胎盘组织中IGF―1和IGF―2表达水平与妊娠期糖尿病巨大儿发生的相关研究

-精选财经经济类资料- -最新财经经济资料-感谢阅读- 1 胎盘组织中 IGF1 和 IGF2 表达 水平与妊娠期糖尿病巨大儿发生的 相关研究 摘要 目的 探妊娠期糖尿病 （GDM）巨大儿与胎盘组织中胰岛素 样生长因子-1（IGF-1） 、胰岛素样生长 因子-2 （IGF-2）表达水平的相关性。 方法 选取 2014 年 4 月2016 年 12 月 在南京医科大学附属妇产医院产科住院 并确诊为 GDM 的初产妇分娩的巨大儿 40 例为 GDM 巨大儿组，同期健康初产 妇分娩的巨大儿 40 例为健康巨大儿组， 同期健康初产妇分娩的正常体重儿 40 例为对照组。比较三组新生儿胎盘组织 中 IGF-1 和 IGF-2 表达水平，分析 IGF- -精选财经经济类资料- -最新财经经济资料-感谢阅读- 2 1 和 IGF-2 表达水平与 GDM 巨大儿发 生的相关。 结果 GDM 巨大儿组胎盘 组织中 IGF-1、IGF-2 mRNA 表达水平 均显著高于健康巨大儿组及对照组（P 0.05） ；二元 Logistic 回归分析结果发现： IGF-1、IGF-2 水平为 GDM 巨大儿发生 的危险因素（OR = 3.490，95%CI：2.5376.928，P = 0.017；OR = 2.077，95%CI：1.0984.997，P=0.023 ） 。 结论 GDM 巨大儿患者胎盘组织中 IGF-1、IGF-2 表达水平显著增高，IGF- 1、IGF-2 表达水平与 GDM 巨大儿的发 生显著相关。 中国论文网 /6/view-12954774.htm 关键词 妊娠期糖尿病；巨大儿； 胎盘；胰岛素样生长因子-1；胰岛素样 生长因子-2 中图分类号 R714.256 文献标 识码 A 文章编号 1673-7210（2017） 10（c）-0112-04 Correlation between expression of -精选财经经济类资料- -最新财经经济资料-感谢阅读- 3 IGF-1 and IGF-2 in placenta and the occurrence of gestational diabetes mellitus CAI Manhong CHENG Qing Department of Obstetrics and Gynecology， Affiliated Maternity Hospital of Nanjing Medical University， Nanjing Province， Jiangsu 210004， China Abstract Objective To explore the correlation of gestational diabetes mellitus （GDM） macrosomia with the expression of insulin-like growth factor-1 （IGF-1） and insulin-like growth factor- 2 （IGF-2） . Methods Forty neonates with macrosomia given birth by primiparas who were admitted to Department of Obstetrics of the Affiliated Maternity Hospital of Nanjing Medical University from April 2014 to December 2016 and confirmed with GDM were assigned to the GDM macrosomia group， 40 neonates with macrosomia given birth by healthy -精选财经经济类资料- -最新财经经济资料-感谢阅读- 4 primiparas over the same period were assigned to the healthy macrosomia group， and 40 neonates with normal weigh given birth by healthy primiparas over the same period were assigned to the control group. The expression of IGF-1 and IGF-2 in the neonates placenta was compared between the three groups， and the correlation of IGF-1 and IGF-2 expression with the development of GDM macrosomia was analyzed. Results Expression of IGF-1 and IGF-2 mRNA in placenta was significantly higher in GDM macrosomia group than that in healthy macrosomia group and control group （P 0.05） ； binary Logistic regression analysis identified IGF-1 and IGF-2 levels as the risk factors for macrosomia in GDM （OR = 3.490， 95%CI： 2.537- 6.928， P = 0.017； OR = 2.077，95%CI： 1.098-4.997， P = 0.023）. Conclusion Expression of IGF-1 -精选财经经济类资料- -最新财经经济资料-感谢阅读- 5 and IGF-2 in placenta is significantly elevated in patients with GDM macrosomia； expression of IGF-1 and IGF-2 is significantly correlated with the development of GDM macrosomia. Key words Gestational diabetes mellitus； Giant children； Placenta； Insulin-like growth factor-1； Insulin-like growth factor-2 妊娠期糖尿病（gestational diabetes mellitus，GDM）是糖尿病的一 种特殊类型，指怀孕期间首次出现或发 生的不同程度的糖代谢异常的现象。