直接排2、间接排直接排有争议的可疑父亲与孩子中至少有一个为杂合子时若他们之间的遗传标 遗传规律，排除亲子关则为直接排除例AAB 间接排子时，如他们之间的遗传标记遗传规律，例：MN系统检测时，孩子为M型，可疑父亲为N型， 型分别为MM和NN，可疑 排除父权的原 遗传规律，则可作出排除结论；1个血型遗传标记直接假设DNA单一位点突变率为0.002，三个位点同时突变造成错误排除排除案例12肯定亲权关 在亲子鉴定中根据多血型系检测结的遗传关系分析，亲代与子代的遗传标记不 遗传定律则他们之间可能存在亲生关系，但并不等于一定是亲生关系，因为随机男子也可能携有与生父相同的 。经标准化实验检测遗传标记，假定为父亲的男子不能被排除父权的情况下，计算概率后如同时满足下列两项指标，可以认定假定父亲的父权，即可以断定他是孩子的生物学父亲。2、假定父亲的累积父权指数等于或大于2000，即概非父排除 父权排除概率（excluigprobabilityofpaternity，PP）又称非父排除概率，指通过某一个遗传标记系统的检测，在100个被误控的可疑父中能将不是生父的被控父亲排除的概率。它是衡量一个遗传标记系统排除非父能力的客观标准。各个遗传标记系统非父排除概率的大小取决于该系统的遗传方式等位 的数目以及各等位 在群体中的频率分布。排除概率后尚须求得多个系统的累积非父排除概率（cumulativechanceofexclusion，CCE）。假设每个遗传标记系统是互相 的，而不同遗传标记系统的非父排除率分别为P、P、P…P 1））父权指数及计父权指数（paternityindex，PI）又称亲子关系指数，是 X：假设父作为生父应提供所需的几Y：随机男子作为生父应提供所需比，是以分型结果不遗传规律作为条件，假设父必须的机会，比较假设父与随机男子作为生父的机会1、根据表型推测遗传必需的机会根据遗传学知识，纯合子型频率为组成频率的平方，亲代遗传该的概率为100﹪；杂合子基因型频率为组成频率乘积的2倍，亲代遗传其中1个的概率为1/2但如果根据表现型推测型中可能含有隐性，则应分别计算遗传显性和隐性的机会。表10-10例举了ABO血型系统不同表型遗传相应等位的几率。2、计算父权指数的具体（1）根据母子组合，确定来自父母的必 ，即生父和生 （2）确定母亲遗传生 的机会（f）（3）确定随机男子提供生 的机会（g），一般使用相应 （4）确定假设父提供生 的机会（c）（5）计算随机男子成为生父的机会，Y=f×g（6）计算假设父成为生父的机会，X=f×c（7）计算父权指数，PI=X/Y=f×c/f×gPI值的具体计算例见表10-11表10-11PI值计算案例表必f随机成为生的机会被控父成为生父的机孩子母亲母亲生1BAABOB12B3BBBB或OB4BOBOB1父权相对机会及计父权相对机会（relativechanceofpaternity，RCP）又称RCP=PI/（PI＋1）×100﹪=X/（X＋Y）P理论值可接近无穷大，RC但不能达到100﹪。C作为衡量亲生关系可能性大小R达到95﹪，已具有肯定亲生关系的意义。但究竟达到多大，才能肯定亲生关atiP≥400，RC≥99.75﹪作为肯定父权的标准。8年代国际上常用标准为RCP≥99.73﹪判定有亲子关系（表1