专题十(第2课时)验证、鉴定类类实验

1、名校名 推荐专题十实验、实习和研究性学习第 2 课时验证、鉴定类类实验 复习范围 （ 1）生物组织中还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定（ 5）比较过氧化氢酶和 Fe 3+ 的催化效率（ 8）叶绿体中色素的提取和分离（ 12）DNA的粗提取与鉴定 典题导引 例 1有时候，由于实验材料用品所限而需要设法替代。下列各项中正确的是（）A. 做植物细胞有丝分裂实验时，可用蒜叶代替洋葱B. 做植物细胞质壁分离和复原实验时，可用30%的食盐溶液代替 30%的蔗糖溶液C. 做叶绿体色素提取和分离实验时，可用乙醇代替丙酮D. 做 DNA 粗提取与鉴定实验时，可用新鲜猪血代替鸡血 解析 : 做植物细胞有丝分裂实验时，目的

2、是要观察细胞分裂，而蒜叶细胞不分裂，故不能代替洋葱 ( 根尖 ) 。不能用 30%的食盐溶液代替 30%的蔗糖溶液，因为 30%的食盐溶液浓度太高，分离速度快，会使细胞过度失水而死亡。色素可以溶解于有机溶剂，如丙酮、酒精、石油醚， 故可以用酒精 ( 乙醇 ) 代替丙酮。猪是哺乳动物，其成熟红细胞没有细胞核，也就无法提取 DNA并鉴定，故不可以用新鲜猪血代替鸡血。 答案 :C 例 2在生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定实验中，对实验材料的选择叙述中，错误的是A 甘蔗茎的薄壁组织、甜菜的块根等，都含有较多的糖且近于白色，因此可以用于进行可溶性还原糖的鉴定B花生种子含脂肪多且子叶肥厚，是用于

3、脂肪鉴定的理想材料C大豆种子蛋白质含量高，是进行蛋白质鉴定的理想植物组织材料D鸡蛋清含蛋白质量高，是进行蛋白质鉴定的动物材料 解析 物质鉴定实验选材时，首先要考虑生物组织中待鉴定物质的含量，其次考虑是否易于鉴定或进行物质的分离和提取等因素。 B、 C、 D 所选材料均是适宜的， A 项中甘蔗、甜菜虽含糖多，但主要为蔗糖，而蔗糖为可溶性糖，所以不能作为实验材料。 答案 A 例 3 分别向 4 支各盛有5 mL 过氧化氢溶液的试管内加入肝或砂子，其中A 中加入一块 1g 重的肝脏， B 中加入 1g 碾碎的肝脏，C 中加入 1g 煮沸并冷却的碾碎肝脏，D 中只放等量的砂子。在这个实验中，试管A 放

4、氧相对缓慢，试管C 和 D 不放氧。请回答：（ 1）肝脏中有什么物质能引起过氧化氢释放氧气？理由是什么？（ 2）为什么用煮沸冷却的肝脏做对照要比用砂子做对照更好些？（ 3）为什么试管B 放氧速度比试管A 快？ 解析 任何活细胞中都有酶，不同的细胞中含有酶的种类可能不同。细胞破碎后细胞中的酶便释放出来，酶的催化作用在任何时候都受环境条件的影响。（ 答案 （ 1）在肝脏中含过氧化氢酶，它能催化过氧化氢分解成水和氧气。1名校名 推荐（ 2）因煮沸冷却的肝中同样含有过氧化氢酶，只是因煮沸后，酶失活，所以该对照实验还能说明温度过高，酶将丧失活性。（ 3）试管 B 碾碎的肝中，细胞中的酶容易释放出来。 例

5、 4 在 DNA 的粗提取实验过程中，两次向烧杯中加入蒸馏水的作用是A 稀释血液，冲洗样品B 使血细胞破裂、降低NaCl 浓度使 DNA 析出C使血细胞破裂、增大DNA 溶解量D 使血细胞破裂、提取含杂质较少的DNA 解析 第一次加入蒸馏水的作用是使血细胞过度吸水而破裂，以便核内物质释放。第二次加入适量蒸馏水，是为了降低NaCl 浓度，使DNA因溶解度达到最小而析出。 答案 B 归类总结 实验原理与疑难点拨：1、生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定原理：根据某些化学试剂与所鉴定的物质产生特定的颜色反应设计不同的实验来鉴定这些物质的存在。疑难点拔： 本实验为验证类实验。葡萄糖、 果糖和麦芽

