红细胞疾病的实验诊断(2008级7年制)

红细胞疾病的实验诊断第一节概述一、贫血定义二、贫血程度三、贫血分类（一）按照红细胞大小分类。

贫血形态学分类：

依据MCV、MCH、MCHC及外周血红细胞形态分类贫血的形态学分类MCV80-94flMCH26-32pgMCHC31-35%病因正细胞性贫血80-9426-3231-35再障、急性失血、大多溶贫白血病大细胞性贫血大于100大于3231-35巨细胞性贫血、营养性贫血恶性贫血小细胞性贫血单纯小性贫血小于80小于80小于26小于26小于30

31-35缺铁性贫血、珠蛋白生成障碍性贫血慢性感染、炎症、肝病、尿毒症、恶性肿瘤等（二）按照骨髓增生程度1、增生性贫血2、增生不良性贫血（三）病因和发病机制分类1、红细胞生成减少、破坏增多、红细胞丢失过量；2、缺铁性贫血；3、溶血性贫血。第二节红细胞生成减少性贫血的实验室检测一、再生障碍性贫血1、血象2、骨髓象二、缺铁性贫血（一）血清铁(serumiron,SI)测定与血清总铁结合力(totalironbindingcapacitytest,TIBC)测定（二）血清转铁蛋白(serumtransferritin)和转铁蛋白饱和度(transferritin

saturation,TS)测定（三）血清铁蛋白测定(serumferritin

test,SF)成年男性成年女性体内铁总量50~55mg/kg35~40mg/kg分布：血红蛋白66~70%66~70%肌红蛋白15%15%细胞酶类1%1%贮存铁（以铁蛋白形式）700~1000mg200~400mg三、巨幼细胞性贫血1、血清叶酸测定2、血清维生素B12测定第三节溶血性贫血实验室检查溶血性贫血:各种原因使红细胞生存时间缩短，破坏增多或加速，而骨髓代偿造血功能不足以补偿其损耗时所发生的一类贫血。正常RBC生存时间为120天,体内RBC每天有1/120衰老破坏。当RBC生存时间缩短,破坏增加,骨髓将代偿增生以维持其平衡。正常人骨髓具有6-8倍代偿造血能力,当溶血程度较轻,骨髓造血代偿足以补偿红细胞的损耗时,不出现贫血,为代偿性溶血病。如红细胞生存时间短至15-20天以下,破坏速度超过骨髓代偿能力,才出现贫血,称为溶血性贫血。溶血性疾病≠溶血性贫血溶血性贫血分类（病因分类）RBC内在缺陷:膜结构与功能缺陷：遗传性球形RBC增多症、椭圆形RBC增多症、阵发性睡眠性Hb尿等;Hb珠蛋白肽链合成异常:量-海洋性贫血,质-异常Hb综合症;代谢酶缺陷：ATP生成障碍至RBC寿命缩短、先天性非球型RBC贫血.RBC外在环境异常:自免疫性溶血病;新生儿溶血病;溶血性病原体：金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌、疟疾等;物理化因素和机械性破坏：脾亢、瓣膜移植、化学药物、蛇毒等;异型输血一、溶血性贫血的筛查检测血浆游离Hb检测RBC内Hb游离至浆→游离Hb↑主要见于血管内溶血血清结合珠蛋白检测游离Hb↑→结合珠蛋白↓→血红素↓各种溶血时血清血清结合珠蛋白均有减低；血管内溶血减低最显著；血浆高铁血红素清蛋白检测血浆游离Hb转变为高铁Hb：高铁血红素清蛋白↑阳性表示为严重血管内溶血。含铁血黄素尿试验（ROUS试验）Hb经肾小管上皮细胞吸收后分解血红素为原卟啉+铁，铁升高以含铁血红素形式沉积在上皮细胞内或游离在细胞外排出，经普鲁士蓝反应染深蓝色，显微镜检查可见。慢性血管内溶血可呈持续阳性；常见于阵发性睡眠性血红蛋白尿。RBC寿命缩短正常红细胞半衰期为25-32天；溶血性贫血时常<15天。二、红细胞膜缺陷的检查RBC渗透脆性试验（RBC膜抵抗力检测）脆性增高：开始溶血>0.50%,完全溶血>0.38%;见于遗传性球形红细胞增多症。脆性减低：海洋性贫血温育后渗透脆性试验较上试验敏感,常用于轻症遗传性球形红细胞增多症、遗传性非球形细胞溶血性贫血的诊断和鉴别诊断。脆性增加：见于遗传性球形红细胞增多症、遗传性椭圆形红细胞增多症、遗传性非球形细胞溶血性贫血;脆性减低：见于珠蛋白生成障碍性贫血、缺铁性贫血、镰形细胞贫血、脾切除术后。自身溶血及纠正试验遗传性球形RBC增多症、先天性非球形RBC性溶贫的鉴别诊断。遗传性球形红细胞增多症孵育后溶血明显增强，加入葡萄糖及ATP溶血均得到明显纠正；I型先天性非球形红细胞性溶血性贫血（G-6-PD缺陷）时自身溶血加重，加入葡萄糖及ATP溶血均得到明显纠正；II型（丙酮酸激酶缺陷症)自身溶血增强，加入葡萄糖孵育溶血不能纠正，只有加入ATP溶血才能纠正。三、红细胞酶缺陷的检测参与红细胞代谢（主要是糖代谢）的酶由于基因缺陷导致活性改变而发生溶血的一组疾病。常见酶缺陷：G-6-PD缺陷PK缺陷常用检查试验高铁血红蛋白还原试验红细胞G-6-PD缺陷时，高铁血红蛋白还原率明显下降；主要见于蚕豆病和伯氨喹啉型药物溶血性贫血。氰化物-抗坏血酸试验红细胞G-6-PD缺陷时，2-4h发生颜色改变；变形珠蛋白小体生成试验红细胞G-6-PD缺陷、不稳定Hb、HbH病等增高；葡萄糖-6-磷酸脱氢酶荧光斑点试验和活性测定红细胞G-6-PD缺陷时，荧光很弱或无荧光；活性降低。丙酮酸激酶荧光筛选试验和活性测定K严重四、珠蛋白生成异常的检查血红蛋白电泳HbA2增高：是诊断β-轻型地中海贫血的重要依据;HbA2减低：见于缺铁性贫血及铁粒幼细胞贫血；胎儿血红蛋白酸洗脱试验阳性主要见于地中海贫血。胎儿血红蛋白测定或HbF碱变性试验β-轻型地中海贫血明显增高。HbA2定量测定限制性内切酶谱分析----Hb病的基因诊断第四节获得性溶血性贫血的常用实验检测抗人球蛋白试验antihumanglobulintest又称Coombs试验原理：本试验是检查不完全抗体的方法，是诊断自身免疫性溶血性贫血的试验。在AIHA病人血液中常含有抗自身RBC的不完全抗体，且多与表面含有相应抗原的RBC结合，使之成为致敏RBC，这种不完全抗体是IgG，故在盐水中并不形成凝集，当加入抗人球蛋白血清后，抗人球蛋白+不完全抗体+RBC形成肉眼凝集，此即Coombs试验阳性，用以检查RBC膜上不