课件：药厂环境监测及培养基质控体系.ppt

生物梅里埃的药厂培养基解决方案 及其质控体系,生物梅里埃为医药工业提供的解决方案,Industrial Applications,The Pharma Industry Control Process 制药工业过程控制,Mission / Environment,Market,bioMrieux and Industrial Applications,The Food Market: bioMrieux Solutions,Conclusion,Detection检测,Identification 鉴定,DiversiLab,VITEK2 Compact,Typing 分型,Detection检测,Preparation of Sample样品准备,Product control 产品控制,Air sample空气采样,Surface sample表面采样,Raw materials 原料,Water 水,Additives 添加剂,Finished products 最终产品,Environmental control 环境控制,Tubes and Bottles,BioBall ,BacT/ALERT,Count-Tact ,AirIDEAL,API,The Pharma Market: bioMrieux Solutions,工业生产过程中的微生物监控,在日常生产的不同阶段，根据不同的监控标准都要用到培养基,原料 1,半成品 2,半成品 3,净化,灌装 & 完成,添加剂 1,添加剂 2,无菌生产,环境监控,这些步骤都被监控以保证产品安全 这样，根据不同的标准每一步骤都是成功的,表面,Count Tact 平板 规则表面,Quantiswab 不规则表面 无生物危害的表面,Air IDEAL 3P 主动采样,沉降法 被动采样,空气,Plates 手 / 胸口/ 胳膊,人员,环境监测的范围,接受的标准,European GMP GMP(根据EC), 修订本附录 1, 无菌药品的生产,“在无菌生产过程中最终要的实验室控制之一是 环境监控程序” (通过无菌生产过程生产无菌药品 Current Good Manufacturing Practice(cGMP) - FDA 2004),Build the Quality IN the Product,环境监控是无菌生产过程的关键,不同等级的环境要求,ISOLATOR隔离间,辐射消毒 + 不能渗漏,三重包装的培养基,实验室,标准化的培养基,无菌间,三重包装的 辐射消毒培养基,区域入口的安全,区域入口的安全,+ 空气影响安全,(单层包装、非辐射培养基),环境监测培养基,接触平板：Count-Tact TM系列，应用于规则平面的检测 细菌总数 Count-TactTM平板，含4种中和剂(卵磷脂、吐温80、L-组胺酸、硫代硫酸盐) 霉菌和酵母菌 含氯霉素的沙保弱葡萄糖Count-TactTM平板,通用的培养基: 应用于棉签采样，空气采样的检测 细菌总数 TSA胰酶大豆平板 含中和剂的胰酶大豆平板 霉菌和酵母菌 沙保弱葡萄糖平板 含氯霉素沙保弱葡萄糖平板,3P 系列,3P 系列 Pharmaceutical Proven Performances 制药的 被认证的 性能,制药业质控的标准,来自于3P系列的革新,3P 系列 Pharmaceutical Proven Performances 高性能的培养基: 卓越的生长能力 中和能力 快速和广泛的检测 药典菌株 + 工业环境分离的菌株 制药业生产环境检测条件,3P 系列,符合3P要求，可室温储存,2-25C,原料选择,试用批次,脱水产品,成品培养基,IPC 监控,最终放行产品,整体质控方案,IPC=In Process Control,生物梅里埃的革新产品确保了结果的有效和可靠,而且, 对于每一个生产批次, 生物梅里埃确保了从生产原料到最终产品的全部控制: 原料分析和性能检查 用我们的TSA标准来评估最终产品的性能,目的: 避免培养基的性能差异和变化,OK,OK,拒绝,不同批次的培养基,竞争对手,生物梅里埃,热冲击实验,时间,温度,相同的储藏温度,根据相关标准的性能质控,热冲击,没有进行热冲击的参考批次,热冲击实验,生物梅里埃的革新产品确保了结果的有效和可靠,USP 1117: 在持续性生产中，天然原料的差异不可避免，因此，不同批次间培养基的差异是可接受的。 