DB54T 0330-2024 拉萨裸裂尻鱼

ICS65.15054CCSB5254西 藏 自 治 区 地 方 标 准DB54/T0330—2024拉萨裸裂尻鱼2024-04-09发布 2024-05-09实施西藏自治区市场监督管理局  发布DB54/T0330DB54/T0330—2024PAGE\*ROMANPAGE\*ROMANII目 次前言 II范围 1规范性引用文件 1术语和定义 1主要形态结构特征 1外部形态特征 1内部结构特征 3生长与繁殖 3生长 3繁殖 4遗传学特性 4细胞遗传学特性 4生化遗传学特性 5检测方法 5抽样 5性状测定 5年龄鉴定 5染色体检测 5血清乳酸脱氢酶（LDH）酶检测 6检测规则与结果判定 6附录A（资料性） 生长方程、体长与体重关系式 7体长和体重生长方程 7体长与体重关系式 7附录B（规范性） 同工酶各种试剂的配置 8凝胶制备 8加样指示剂 8电极缓冲液 8染色液的配置 8前 言本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规起草。本文件由西藏自治区农业农村厅提出。本文件由西藏自治区农业农村标准化技术委员会归口。本文件起草单位：西藏自治区畜牧总站、华中农业大学、四川律贝生物技术有限公司。DB54/T0330DB54/T0330—2024PAGEPAGE1拉萨裸裂尻鱼范围本文件给出了拉萨裸裂尻鱼（Schizopygopsisyounghusbandi）的主要形态构造特征、生长与繁殖、遗传学特性以及检测方法。本文件适用于拉萨裸裂尻鱼的种质监测。规范性引用文件（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T18654.11GB/T18654.22GB/T18654.33GB/T18654.44GB/T18654.66部分：繁殖性能的测定GB/T18654.1212GB/T18654.1313术语和定义下列术语和定义适用于本文件。3.1学名拉萨裸裂尻鱼（Schizopygopsisyounghusbandi）。3.2地方名土鱼。3.3分类位置硬骨鱼纲（Osteichthyes）（Cypriniformes）（Cyprinidae）（Schizothoracinae），裸裂尻鱼属（Schizopygopsis）。主要形态结构特征外部形态特征外形拉萨裸裂尻鱼的外形见图1。图1 拉萨裸裂尻鱼外形图可数性状背鳍鳍式D.ii~iii-7~8。臀鳍鳍式iii-5。第一腮弓腮耙数外侧鳃耙数9～14；内侧鳃耙数15～22。可量性状不同体长组个体的可量性状变动值见表1。表1 拉萨裸裂尻鱼不同体长组可量性状比例性状平均值（范围）比例性状平均值（范围）体长/体高5.5（5.0-5.9）头长/吻长3.4（3.0-4.1）体长/头长4.2（3.8-4.5）头长/眼径4.6（3.6-5.6）体长/尾柄长5.8（5.1-6.3）头长/眼间距3.1（2.8-3.3）体长/尾柄高13.35（11.43-15.52）尾柄长/尾柄高2.4（2.1-2.7）4.2 内部结构特征鳔鳔2室，后室长筒形，其长度为前室长的2.3倍~3.4倍。下咽齿下咽齿2行，3·4/4·3。下咽齿顶端尖有钩曲,咀嚼面凹陷,呈匙状。脊椎骨脊椎骨总数：44枚～49枚。腹膜腹膜为黑色。生长与繁殖生长17126062A。表2 拉萨裸裂尻鱼各年龄组的体长和体重实测值龄组龄雄鱼雌鱼体长(平均±S.D)mm体重(平均±S.D.)g体长(平均±S.D.)mm体重(平均±S.D)g2103.3±22.014.1±7.6106.3±26.417.4±12.63162.0±12.456.6±16.6174.0±26.679.5±45.04224.2±25.3160.2±48.1244.2±32.7209.7±77.65249.8±19.3218.1±49.6272.8±29.7279.6±92.86259.1±24.2229.2±55.9292.8±23.4342.0±85.67258.3±16.2234.1±51.3303.8±23.1377.1±82.28288.5±27.1315.0±88.0314.3±20.2410.9±84.79285.3±20.6363.5±80.0330.1±36.3440.2±97.710280.5±30.4278.9±41.2332.0±30.2520.0±72.212264.0277.713342.7±30.217358.0繁殖成熟年龄雌鱼7龄，雄鱼4龄。产卵类型性腺一年成熟一次，一次产出。