核因子κB整合素αⅤβ3和卵巢癌血管生成关系

1、核因子B整合素3和卵巢癌血管生成关系    【关键词】  血管生成     【摘要】  目的  研究核因子B（nuclear factor B，NFB）、整合素3与人卵巢上皮性癌(human ovarian epithelial carcinoma,hOEC)血管生成的关系。方法  原发性人卵巢上皮癌（hOEC）36份、卵巢良性肿瘤及正常卵巢各15份，应用免疫组化方法（ABC法）检测NFB、整合素3、微血管密度（micro vessel density,MVD）在hOEC、卵巢良性肿瘤

2、及正常卵巢组织中的表达。结果  NFB、3和MVD在 hOEC中的阳性表达率分别为7222%、6667%和（4398±3373）%，在良性肿瘤组织中的表达率分别2667%、667%和（1308±907）%；在正常卵巢组织中的表达率分别为1333%、0和（710±542）%，hOEC组各指标的阳性率均显著高于良性卵巢肿瘤组及正常对照组（P<005）。hOEC中NFB、3与MVD的相关系数分别为06203、06661，各指标与MVD均显著相关（P<001）。NFB阳性表达者3的阳性表达率为8571%，显著高于NFB阴性表达者3的表达率（为25%）

3、（P<005）。结论  NFB、3在hOEC中高表达与其血管生成密切相关，NFB可能通过上调3表达而起核心调节作用。     【关键词】  核因子B；整合素3；人卵巢上皮癌组织；血管生成 The study of relationships between nuclear factor B,integrin 3 and the angiogenesis of ovarian cancer 【Abstract】  Objective  To study the relationships between （nuclear

4、 factor B，NF B）,integrin 3 and the angiogenesis of human ovarian epithelial carcinoma (hOEC).Methods 36 hOEC,15 ovarian benign tissues and normal ovary tissue were selected,and the expressions of NFB,integrin 3 and MVD in hOEC,benign and normal ovarian tissue groups were detected by immunohistochemi

5、cal staining (ABC method).ResultsThe expression rates of NFB, integrin 3 and MVD in hOEC were 72.22%,6667% and (4398±3373)%,respectively,which were 2667%,667% and (1308±907)% in benign tumor and were 1333%,0 and (710±542)% in the normal ovarian tissue.The expression rates of NFB,integ

6、rin 3 and MVD in hOEC were higher significantly than those in ovarian benign tumor and normal ovarian tissue.The correlation coefficient between NFB,integrin 3 and MVD were 06203 and 06661 respectively. There were significant relationship between NFB,bFGF and MVD(P<001).The expression of integrin

7、 3 in NFB positive group were 8571%,higher significantly than that in NFB-negative group.Conclusion  There were significant correlation between the high expressions of NFB,integrin 3 and the angiogenesis in hOEC,NFB may play the key role by up regulate the expression of integrin 3. 【Key words】&

8、#160;  NFB；integrin 3；hOEC；angiogenesis    卵巢上皮癌的生长、转移和预后与肿瘤新血管生成密切相关，抑制肿瘤血管的生成在卵巢癌的治疗中具有巨大的潜力1,2，有研究报道核因子B（nuclear factor B,NFB)可能与多种肿瘤血管生成有关35，但未见其与卵巢癌血管生成关系的报道。 本研究应用免疫组化方法（IHCA）检测卵巢上皮性癌（hOEC）组织、卵巢囊肿、正常卵巢组织中NFB、整合素3的表达，同时定量检测MVD，以研究NFB与卵巢癌血管生成及与整合素3表达的关系,以初步探讨NFB在卵巢癌血管生成中的作用及其

9、可能的机制。 1  材料与方法 11  标本来源  收集19952000年昆明医学院肿瘤医院病理科hOEC标本和良性卵巢肿瘤手术标本。标本经10%福尔马林固定，常规石蜡包埋，连续切片，厚4m，请2位病理学专家重新阅片，依据WHO规定标准判定病理学诊断、组织学类型和组织分级。hOEC 36份，术前均未接受化疗或放疗；卵巢良性肿瘤15份；同时选择因子宫肌瘤切除手术的15份正常卵巢组织作对照。 12  实验试剂  ABC免疫组化试剂盒为PharMingen international 产品，购自深圳晶美生物有限责任公司，批号（lot number,L

