临床免疫学与免疫检验概述

临床免疫学与免疫检验概述临床免疫学与免疫检验概述第1页教学目标与要求一、掌握临床免疫学与临床免疫检验定义，掌握抗原、抗体及免疫细胞等免疫学基础要素基础特征。二、掌握临床免疫检验在临床医学中主要价值。三、熟悉临床免疫检验现实状况。四、了解临床免疫检验中值得关注几个问题。五、了解临床免疫检验发展方向。临床免疫学与免疫检验概述第2页CongenitalHarelip临床免疫学与免疫检验概述第3页Causeofcongenitalharelip(1)nutrientdeficiency:vitamindeficiency(2)medicinetherapy:suchasaspirinandhormone.(3)depression(4)geneticfactors.

(5)infection:suchasrubellavirus.(6)otherfactors:suchasradioactivitysubstance,smokinganddrinketc.临床免疫学与免疫检验概述第4页TORCH感染T：弓形虫（toxoplasmagondii）O：其它病原微生物(others)R：风疹病毒（rubellavirus）C：巨细胞病毒（cytomegalovirus）H：单纯疱疹病毒（herpessimplexvirus）TORCH感染病原体常可经过胎盘传给胎儿，引发围生期感染，造成流产、死胎、早产、先天畸形和智力障碍等各种异常结果。临床免疫学与免疫检验概述第5页临床免疫学与免疫检验概述第6页怎样发觉TORCH感染呢？

临床免疫学检验！临床分子生物学检验！病原体分离、培养与判定！临床免疫学与免疫检验概述第7页免疫学（Immunology）研究免疫系统结构与功效,研究免疫应答机制,研究有效免疫办法,实现以防病、治病为目标一门当代生命科学。感染性疾病疫苗肝脏疾病肿瘤

……临床免疫学与免疫检验概述第8页临床免疫学澳大利亚于30年前即成立了临床免疫学科,将临床免疫学工作定为三种形式,即(1)临床诊疗和治疗,(2)临床试验免疫学,(3)前二者兼而有之。英国将临床免疫学定义为“对那些在发病或治疗过程中包括免疫系统疾病诊疗和处理工作”。临床免疫学是将免疫学基础理论与免疫学技术相结合,用于研究临床疾病发病机制、诊疗与判别诊疗、治疗与预后判断等领域新兴边缘学科。临床免疫学与免疫检验概述第9页临床免疫学范围临床免疫检验内科免疫学外科免疫学儿科免疫学生殖免疫学感染免疫学移植免疫学免疫病理学……临床免疫学与免疫检验概述第10页临床免疫检验

(Clinicalimmunoassay)采取免疫学技术与方法检测人体内免疫活性物质或其它生命化学物质,为临床疾病诊疗，治疗方案选择以及疾病预后判断提供有效试验室依据.临床免疫学与免疫检验概述第11页SwineInfluenzaA(H1N1)outbreakVirusisbeingdescribedasanewsubtypeofA/H1N1notpreviouslydetectedinswineorhumans临床免疫学与免疫检验概述第12页SwineFlu:CaseDefinitionsSource:AmericanCDC临床免疫学与免疫检验概述第13页

学好临床免疫检验，必须掌握“一个关键，三个要素与四个标识”。一个关键：抗原抗体反应(Antigen-antibodyinteraction)三个要素：抗原、抗体和免疫细胞四个标识：酶标识技术、放射免疫标识技术、荧光素标识技术与化学发光标识技术。临床免疫学与免疫检验概述第14页抗原（Antigen）抗原：能够刺激机体免疫系统产生抗体和致敏淋巴细胞，并能在体内外与抗体或致敏淋巴细胞发生特异性反应物质。蛋白质脂多糖核酸等临床免疫学与免疫检验概述第15页抗原基础特征免疫原性(Immunogenicity):指抗原能够刺激机体免疫系统产生抗体和致敏淋巴细胞等免疫活性物质特征.抗原性(Antigenicity):指抗原能在体内外与抗体或致敏淋巴细胞发生特异性反应特征。临床免疫学与免疫检验概述第16页抗原特异性物质基础是抗原决定族（Antigenicitydeterminant）抗原决定族：指存在于抗原表面决定抗原特异性特殊化学基团。是TCR/BCR及抗体特异性结合基础单位，开启免疫应答，又称表位（epitope）。其化学性质、数目和空间构象决定了该抗原特异性和免疫原性强弱。临床免疫学与免疫检验概述第17页临床免疫学与免疫检验概述第18页抗体

定义：抗体（Antibody，Ab）是机体在抗原刺激下，由浆细胞合成与分泌，能与抗原特异性结合含有免疫功效球蛋白。基础结构（1）四肽链（2）NH2-端和COOH-端（3）V区与C区临床免疫学与免疫检验概述第19页临床免疫学与免疫检验概述第20页可变区(variableregion):即VL和VH,位于Ig分子N端,,该区氨基酸组成与排列次序有较大差异,并决定Ag与Ab特异性.高变区(Hypervariableregion):VL和VH中3个区域氨基酸组成与排列次序尤其轻易改变,又称互补决定区(CDR),此乃Ag与Ab特异性结合部位.恒定区(Constantregion):同一个属中,恒定区氨基酸组成与排列次序恒定.临床免疫学与免疫检验概述第21页临床免疫学与免疫检验概述第22页多克隆抗体