6、糖的分子内含醛基，醛基具有还原性，可与弱氧化剂反应。 与醛基有特定颜色反应的化学试剂可用来鉴定这三种糖的存在：a、利用斐林试剂；b、利用班氏试剂：由A 液（ CuSOO4 溶液 ）和 B 液（柠檬酸钠和碳酸溶液）配制而成；c 利用银氨溶液；结果出现银镜。脂肪的鉴定可用苏丹III 、苏丹IV 。蛋白质的鉴定可用双缩脲试剂、浓硝酸试剂 （结果形成黄色沉淀）斐林试剂与双缩脲试剂都由 NaOH 和 CuSo4 组成，但二者有以下不同：a、溶液浓度不同；b、使用原理不同（斐林试剂是新配制的Cu(OH) 2 溶液；双缩脲试剂是碱性环境下的Cu2+） c、使用方法不同。2、比较过氧化氢酶和Fe 3+ 的催化

7、效率疑难点拔：该实验可改为为探索类实验，应合理设计对照实验，严格控制实验变量。3、 DNA 的粗提取与鉴定疑难点拔： 制备鸡血细胞液时离心后除去上清液。实验过程中两次加入蒸馏水的作用不同。 第一次的目的是为了使外界溶液浓度于血细胞内细胞液的浓度，细胞大量吸水胀破得到 DNA ；第二次的目的是降低Nacl 溶液浓度到DNA 溶解度最低点，这样DNA 分子可以从 Nacl 溶液中析出。4、叶绿体中色素的提取和分离原理：叶绿体中的色素能溶解于丙酮中，可以用丙酮提取叶绿体中的色素。色素在石油醚中的溶解度不同，随石油醚在滤纸上扩散的速度不同，从而分离四种色素。步骤： 提取色素 （取材研磨过滤）制备滤纸条

8、画滤液细线分离色素（准备层析液放入滤纸条）观察。疑难点拔： 四条色素带的分布与色素扩散速度有关，而扩散速度大小由分子量大小所决定，这四种色素的分子式及相对对分子质量分别是：胡萝卜素（ C40H 56）536、叶黄素（ C40H 56O2）568、叶绿素 a（ C55H 72O5N 4Mg）892、叶绿素 b（ C55H70O6N 4Mg）906，所以色素带从上到下，即扩散从快到慢依次为胡萝卜素、叶黄素、叶绿素a、叶绿素b。胡萝卜素与叶黄素分子量相差 32，叶绿素a 与叶绿素b 的分子量相差14，故前二种色素的距离大于后二种色素的距离。色素带的粗细与色素的含量有关。通常叶绿素含量是类胡萝卜素的四

9、倍，叶绿素a 的含量是叶绿素b 的三倍， 叶黄素含量是胡萝卜素的二倍，含量越多，色素带就会越浓越粗，故由浓粗到淡细依次是：叶绿素a 叶绿素 b 叶黄素 胡萝卜素。2名校名 推荐 课堂反馈 一. 单项选择 :1.在比较过氧化氢酶和Fe3+催化效率中把肝脏制成研磨液的目的是A 有利于 过氧化氢酶的释放B 保护过氧化氢酶C提高过氧化氢酶的活性D 以上说法都不对2. 某人做实验时，用了放置时间很久的蔗糖，结果，此对照试管加入斐林试剂后，也出现了砖红色的沉淀，原因是A 蔗糖是还原糖B蔗糖被淀粉酶分解成还原性糖C蔗糖放 置久了，被微生物分解成还原糖D 斐林试剂失效3.在 DNA 的粗提取与鉴定实验中，有两

10、次DNA 的沉淀析出，其依据的原理是 DNA 在 NaCl 的物质的量浓度为 0.14mol/L 时溶解度最低 DNA 在冷却的体积分数为 95%的酒精中能沉淀析出A 两次都是B 两次都是C第一 次是，第二次是D 第一次是，第二次是4.对三次过滤的叙述中，不正确的是A 第一次过滤后，核物质存在于滤出的固体物中B第二次过滤后，使用多层纱布，DNA 存在于纱布上的黏稠物中C第三次过滤后，DNA 存在于滤液中，可进一步除去非DNA 物质D上述 B、 C 均正确5. 叶绿体中色素的提取和分离实验主要证明了A色素分布在叶绿体片层结构薄膜上B叶绿素的含量是类胡萝卜素的四倍C叶 绿体中色素的种类和各种色素的