每一生产批次和产品生产过程中都应该对不同批次进行批次差异分析:,来自于3P系列的革新,我们的目标: 满足微生物最快速、最广泛的生长要求，可室温存储,独特的产品质量标准,生物梅里埃对培养基营养能力的定义: 菌落数量 / 菌落大小 (QC) 生长动力学 最大的恢复率 生物梅里埃对培养基营养能力的认证: 原料 (蛋白胨, 预混合物, 脱水培养基) 产品生产阶段 每批培养基产品,完全符合药典的 质控体系,表面控制: 设备,运送平板 : 55mm / 90mm,BI-BOX,采样的标准化: 500g; 10s,APPLICATOR 接种器,QUANTISWAB 新的尼龙植绒拭子技术带来了: 微生物的高恢复率 高的释放能力 增加了安全性: 减少了操作步骤 降低了假阳性风险 (操作人员的污染) 易于使用: 更少的操作步骤 3层包装, 可用于Isolator,生物梅里埃革新的Swab技术,传统拭子法应用中的局限性,传统拭子法应用时需许多步骤,1,2,3,4,5,6,7,接种,湿润拭子,表面采样,转移至肉汤,震荡,膜过滤,将膜放于平板上,接种,QUANTISWAB,尼龙植绒技术 完全革新 惰性材料 不会干扰微生物 高恢复力 高释放力 三层包装 辐射灭菌 可用于isolator 定性和定量 可靠的结果 第一次可依靠拭子采样的结果直接计数 相对于目前有局限性的传统技术，表现出了卓越的性能,3 种可能的操作,当前的QUANTISWAB,新QUANTISWAB (2 种选择),PDA:与传统人造纤维拭子比较技术,从表面采集细菌 直接接种到平板的恢复率 QUANTISWAB: 60% 人造纤维拭子: 20% 涡旋震荡以后再接种到平板，得到的最大恢复率(与直接接种相比额外增加的恢复率 QUANTISWAB : 大约增加了4% 人造纤维拭子: 增加仅仅0,3% QUANTISWAB : 表明在震荡前就已经几乎释放了所有采集到的微生物 人造纤维拭子: 细菌仍然被人造纤维的陷阱困住，即使震荡也很难使其释放 细菌直接加到拭子上，然后直接接种到平板 释放能力 QUANTISWAB : 90% 人造纤维拭子: 20% 结论: 安全且易于使用 与人造纤维拭子相比QUANTISWAB具有更高的恢复率和释放率,空气监测的解决方案,Air Ideal 3P空气采样器,air IDEAL 3P的性能,对单向流动的空气干扰程度很小,重量轻: 1.2公斤，便携，操作简单，符合人体工程学设计的手柄,保护盖去除报警功能,电池报警功能,三角架,容易清洁: 表面光滑，无死角，可抵受不同消毒剂,无需特制的90mm琼脂平板,标配5 个采样隔网: 可互相交换使用，可於 134oC高温高压消毒,- 空气撞击培养基的速度必需 20米/秒。 (i) 速度必须高至足以有效采集 1um的颗粒。 (ii)速度必须低至防止高速撞击影响微生物的活性，例如机械性损害；击碎细菌/真菌聚集体。 - 空气吸进速度必须维持 100L/min。 (i) 速度必须较高以减少采样所需时间，足够的空气标本方能确保低污染程度的可靠检测。 (ii)避免长时间吸样，造成培养基物理性质/化学性质的变化。,ISO / DIS 14698-1,Air IDEAL 3P 的性能,符合 ISO 14698,物理效率,空气中包含细菌的颗粒大小通常为5 15 微米,对于大小在2.1 14微米的颗粒，air IDEAL 3P具有很高的采集效率,Air IDEAL 3P 的性能,效率 100% 金标准,生物效率,和金标准相比在生物效率方面没有太大区别,和市场上同类产品相比，在生物效率方面有明显优势,Air IDEAL 3P 的性能,Air-sampler B: MAS 100 Air-sampler C: RCS Plus Air-sampler D: SAS super 100,效率 竞争对手,相关验证及文件,相关文件,Qualification Guideline (new version) 3Q认证文件,User Manual 使用手册及及,Quality Control Certificate 质量控制证书,Calibration Certificate 校验证书,相关验证,Physical Validation following ISO 14698 (物理效率验证),Biological Validation following ISO 14698 (生物效率验证),Air Circuit Decontamination Validation (空气环路除菌验证),Use in Isolators Validation (Isolators验证),无菌产品解决方案,清洗液：Rinsing solutions (Fluid A、Fluid D),需养菌：Trypcase-soy broth (TSB：胰酶大豆肉汤),厌氧菌：Thioglycollate broth (FTM：液体硫乙醇酸盐肉汤),无菌测试用培养基的质量控制,无菌测试用培养基的质量控制,无菌检测的自动方法,非无菌产品的检测,完全符合药典的培养基,非无菌产品的解决方案,无菌过程控制,无菌灌装实验的解决方案,FDA法规 “通过无菌过程生产无菌类药品 cGMP” 2004年9月 EU 的GMP法规，附录 1 “无菌药品的生产” PDA 技术报告 22 (TR22) “无菌灌装产品的过程模拟测试” PDA 制药科技杂志 “无菌生产过程的思考”, 增刊 57卷, 第二期, 2003 PIC/S PI 007-3 “推荐一种无菌生产过程验证方法” (2007-9-25),无菌灌装实验的解决方案,灌装培养测试,净化步骤 (过滤),无菌灌装 & 完成步骤,与水混合,不同阶段的中间产品,过滤 / 