（polyclonalantibody）用含各种抗原决定族抗原物质免疫动物，刺激多个B细胞克隆所取得免疫血清（含各种单克隆抗体混合物），此为多克隆抗体临床免疫学与免疫检验概述第23页单克隆抗体

（monoclonalantibody,McAb）借助小鼠B细胞杂交瘤（hybridoma）技术，所制备高度均一（属同一类、亚类、型别）、单一特异性（仅针对特定抗原表位）抗体。

临床免疫学与免疫检验概述第24页临床免疫学与免疫检验概述第25页基因工程抗体

（EngineerAntibody）借助于基因重组技术和蛋白表示技术,按照大家意愿在基因水平对Ig进行切割、连接或修饰，组装成新奇Ab分子，称为基因工程抗体。临床免疫学与免疫检验概述第26页鼠IgGDNA人IgGDNA

VmCmVhCh

VmCh

鼠源性单抗V区，人IgC区。

人-鼠嵌合抗体(chimericantibody)

临床免疫学与免疫检验概述第27页免疫细胞免疫细胞:包含全部参加免疫应答或与免疫应答相关细胞及其前体细胞.如造血干细胞、淋巴细胞，肥大细胞以及红细胞等。免疫活性细胞：含有特异性抗原受体，被抗原刺激后能活化、增殖、分化并产生免疫物质，发生特异性免疫应答细胞。临床免疫学与免疫检验概述第28页免疫细胞含有不一样表面标志

B细胞T细胞

BCRTCRCD19、CD21和CD81CD3，CD4或CD8

CD40CD40LB7CD28

补体受体CD2

丝裂原受体丝裂原受体

…………

临床免疫学与免疫检验概述第29页临床免疫学与免疫检验概述第30页免疫细胞数目标检测免疫细胞功效检测免疫细胞分离临床免疫学与免疫检验概述第31页二、临床免疫检验在临床医学中含有主要价值临床免疫学与免疫检验概述第32页疾病诊疗疗效观察复发评定预后判断临床免疫学与免疫检验概述第33页hepatitisCausesofhepatitisViralHepatitis,A,B,C,D,E,F,G,TTVetc.Otherviruses-CMV,EBV,HSV,Dengueetc.DrugsAlcoholIschaemiaSystemicDiseasesandInfections临床免疫学与免疫检验概述第34页HBVserologicmarker临床免疫学与免疫检验概述第35页SLE(Systemiclupuserythematosus)SLEisanautoimmunediseasecharacterizedbyimmunedysregulationresultingintheproductionofantinuclearantibodies(ANA),generationofcirculatingimmunecomplexes,andactivationofthecomplementsystem.InSLEthereisapredilectionforclinicalinvolvementofthejoints,skin,kidney,brain,serosa,lug,heartandgastrointestinaltract.

Butterflyerythema临床免疫学与免疫检验概述第36页TheAmericanRheumatologyAssociation(ARA)criteria

临床免疫学与免疫检验概述第37页ANA

临床免疫学与免疫检验概述第38页ArealstoryabouttumormarkerPlace:ThecityofBirmingham,AL,U.S.ACharacter:ApastcolleagueworkingintheUniversityofAlabamaatBirmingham.Hydatidiformmole(葡萄胎)?Suggection:TimeThefrequencyofdetectingβ-hCGFirstthreemonth1/weekNextninemonth1/monthNextyear1/halfyear临床免疫学与免疫检验概述第39页临床免疫学与免疫检验概述第40页HIVandAIDS临床免疫学与免疫检验概述第41页CD4+CellcountandCD4+/CD8+InpatientswithAIDS,totalTcellsand

CD4+Cellsdecreasesignificance(<1.5×109/Land<2.0~4.0×108/L,furthermore,

CD4+/CD8+<1.0.)Monitorcurativeeffect.临床免疫学与免疫检验概述第42页临床免疫学与免疫检验概述第43页临床免疫学与免疫检验概述第44页对应章节二十二章:感染免疫及其免疫检测二十三章:超敏反应疾病及其免疫检测二十四章:本身免疫性疾病及其免疫检测二十五章:免疫增殖性疾病及其免疫检测二十六章:免疫缺点性疾病及其免疫检测二十七章:肿瘤免疫及其免疫检测二十八章:移植免疫及其免疫检测临床免疫学与免疫检验概述第45页三、临床免疫检测现实状况多年来，伴随生物学、基础医学和计算机技术，尤其是单克隆抗体技术与免疫标识技术快速发展，免疫学检验取得了显著进步，大量新检测方法及检测指标不停出现，并向自动化、微量化及定量化方向飞速发展.临床免疫学与免疫检验概述第46页早期免疫检验方法逐步退出检验市场。免疫标识技术在免疫检测中占主导地位。免疫检验自动化已逐步普遍。免疫检验对象不停增加。临床免疫学与免疫检验概述第47页早期免疫检验方法逐步退出检验市场早期一些免疫学检测技术，常经过肉眼观察是否有沉淀、凝集以及溶血现象发生来进行免疫学分析，如免疫扩散、凝集试验以及经典补体结合反应等，尽管这些方法含有成本低廉，操作简单等优点，不过大个别只是半定量、定性试验，且需要花费较长时间，越来越难以满足临床诊疗需要，已慢慢地被随即发展起来各种先进免疫学检测技术所代替。临床免疫学与免疫检验概述第48页凝集反应（Agglutinationreaction）临床免疫学与免疫检验概述第49页临床免疫学与免疫检验概述第50页免疫标识技术