繁殖期繁殖期为3月～4月，高峰期为3月。怀卵量依据69尾样本估算各年龄组怀卵量见表3。表3 拉萨裸裂尻鱼不同年龄组的怀卵量年龄组龄体重范围g绝对怀卵量粒相对怀卵量粒/克4149.7~366.95712.2~19190.266.1±12.25122.5~323.06577.0~20374.766.1±11.16205.9~425.18224.0~19578.857.5±16.17310.8~603.89207.4~30504.049.3±12.68278.2~606.911076.3~46764.358.2±18.29295.2~730.812906.8~34244.053.0±14.610386.3~839.419110.4~44411.165.9±5.111503.4~918.514895.5~51037.358.1±28.212627.240339.277.713507.620400.453.31758922446.046遗传学特性细胞遗传学特性肾细胞染色体数：2n=90。核型公式：36m+20sm+16st+22t；臂数（NF）：146。染色体核型见图2。图2 拉萨裸裂尻鱼核型图生化遗传学特性血清乳酸脱氢酶（LDH）同工酶电泳图谱和扫描图见图3。图3 拉萨裸裂尻鱼血清组织乳酸脱氢酶酶带扫描图检测方法抽样按GB/T18654.2的规定执行。性状测定按GB/T18654.3的规定执行。年龄鉴定采用耳石鉴定年龄。方法按GB/T18654.4的规定执行。染色体检测按GB/T18654.12的规定执行。血清乳酸脱氢酶（LDH）酶检测试剂及配置方法同工酶各种试剂的配制见附录A。样品的采集与制备血清制备，从尾静脉抽取2ml血，于4℃、1000r/min离心6min，取上清备用。制胶先将混匀的6.5%分离胶液倒入模板约3/436℃左右30min胶聚合好以后，倒掉上面的水，将混匀的3.0%浓缩胶倒入模板，插好梳子，置于36℃左右30min胶聚合好以后，置于冰箱中备用。点样点样量为20μL。吸取20μL样与2μL～3μL加样指示剂混匀，一起加到样孔中。电泳分离采用聚丙烯酰胺凝胶垂直电泳。分离胶浓度6.5%，浓缩胶浓度3.0%。电极缓冲液：pH为8.3的Tris—甘氨酸。280V（起始电流约18~24mA）电泳0.5h后，将电压调到220v，继续电泳5h～6h（酚蓝跑出胶后2h以上）。染色:电泳结束后，放入预先配好并在37℃恒温箱中保温的同工酶染色液中染色。检测规则与结果判定按GB/T18654.1的规定执行。附录 A（资料性）生长方程、体长与体重关系式体长和体重生长方程雌性和雄性群体的体长和体重生长方程分别见式（A.1）、（A.2）、（A.3）和（A.4）：雌鱼Lt=433.9[1-e-0.194(t-0.397)] （A.1）Wt=1050.19[1-e-0.194(t-0.397)]2.923 （A.2）雄鱼Lt=338.4[1-e-0.233(t-0.403)] （A.3）Wt=525.92[1-e-0.233(t-0.403)]3.023 （A.4）式中：Lt－tWt－t龄时鱼体体重，g；e－自然对数；t－鱼的年龄。体长与体重关系式雌性和雄性群体的体长与体重关系式见（A.5）和（A.6）：雌鱼 W=2.052×10-5L2.923 （A.5）雄鱼 W=1.187×10-5L3.023 （A.6）式中：W－鱼体体重，g；L－鱼体体长，cm附录 B（规范性）同工酶各种试剂的配置凝胶制备凝胶制备溶液配置各种凝胶制备溶液的配方及配制方法见表B.1。表B.1各种凝胶制备溶液配方溶 液配 制 方 法凝胶缓冲液Tris56.75g200mLpH250mL4℃贮存。凝胶储液（TEMED溶于蒸馏水中定容到150mL。4℃贮存。AP取过硫酸铵1.5mg溶解到100mL蒸馏水水中。4℃贮存。分离胶和浓缩胶的制备用6.5%分离胶和3.0%浓缩胶制成聚丙烯酰胺垂直板凝胶，该凝胶液配方见表B.2。表B.2凝胶制备配方6.5 %分离胶3.0 ％浓缩胶凝胶缓冲液,mL1.5凝胶缓冲液，mL0.5凝胶储液，mL7.3凝胶储液，mL1.2AP,mL1.5AP,mL0.5TEMED，μL－TEMED,μL4.0纯水，mL14.7纯水，mL6.8总体积，mL25总体积，mL9.0加样指示剂0.15％溴酚蓝-50％甘油：称取0.15g溴酚蓝溶于50mL蒸馏水，再加50mL甘油混匀。电极缓冲液取甘氨酸28.80g溶于800mL水，用约4.00g的Tris调pH至8.3，加蒸馏水到1000mL。电泳时稀释10倍使用。染色液的配置染色用各溶液配制见表B.3。表B.3染色用溶液配方溶 液配 制