10、N：AMF080），抗FRag为Dako公司产品（LN：117），抗NFB为美国Santa Cruz Biotechnology Inc产品（LN：sc-8008），均购自基因有限责任公司；抗整合素3单抗为PharMingen international 产品，购自深圳晶美生物有限责任公司（LN：18060620）；中性树胶为中国上海标本模型厂产品（LN：970125） 13  方法  常规免疫组化ABC法。 14   结果判定  NFB、整合素3的表达根据免疫组化染色阳性的细胞比例判定。NFB、整合素3均定位在胞核和胞浆，按5%以上细胞浆或细

11、胞核呈棕黄色染色者为表达阳性，5%30%细胞阳性染色定为（+），30%50%细胞阳性染色定为（+），阳性细胞比例50%定为强阳性（+），5%的细胞着色或细胞与背景一致不着色定为阴性（-）。MVD计数，先在低倍镜下全面观察切片，以确定MVD最高处。再在高倍镜下，记录5个视野内微血管数，取其平均值作为该病例的MVD值。 15  统计学方法  应用SPSS 90版统计软件包,各组NFB、整合素3、MVD表达的差异应用卡方检验；NFB、整合素3与MVD的相关性应用Spearn分析。检验水准为=005。 2  结果 21  MVD在三组组织的表达  FR

12、ag免疫组化阳性产物呈棕黄色细颗粒状，主要定位于肿瘤细胞间质的内皮细胞,呈环状或点状（图1）。hOEC、卵巢良性肿瘤及正常卵巢组MVD均数分别为4398±3373、1308±907、710±542,3组间比较,hOEC组显著高于卵巢良性肿瘤组及正常卵巢组织组（P<001），良性组与正常卵巢组差异无显著性（P>005）。 22  NFB、整合素3在三组组织的表达  NFB、整合素3免疫组化阳性产物均呈棕黄色细颗粒状，主要定位于肿瘤细胞胞浆和胞核，见图2、图3。hOEC组NFB、整合素3的阳性率分别为7222%、6667%，各指标阳性率

13、均显著高于卵巢良性肿瘤组及正常组（P<005）。见表1。 表1  NFB、整合素3在三组组织的表达  （略） 23  hOEC组中NFB、整合素3与MVD表达的相关性分析hOEC组中NFB、V3与MVD的相关系数分别为06203、06661，二者均与MVD显著正相关（P<001）。 24  hOEC中 NFB与整合素3表达的关系  NFB阳性表达患者整合素3阳性表达率为8571%,显著高于NFB阴性表达者的3阳性表达率（2500%）(P<001)。 3  讨论 NFB是一种多功能转录因子5，涉及到肿瘤血管生成的多个步

14、骤68。Sharma9的研究表明整合素是NFB的靶分子，NFB通过3抑制内皮细胞凋亡，从而促进肿瘤血管生成。该研究中NFB、整合素3与MVD的表达显著相关（P<005）。NFB阳性表达者整合素3的阳性表达率显著高于NFB阴性表达者的3阳性表达率（P<005）。 结合以往的报道，我们推测NFB和hOEC血管生成显著相关，其为hOEC相关的一种癌蛋白，在hOEC的发生、发展中发挥重要的作用。NFB可能通过对整合素3的正向调节作用，而促进卵巢癌血管生成，其不仅可作为hOEC血管生成的标记物，还可作为抗卵巢癌血管生成的治疗靶。 总之，NFB、整合素3在hOEC中高表达与其血管生成密切相关，

15、它可能通过上调整合素3的表达在卵巢癌血管生成中发挥核心调节作用。 （本文图片略） 【参考文献】 1  Paley PJ. Angiogenesis in ovarian cancer: molecular pathology and therapeutic strategies.Curr Oncol Rep,2002,4(2): 165-174. 2  Brown MR,Blanchette JO,Kohn EC. Angiogenesis in ovarian cancer. Baillieres Best Pract Res Clin Obstet Gynaecol 2

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17、transcription factor nuclear factor -kappa B is present in the atheroscerotic lesion.J Clin Invest，1996，97:1715-1722. 5  Stoltz RA,Abraham NG,Schwartzman ML. The role of NF-kappa B in the angiogenic response of coronary microvessel endothelial cells. Proc Natl Sci USA,1996,93:2832-2837. 6 

18、 Raziuddin A,Court D,Sarkar FH,et al.A c-erbB-2 promoter-specific nuclear matrix protein from human breast tumor tissues mediates NF-kappa DNA binding activity.J Biol Chem,1997，272:15715-15720. 7  Shattuck BRL,Richmond A.Enhanced degradation of I-kappa alpha contributes to endogenous activation of NF-kappa in Hs294T melanoma cells. Cancer Res,1997，57:3032-3039. 8  Siebenlist U,Franzoso G,Borozon