动物临床检验

动物临床检验 Clinical Laboratory of Animal戴德顺 董事长 上海双博(动物疾病诊断)生物科技有限公司Shanghai SUBO Bio-Tech Co.,LTD,动物临床检验 (Clinical Laboratory of Animal ) 是一门高度综合性的应用科学,是对动物体获得的各种标本进行生物学、微生物学、免疫学、化学、血液学、细胞生物学、病理学等定性或定量的检验分析,为动物疾病的诊断、预防、治疗、预后、健康评估等提供信息和依据.,动物临床检验的内容一、血液常规检验二、血液生化检验三、血清酶学检验四、肝功能检验五、尿液检查六、肾功能检验七、粪便检验,动物血液标本的制备抗凝剂的选择:肝素(Heptin)干扰少,细胞影响小,时间短枸橼酸钠(trisodium citrate) 与血液中钙离子形成可溶性螯合物,常用于红 细胞沉降率测定草酸钠(sodium oxalate) 与血液中钙离子生成草酸钙,用于凝血象检查乙二胺四乙酸 (EDTA)盐: 与血液中钙离子结合成螯合物,阻止血液凝固 适用血小板计数等多项血液学检查,血常规检验红细胞沉降率 (SER) 血沉红细胞在一定条件下的沉降速度,反映血浆胶体稳定性，如球蛋白，纤维蛋白原增加时，红细胞表面电荷受中和而聚集沉淀魏氏法（westergren）30cm2.5cm 200个刻度1ml加快：传染性贫血，溶血性贫血，营养不良性贫血，出血性贫血，血孢子虫病，急性砷中毒，活动性结核，恶性肝病减慢：严重脱水（腹泻，呕吐，多尿）肠阻塞，传染性胃肠炎，传染性肝炎，犬瘟热,红细胞比积测定(PCV) 一定容量的抗凝血经过一定速度和时间离心沉淀，沉下的红细胞体积和全血体积之比文氏(winerobe)法10cm 3mm 病理性增高： 脱水：急性胃肠炎，渗出性胸膜炎，咽炎，呕吐，便秘 降低：各种贫血，溶血性贫血,红细胞均值平均细胞体积(MCR) 平均红细胞血红蛋白量(MCH) 平均红细胞血红蛋白浓度(MCHC),血红蛋白测定(Hb)比色法，比重法，血氧法，测铁法增多：大量失水，腹泻，大出汗，休克，胸膜腔 渗出性炎症减少：各种贫血及营养不良正常：100ml血液Hb克数犬17.59,猫16.49,血细胞计数( blood cell count)红细胞计数(erythrocyte count)白细胞计数(leucocytes count)血小板计数(platelet count),红细胞计数(RBC)血球计数板的使用上下两块,大方格面积为1mm2，分为25个中方格,每个中方格分为16个小方格,计数盘深度为0.1mm血液标本稀释200倍,计数5个中方格中细胞数和每个细胞代表10000个,相对增多：脱水、急性胃肠炎、肠便秘、渗出性胸膜炎、渗出性腹膜炎、某些传染病绝对增多：红细胞增多症，见于代偿性机能不全的心脏病及慢性肺部疾病减少：各种贫血出血性、溶血性、骨髓造血功能不全性贫血、营养不良性贫血、继发性贫血正常值：犬700/mm3 、猫750/mm3,白细胞计数(WBC) 血液标本稀释20倍,计数4个大方格中细胞数的总数,结果乘以50增多：细菌性感染、炎症、白血病、恶性肿瘤、中毒性疾病减少：病毒性传染病、犬瘟热、猫泛白血病减少症、各种疾病晚期;再生障碍性贫血;药物性降低：磺胺类、氯霉素、青霉素、链霉素、氨基比林、水杨酸钠等;血液原虫病、血液孢子病正常值：犬11500个/mm3 、猫12500个/mm3,血小板计数(BPC)血液标本稀释20倍,计数同红细胞计数结果乘以1000增多：组织损伤和手术后、出血性贫血、肺炎、红细胞增多症,溶血性贫血、胸膜炎、传染性胸膜肺炎减少：再生障碍性贫血、药物中毒、 X线照射后、急性白血病、败血症正常值：犬55万个/mm3 、猫50万个/mm3,犬红细胞和血小板,白细胞分类计数(differential leukocyte count,DC)嗜中性粒细胞计数嗜酸性粒细胞计数嗜碱性粒细胞计数淋巴细胞计数单核细胞计数,动物外周血常见成熟白细胞形态嗜中性粒细胞715核多样,颗粒多,细小均匀,染紫红色嗜酸性粒细胞820分叶核,颗粒粗大,整齐均匀,染橘红色嗜碱性粒细胞1012颗粒量少,大小不均,染深蓝色 