11、颜色D四种色素扩散速度不同二 .填充题 :6.组成生物体的化合物有可溶性还原糖（葡萄糖、果糖、乳糖）、脂肪、蛋白质等物质。能与某些试剂发生反应， 产生特定的颜色变化， 从而鉴定生物组织或分泌物中这些化合物的存在。现欲鉴定牛奶中是否有乳糖、脂肪和蛋白质的存在。（ 1）该实验所需的材料和试剂至少要有牛奶、吸管、试剂、 _、_、_和仪器 _等。（ 2）对斐林试剂和双缩脲试剂的配方，叙述不正确的是（）A. 都含有氢氧化钠溶液和硫酸铜溶液B. 斐林试剂的配制是将4 5 滴的 0.05 g/mL 的硫酸铜溶液滴入2 mL 0.1 g/mL的氢氧化钠溶液中即成C. 双缩脲试剂是将34 滴的 0.01 g/m

12、L 的硫酸铜溶液滴入2 mL 0.1 g/mL的氢氧化钠溶液中混合而成的D. 双缩脲试剂含有两种试剂：0.1 g/mL 的氢氧化钠溶液和0.01 g/mL 的硫酸铜溶液（ 3）用双缩脲试剂鉴定牛奶中的蛋白质实验时，正确的操作顺序为（）A. 2 mL 牛奶稀释液先加0.1 g/mL 的氢氧化钠溶液， 再加 3 4 滴 0.01 g/mL 的硫酸铜溶液B. 2 mL 牛奶稀释液先加3 4 滴 0.01 g/mL 的硫酸铜溶液， 再加 0.1 g/mL 的氢氧化钠溶液3名校名 推荐C. 2 mL 牛奶稀释液同时加入0.1 g/mL 的氢氧化钠溶液和0.01 g/mL 的硫酸铜溶液D. 在 0.1 g

13、/mL 的氢氧化钠溶液和0.01 g/mL 的硫酸铜溶液的混合液中加入2 mL 牛奶稀释液（ 4）实验需要用显微镜的是（）A. 还原糖的鉴定B. 蛋白质的鉴定C. 脂肪的鉴定D. 全都要（ 5）在本鉴定实验中必须加热的是（）A. 斐林试剂鉴定还原性糖B. 苏丹或苏丹染液鉴定脂肪C. 双缩脲试剂鉴定蛋白质D. 上述都需要（ 6）鉴定脱脂奶粉是否属于假冒伪劣产品，肯定不需要用到的化学试剂是（）A. 双缩脲试剂B. 二苯胺试剂C. 斐林试剂D. 苏丹染液（ 7）某些单子叶植物中，如大蒜、韭菜等叶子中含有大量的还原糖，但这些单子叶植物的叶子不宜作实验材料，原因是_。7.铁在生物的生命活动中具有非常重要

14、的作用。（ 1）若植株缺铁，首先变黄的部位是叶；若人体摄入铁的量过少，会引起的合成量减少，进而引起红细胞运输氧的能力降低。（ 2） Fe3+ 可作为过氧化氢分解的无机催化剂，新鲜的肝脏研磨液中含有过氧化氢酶。某同学做了两种催化剂的比较实验，实验记录如下：请判断该实验记录是否正确？ ，说明理由 。（ 3）把点燃但无火焰的卫生香放入试管，卫生香剧烈燃烧的原因是试管中产生了A 氢气B酒精C甲烷D氧气（ 4）如果肝脏放置过久，则现象有什么不同？原因是。8某同学做“叶绿体中色素的提取和分离”实验，在下列操作中均有失误。请在失误部分下画线并更正。(1)将 5 克绿色叶片剪碎放在研钵中，加入少许SiO2 和

15、 CaC03，再加 2mL石油醚，进行迅速充分的研磨。(2)在预备好的滤纸条上，距剪去两角的一端lcm 处用圆珠笔画一条横线。（3）用毛细吸管吸取少量滤液，沿横线处小心均匀地面出一条滤液细线，紧接着重复画2 至 3 次。(4) 将层析液倒人烧杯中，然后将滤纸条画有滤液细线的一端朝下，轻轻插入到层析液中。注意：一定要让层析液没及滤纸上的滤液细线。更正为：(1) _4名校名 推荐(2) _(3)_（ 4） _ 。 课后提升 1、生物组织中还原糖、脂肪和蛋白质三种有机物的鉴定实验中，以下操作错误的是（）A 可溶性还原糖的 鉴定，可用酒精灯直接加热产生砖红色沉淀B只有脂肪的鉴定需要使用显微镜C用双缩脲