在免疫检测中占主导地位

标识免疫技术:所谓免疫标识技术是将可微量检测标识物，如放射性核素、荧光素以及酶等，标识一定抗原或抗体，用以检测未知抗体或抗原,如放射免疫技术,酶标识免疫技术,荧光素标识免疫技术等.临床免疫学与免疫检验概述第51页临床免疫学与免疫检验概述第52页FIGURE6-15Separationoffluorochrome-labeledcellswiththeflowcytometerwhichusesalaserbeam&lightdetector.:differentAgindifferentcells/differentlevelsofAginthesametypeofcell→fluorescenceintensity/thesizeofcells.labeledwithfluorescein(green)labeledwithrhodamine(red)eachdotrepresentsacell(smallelectricalchange)(excitingthefluorochrome)↓eachdroplet(cell)emitsthefluorescence10.Flowcytometry&Fluorescence临床免疫学与免疫检验概述第53页免疫检验自动化已逐步普遍免疫自动化分析是指用自动化仪器对待测物进行分析，它应包含两方面内容：一是加样、测定以及仪器洗涤自动化；二是数据处理自动化。当前中国已能见到一系列全自动免疫分析仪，

临床免疫学与免疫检验概述第54页临床免疫学与免疫检验概述第55页免疫自动化分析与传统手工操作

相比较含有显著优势

免疫自动化分析快速、标本汇报时间缩短，普通数小时内即可向临床汇报检验结果。免疫自动化分析尤适合用于大批量样品测定，可节约大量人力、物力，而且同一标本可同时用于检测几个待测物，血清用量少，通常以μl计。免疫自动化分析重复性好、干扰原因少，结果判断愈加准确、客观，更有利于质量控制。免疫自动化分析能够防止标本对人感染及标本之间相互污染。临床免疫学与免疫检验概述第56页免疫检验对象不停增加

经典免疫活性物质其它生命化学物质

IgGCERIgMTrfIgACRPC3AATC4α1MG临床免疫学与免疫检验概述第57页

HAPATITISCANCERFERTILITYPROTEINSTDMs/DRUGSTYROID,ANEMIAHBV

HCVM1071010-1510-4

g/L

AFPFERCEACA199PRLHCGLHFSHGHMyoglobinRHFIgGC3ASOCERTRFAAGQUIGENAMIPHYFT3FT4DigT3T4TSHProg

免疫分析谱临床免疫学与免疫检验概述第58页对应章节第二章~二十二章临床免疫学与免疫检验概述第59页四、临床免疫检验中

值得关注几个问题临床免疫学检验怎样快速应对重大突发性传染病？蛋白芯片用于免疫检测值得期待。应建立有免疫检验特色质量控制体系。

临床免疫学与免疫检验概述第60页免疫学检验怎样快速应对重大突发性传染病？多年来，重大突发性传染病偶有发生，如SARS，禽流感以及猪链球菌感染等。这些疾病不但严重危害人体健康，而且含有极高传染性。怎样尽快准确地为临床提供病原体感染标志物，成为广大医学检验工作者主要任务。因为单克隆抗体飞速发展，众多床旁测试也采取免疫学检测，如HCG、HBsAg以及TB-AB检测等。所以建立重大突发性传染病快速检测或床旁测试试剂值得免疫学检验工作人员关注。临床免疫学与免疫检验概述第61页SARS（severeacuterespiratory

syndrome

）病原体确实定与检测现实状况临床免疫学与免疫检验概述第62页电子显微镜发觉为

某种冠状病毒临床免疫学与免疫检验概述第63页基因组测序锁定为

新型冠状病毒临床免疫学与免疫检验概述第64页复制出对应动物模型临床免疫学与免疫检验概述第65页建立新检测方法PCR法间接免疫荧光法ELISA临床免疫学与免疫检验概述第66页临床免疫学与免疫检验概述第67页快速免疫检验与重大突发性传染病临床免疫学与免疫检验概述第68页过敏原千千万???临床免疫学与免疫检验概述第69页蛋白芯片用于免疫检测值得期待蛋白芯片是将大量蛋白质分子按预先设置排列固定于一个载体表面行成微阵列，依据蛋白质分子间