淋巴细胞 518 核大圆形,肾形,浆少,偶见少数粗大,不均匀,嗜天青颗粒单核细胞 1020核肾形马蹄形有折叠疏松网状半透明灰蓝色,有细小尘土样、嗜天青颗粒,弥散于胞浆中,犬淋巴细胞,单核细胞和嗜中性粒细胞,犬嗜酸性粒细胞和单核细胞,犬嗜碱性粒细胞,动物临床生化检验 Clinical Biochemistry Laboratory of Animal,动物生化检验经常项目血清离子 Ca P Mg Na K Cl血清蛋白 TP Alb血清葡萄糖 GLU血清胆红素 TB DB血清酶 ALT AST GGT ALP AMY CK 血脂 TG TC HDL-C LDL-C肾功能 RUN CRE UA血氨 NH4+,血钙 降低毛细血管及细胞膜通透性和神经肌肉兴奋性,参与肌肉收缩,细胞分泌,凝血,大部分在骨骼,少量在血浆降低: 动物抽搐,惊厥过高: 神经症状 肌无力,血磷 血磷是血液中的无机磷磷酸根形式存在,缓冲液参与许多生命活动 构成磷脂,细胞膜成分 参与能量代谢,氧化磷酸化形成ATP 参与RNA DNA及许多辅酶合成 参与酶促反应,钙,磷由肾脏排出体外磷酸钙是骨质的主要成分钙含量在血浆中相对稳定血清中钙,磷成反比关系磷取样后立即检验,时间长会假性增高酸中毒可加速有机磷变为无机磷,钙磷通过甲状旁腺素,维生素D(抗佝偻病维生素),降钙素调节血钙下降,甲状旁腺素释放作用于骨组织,骨溶解,钙磷入血浆维生素D增加肠道钙吸收提高钙水平,利于骨组织的钙化血钙升高,甲状腺分泌降钙素,抑制破骨细胞活动和骨盐溶解,促进骨组织钙化,降低血钙成骨细胞释放ALP,促进间质液里磷酸钙的吸收,因此当测定血钙血磷时同时测定ALP,肾脏疾病有一定程度的低血钙, 高血磷,高血磷出现较早,是动物肾脏疾病诊断的重要指标,高血磷预后不好 恶性肿瘤引起高血钙,乳腺瘤,淋巴 肉瘤多见原发性甲状旁腺机能亢进,维生素D 中毒会引起高血钙,血镁含量较低,存在于骨中,肾脏有保镁功能镁与酶催化活动相关抑制周围神经功能,镁缺乏,运动神经兴奋增强镁中毒注射大量钙可拮抗,反之加重,高血镁 肾功能不全或慢性肾病,肾小球滤过率下降,镁排出减少,血清镁浓度升高,心脏传导功能与神经肌肉活动出现抑制,动物出现心动过速,嗜睡,血压降低,肌肉软瘫,而后昏迷,随着镁含量上升,而出现心动过缓,呼吸衰竭,呼吸肌麻痹而死亡 镁离子对心脏血管系统有抑制作用低血镁 诱发各种严重的心率失常,如早搏,室性心动过速,糖尿病常伴低血镁症,高渗利尿引起,病例 犬,三岁 临床症状:呕吐,脱水,失重 实验室检查: 血钙2.2mmol/L,血磷7mmol/L 生化:血尿素35mmol/L ,肌酐650mmol/L,血浆蛋白质测定分类：白蛋白（清蛋白）球蛋白纤维蛋白原 (血清与血浆的区别)化学组成：糖蛋白,脂蛋白,金属蛋白(转铁蛋白,铜蓝蛋白), 免疫球蛋白, 酶类,总蛋白(TP) 下降： 营养不良,贫血,恶性肿瘤,结核,严重蛋白尿的各种肾脏疾病,肝硬变,腹水,急性肝坏死,中毒性肝炎 总蛋白减少是白蛋白减少引起,多发性骨髓病,原虫病,肝硬化时球蛋白增高多于白蛋白降低,总蛋白增高 动物脱水指标,白蛋白(Alb) 含量:50%,分子量:68000-72000道尔顿功能:维持体液胶体渗透压,运输小分子物质, 钙,脂肪酸,胆红素,激素,染料,药物, 半衰期19天增多:脱水,急慢性失水,严重腹泻,大出血减少:炎症,肿瘤,营养不良,肾脏疾病,血清葡萄糖(Glu)增高 1)胰岛素缺乏,糖尿病 2)严重应激(内源性皮质类固醇释放) 3)治疗输液,利尿,药物 4)慢性肝病 5)内分泌紊乱 肾上腺皮质功能亢进,垂 体功能亢进,垂体肿瘤,甲亢,胰腺炎减低 1)胰岛素过多,糖过量利用(感染,肿瘤, 挣扎),丢失(肾病) 2)营养不足 3)重吸收降低,血清胆红素(Bil)总胆红素(T-Bil)直接胆红素(D-Bil)增高 1)肝前性溶血性 2)肝性肝细胞性 3)肝后性阻塞性 减低 红细胞生成降低,血清酶影响细胞外液中酶水平的因素 细胞增殖情况及酶合成速度 细胞逸出到细胞外的速率 药物对酶的诱导和抑制 细胞外液中酶的诱导剂和抑制剂 综合影响,酶活性改变的常见原因组织损伤或细胞通透性增强:细胞内酶大量释放入血抑制活性:如有机磷中毒,抑制胆碱脂酶活性排泄受阻: ALP增多代谢障碍:佝偻病时,维生素缺乏,钙磷代谢障碍,骨软化,软骨细胞和成骨细胞分泌ALP增多合成障碍:严重肝病,凝血酶原合成降低恶性肿瘤:骨肉瘤时ALP增高 肝癌时ALP,GGT增高,谷-草转氨酶(天冬氨酸转移酶,AST,GOT) 广泛存在于动物各器官中,以心肌,骨骼肌,肝脏含量最高,半衰期24小时,红细胞,血小板均有GOT,故取血后要尽快分离血清升高:细胞通透性增加,组织损伤 营养性肌病 有助于诊断肝病,谷-丙转氨酶(丙氨酸转移酶,ALT,GPT) 肝脏含量最高,其次肾脏,心脏,半衰期1-2天升高:肝细胞损害或坏死 肝病诊断指标,r-谷氨酶转肽酶(r-GT,GGT) 存在于肝脏,胰脏以及胆管中,对肝病和胆管疾病 能有效地进行筛选升高:脏疾病和胆汁淤滞时,血清r-GT活性增加,与ALP一致,碱性磷酸酶(ALP,AKP) 广泛存在于动物各组织器官中,尤以骨骼,肝脏,肠黏膜和淋巴中含量高,新生动物未哺乳时高,随年龄逐渐减少升高:骨骼代谢障碍,特别是侵害成骨细胞时, ALP在血清中含量升高,佝偻病时表现特别明显下降:贫血,恶病质,低镁血症抽搐,肌酸激酶(CK) 存在于脑,心,骨骼肌中,脑含量高,但体积小,受伤不影响血清中含量 增高：心肌梗塞时4-6小时含量上升,24-36小时高峰,超过正常10-20倍,3-5天恢复，比GOT,GPT更具特异性,淀粉酶(AMY) 动物血清含量比人高很多,有肠和 胰腺同工酶之分升高：急性胰腺炎发作期,持续时间 短,能通过肾小球,犬患肾炎时升高降低：肝炎,肝硬化,病例 犬,月龄,急性发作,呕吐,腹泻剧热,发 烧,怀疑传染性肝炎,胰腺炎及急性肾病尿检：清亮呈琥珀色,比重1.045,P(-)血常规：WBC 4.3109个/L 中性粒2.2109 个/L 淋巴细胞2.1109个/L血液生化： TP 75g/L Alb 44g/L RUN 15mmol/L CRE 300umol/L GPT 640 IU/L ALP 1000IU/L AMY 800IU/L TB 68umol/L DB 34umol/L,血脂总胆固醇(TC)增高 1)高脂血症 2)肝胆系统疾病 3)肾病 4)钩端螺旋体,白肌病下降 1)低脂饲料 2)产生降低 3)丢失,分解增加 4)严重败血症,甘油三脂(TG)增高 1)原发性高血脂 2)继发性高血脂 3)药物下降 1)急性感染 2)严重贫血 3)甲亢 4)胰脏疾病,尿素氮(BUN)增高 1)肾前性尿素氮 2)肾性尿素氮 3)肾后性尿素氮,肌酐(CRE)增高 1)肾前性肌酐 2)肾性肌酐 3)肾后性肌酐,尿酸(UA)增高 1)原发性尿酸增高 2)继发性尿酸增高降低 1)氨基酸尿 2)先天性黄嘌呤氧化酶缺乏,肝功能 1,代谢 糖代谢:机体能量的来源 维持血糖浓度蛋白质代谢:合成 脱氨 转氨 脂肪代谢:合成分泌胆汁,乳化,消化,吸收脂肪. 合成卵磷脂,胆固醇,胆固醇脂等类脂,氧化脂 肪酸,形成酮体 维生素代谢: Vit A Vit B Vit K 激素代谢:雌激素,脑垂体激素,肾上腺皮质激素 水,电解质代谢:铁15%,铜,2,生物转化变质解毒氧化有机磷,醇,醛,胺结合氨基酸,醛糖酸,乙酰基, 胆红素,磺胺药的乙酰化3,制造和合成胆汁4,排泄ALP r-GT,肝功能实验选择肝细胞膜完整 血清酶活力测定GOT GPT排泄分泌 ALP GGT DB TB合成 Alb TP 凝血因子代谢血氨测定,半乳糖耐量实验,病例犬,4岁,已有5个月食欲不振,体重下降,后急性发作出现黄疸,腹部下垂,烦渴,常喝水,腹部穿刺出2500ml液体,排液后病情稍有好转,4周后死亡 临床怀疑为胆道阻塞尿检:尿深黄色,比重1.012,P(-),Bil(+),尿胆原(+)生化:BUN2mmol/L,GPT200IU/L,GOT150IU/L, TB 143umol/L,DB 110umol/L,BSP腹水检查:比重1.012,蛋白质5g/L,肾功能 排泄机体代谢产物，调节体液与产生某些生理活动物质的重要器官，可保留机体所需物质，排出无用代谢产物和异物，维持水，电解质和酸碱平衡，保持机体内环境稳定 产生肾素，前列腺素，红细胞生