净化,添加剂,去除病毒,无菌灌装,预过滤,最终分装,单独的大包装,原料混合 / 预培养的细胞 / ,尽可能模拟日常无菌生产过程的灌装测试,无菌灌装实验的解决方案,培养基: 通常使用: 胰酶大豆肉汤: TSB,TSB 说明: 脱水干粉 辐射灭菌 25 kGy 无支原体污染 可冷滤 无疯牛病风险 (原料选择),无菌灌装实验的解决方案,两种规格: 动物蛋白胨: 符合USP / EP / JP的要求，能够满足非苛氧微生物的生长 (细菌, 酵母菌, 真菌和一定的厌氧细菌) 货号 51101: 5kg 货号 51102: 500g 植物蛋白胨: 针对潜在污染的专利的颜色指示剂 符合USP / EP / JP的要求，能够满足非苛氧微生物的生长 (细菌, 酵母菌, 真菌和一定的厌氧细菌) 货号51103: 5kg 货号51104: 500g,无菌灌装实验的解决方案,植物蛋白胨TSB: 颜色指示剂 更易发现污染 不再有样品阅读的瓶颈 无动物源性 对于做细胞培养的客户来说非常重要 他们需要无动物源性的产品 无疯牛病的风险,Patented,植物蛋白胨,为客户提供安全和简便 污染发生时红色消失 与通过浑浊度观察相比，更加容易判断是否然 污染(不透明的小瓶),部分变色,全部变色,新鲜配制的植物蛋白胨TSB,无菌灌装实验的解决方案,两种包装: 500g包装(通常的脱水干粉的包装) 无双层包装 5kg包装 (带手柄的桶) 桶内的干粉另有双层包装,灌装实验: 代给客户的好处,特性,代给客户的好处,BioBall: 菌株定量质控的创新产品,BioBall 是一个很小的水溶性球状物，包含了数量精确的微生物个体，它使微生物质控中的定量控制达到了空前的精确。 2-3 mm 水溶性 冻干 生产厂商,BioBall 的生产技术,设备通过区分不同群体微生物颗粒的物理和生理状态，来选择细胞： 仅仅状态好的微生物被选择制作成BioBall,BioBall 按照最高的质量标准进行生产，完全符合ISO Guide 34 的要求. ISO Guide 34 是一个对于标准物质生产商的标准要求。 ISO Guide 34认证，意味着BioBall 的用户，完全可以信赖BioBall所使用的菌株的可追溯性和分析证书。,BioBall 在制药工业的应用,培养基的生长能力验证实验: 微生物计数检测 (TAMC, TYMC): USP 61 total aerobic microbial count (TAMC); total combined yeast and mould count (TYMC) 特定微生物的检测: USP 62 无菌检测 : USP 71 灌装培养检测 : FDA cGMP 每批都要求: 接入培养基作为质控的标准菌株“不超过100CFU”,BioBall有哪些类型？,不同的类型: BioBall SingleShot : 30 CFU / BioBall BioBall MultiShot 550 : 550 CFU / BioBall BioBall HighDose - 10K : 10 000 CFU / BioBall BioBall MultiShot 10E8 : 108 CFU,制药业质控菌株,用于制药工业质量控制的BioBall菌株,菌株来自NCTC、NCPF、IMVS、NCIMB和ACM；ATCC是一个商业的美国标准菌库；售出的BioBall将至少有6个月效期。,用于 一次性接种,达到了空前的精确 30 CFU / BioBall 每个产品的含菌量都在 28 至33 CFU之间 标准偏差 3 CFU 是当一天中仅仅进行一次或少量几次高精确度接种量要求的接种时的理性产品 每个包装含20瓶，每瓶含 1 BioBall 20 测试 / 盒,提供10次精确接种量- 低的变化率 550 CFU/BioBall 每个产品的含菌量都在 500 至 600 CFU 标准偏差: 10 % 用1.1mL复溶液体重新溶解后: 可得10 x 100 L溶剂: 可用于10个测试, 每份剂量含 50 cfu 复溶液保存至4可保存8小时 是在同一时间或同一天进行多次质控的理性产品 每个包装含20瓶，每瓶含 1 BioBall 200 测试 / 盒,使用说明,BioBall SingleShot,BioBall MultiShot,BioBall HighDose - 10K用于方法验证,方法验证: 为产品建立适当的计数方法,为产品建立适当的检测方法,EP 6 Chap 2.6.12 JP 15 Chap 35.1 USP 30 Chap 61,目的：正如 USP 61 章所描述的，可用于某些产品的微生物计数的验证方法，接种量 100CFU。,取10g产品，用90mL缓冲液稀释,将稀释好的样品分为10管，每管10mL,用1ml 复溶液溶解 BB HD 10K 得到10 000 CFU / 1ml,每管接种 100l BB HD 10K得到 1 000CFU / 10ml 或 100 CFU / 1ml,倾注 1ml 上述配制的液体 则每个平板的接种量 100CFU),方法