据 不完全统计，我国 GDM 发病率在 5% 左右，且呈现急剧上升趋势1-2。孕妇 GDM 与巨大儿发生关系密切，巨大儿 是 GDM 孕妇临床上最常见的不良妊娠 结局。目前已有研究发现，母体血清胰 岛素样生长因子（insulinlike growth factors，IGF ）在调节胎儿发育及胎盘 生长方面有着显著作用，已逐渐成为近 期研究热点，但基于孕妇胎盘组织中 -精选财经经济类资料- -最新财经经济资料-感谢阅读- 6 IGF mRNA 表达水平与巨大儿发生的相 关性报道较少。本研究拟通过对比分析 IGF-1、IGF-2 基因 mRNA 在 GDM 孕 妇分娩的巨大儿、健康孕妇分娩的巨大 儿及健康孕妇分娩的正常体重儿胎盘组 织中的表达水平，探讨 IGF-1 及 IGF-2 在 GDM 巨大儿发生中的作用，为临床 上防治 GDM 及巨大儿的发生提供依据。 1 资料与方法 1.1 一般资料 选取 2014 年 4 月2016 年 12 月 在南京医科大学附属妇产医院产科住院 并确诊为 GDM 的初产妇分娩的巨大儿 40 例为 GDM 巨大儿组，孕妇平均年龄 （30.21.3）岁，分娩孕龄 3940 周。 纳入标准：GDM 孕妇，即受试者妊 娠 2428 周口服葡萄糖耐量试验 （OGTT）3-4中，空腹及服糖后 1、2 h 的血糖值分别达到或超过 5.1 mmol/L（91.8 mg/dL） 、10.0 mmol/L（180 mg/dL） 、8.5 -精选财经经济类资料- -最新财经经济资料-感谢阅读- 7 mmol/L（153 mg/dL） ；新生儿体重 4000 g5；初次妊娠，足月单胎； 病例资料完整。排除标准：病例资 料不完整；孕妇合并其它类型妊娠并 发症；孕妇合并其他系统疾病。随机 选取同期健康初产妇分娩的巨大儿 40 例为健康巨大儿组，孕妇年龄 （28.60.3）岁，分娩孕龄 3940 周； 同时选取同期健康初产妇分娩的正常体 重儿 40 例为对照组（C 组） ，孕妇平均 年龄（29.10.4）岁，分娩孕龄 3940 周。三组孕妇年龄、孕龄比较，差异无 统计学意义（P 0.05） ，具有可不行。 本研究经医院医学伦理委员会批准进行。 1.2 检测方法 1.2.1 胎盘组织的取材及处理 胎 盘娩出后 10 min 内于近脐根部胎盘母 体面中央（避开钙化、坏死、出血点） 取 2 份体积约 1 cm3 的绒毛组织，用已 灭菌的生理盐水将其反复冲洗，去净血 液，装入 1.5 mL EP 管封存，标记受试 -精选财经经济类资料- -最新财经经济资料-感谢阅读- 8 者姓名及日期，置于液氮中备用，以待 后续提取 RNA 等，行 RT-PCR 检测。 1.2.2 RNA 的提取及逆转录 应用 Invitrogen 公司生产的 Trizol 试剂盒， 按说明书的步骤分别提取 RNA。逆转 录反应采用 Fermentas 公司反转录试剂 盒RevertAidTM First Strand cDNA Synthesis Kit（K1621） ，按说明书使 用。使用 NANO DROP 2000 试剂盒检 测样本 cDNA 的浓度与纯度。 1.2.3 RT-PCR 反应检测 IGF- 1、IGF-2 以 GAPDH 作为内参基因， 引物由上海生工公司？R 合成，引物 序列如下，见表 1。用 Oligo 6.0 评价引 物。建立 PCR 反应体系，先在 95条 件下预变性 10 s，然后 95条件下正式 变性 5 s，60退火延伸 30 s，扩增 40 个循环；用 ABI7500 分析软件定量分析 PCR 结果，用各样品的浓度对数制作标 准曲线，其中 Ct 值为反应管内荧光信 号达到阈值时所经历的循环数，Ct 表示试验组与对照组Ct 之差，用 2 -精选财经经济类资料- -最新财经经济资料-感谢阅读- 9 Ct 表示目的基因的相对表达量。 1.3 统计学方法 采用 SPSS 23.0 统计学软件进行 数据分析，计量资料用均数标准差 （xs）表示，多组间比较采用单因素 方差分析，组间两两比较采用 LSD-t 检 验；计数资料用率表示，组间比较采用 2 检验，多因素分析采用 Logistic 回归 分析，以 P 0.05） 。见表 2。 2.2 IGF-1、IGF-2 与 GDM 巨大 儿发生的相关性 以 GDM 孕妇是否发生巨大儿为 因变量，以年龄、孕龄、IGF-1、IGF-2 为自变量，进行二元 Logistic 回归分析。 结果发现，IGF-1、IGF-2 水平为 GDM 巨大儿发生的影响因素，且均为危险因 素（OR1） 。 3 讨论 巨大儿发生率在 GDM 的孕妇中 显著高于正常孕妇6-8，但具体发病机 制至今仍不明确。目前主要观点认为， 孕妇体内持续代谢紊乱导致的高血糖状 -精选财经经济类资料- -最新财经经济资料-感谢阅读- 10 态与巨大儿的发生有密切关系9-10。 巨大儿是 GDM 孕妇临床上最常见的不 良妊娠结局，GDM 巨大儿在分娩过程 中产妇较易发生产道损伤、产程延长、 产后出血、子宫破裂等；而巨大儿则较 易出现肩难产、胎儿窘迫、新生儿锁骨 骨折、新生儿头颅损伤、臂丛神经损伤 等并发症，且出生后新生儿肺炎、低血 糖、高胆红素血症等围生期并发症发生 率也有所升高，因此探索预防 GDM 巨 大儿发生的有效方法有着重要的意义。 近年来研究证明11-13孕妇血清 中 IGF 因子的表达情况与新生儿体重关 系密切，IGF-l、IGF-2 表达水平降低与 胎儿宫内生长受限有直接关系，且孕妇 血清中 IGF-l、IGF-2 表达增加时巨大儿 出生率较正常孕妇高14 。IGF 是一类 具有胰岛素样代谢和促有丝分裂功能的 多肽，由 IGF-1 和 IGF-2 两种同源多肽 组成15-16。其中 IGF-1 主要在出生后 及成年期l 挥作用介导生长激素的促 生长效应，IGF-2 是重要的胚胎生长和 -精选财经经济类资料- -最新财经经济资料-感谢阅读- 11 发育的调节因子