16、试剂检测蛋白质不需要加热D使用斐林试剂和双缩脲试剂最好是现配现用2、叶绿体色素的纸层析结果显示：叶绿素b 位于层析滤纸的最下端，原因是（）A 分子量最小B分子量最大C在层析液中的 溶解度最小D在层析液中的溶解度最大3、将小麦种子分别置于 20和 30培养箱中培养 4 天，依次取等量的萌发种子分别制成提取液 I 和提取液。取 3 支试管甲、乙、丙，分别加入等量的淀粉液，然后按下图加入等量的提取液和蒸馏水， 45水浴保温 5 分钟，立即在 3 支试管中加人等量斐林试剂并煮沸2 分钟，摇匀观察试管中的颜色。结果是（）A 甲呈蓝色，乙呈砖红色，丙呈无色B甲呈无色，乙呈砖红色，丙呈蓝色C甲、乙皆呈蓝色，

17、丙呈砖红色D甲呈浅砖红 色，乙呈砖红色，丙呈蓝色4、为验证光是植物生长发育的必要条件，设计如下实验：选择生长状况一致的小麦幼苗200 株，随机均分为实验组和对照组，分别处理并预期结果。 下面是关于实验组或对照组的处理方法和预期结果的几种组合，其中正确的是（）实验组对照组黑暗中培养在光下培养生长育好生长不良A B CD 5、现有下列生物材料：苹果黄豆种子梨 花生种子蛋清马铃薯块茎。最适于用来鉴定还原性糖的有（）A 、B 、C、D 、6、用过滤的方法得到细胞中的氯化钠溶液后，还要用酒精处理，可以得到较纯化的 DNA 这是因为（）A DNA 易溶于酒精，而滤液中某些杂质不易溶于酒精B DNA 和滤液

18、中其他成分更易溶于酒精C DNA 不易溶于酒精，而滤液中某些杂质易溶于酒精D DNA 和滤液中其他成分都不溶于酒精7、下列选项中，前项是实验试剂，中项是实验试剂的作用，后项是实验结果。其中错误的是（）A 醋酸洋红溶液、染色体染色、观察染色体B秋水仙素、多倍体形成、产生植物新品种C无水乙醇、溶解叶绿体中色素、分离色素D二苯胺、鉴定 DNA 、观察 DNA 液8、酶的特性有高效性、专一性、多样性，其活性受温度和pH 的影响。以下是一个对酶的高效性的实验，步骤如下： 作为对照向2 号试管内滴入几滴氯化铁溶液。将点燃但无火火焰的卫生香分别放在1、 2 试管的管口，仔细观察，我们会发现1 号试管口的卫生

19、香燃烧猛烈。取两只洁净的试管，编上号（分别为1 和 2 号）。并且注入10ml（ 3%）的过氧化氢溶液。 轻轻振荡这两只试管，使试管内的物质混合均匀，我们会发现1 号试管的气泡5名校名 推荐多且最先产生。 取豌豆大小的新鲜肝脏，放在培养皿中迅速剪碎并投入到1 号试管中。 请根据实验原理，选择正确的实验顺序（）A B CD 9、某学生完成了下面的实验：他用碘液检验一块干面包，面包变成了深蓝色。然后他嚼碎了另一块干面包，并用本尼迪克溶液(一种用来检验麦芽糖的试剂)检验之，嚼碎的面包变成了红色 (麦芽糖与试剂反应的颜色)，因此，他作出结论，认为当面包被嚼碎时淀粉变成了麦芽糖。这位学生的实验设计的错误

20、 在于（）A 未对嚼碎的面包做淀粉检验B未对唾液做淀粉检验C未考虑面包的制作时间D未对干面包做麦芽糖的检验二、多项选择题10、下表是关于DNA 粗提取与鉴定实验中所使用的材料、操作及其作用的表述。正确的是（）试剂操作作用A柠檬酸钠溶液与鸡血混合防止血液凝固B蒸馏水与鸡血细胞混合保持细胞形状C蒸馏水加入到溶解有DNA 的 NaCl 中析出 DNA 丝状物D冷却的酒精加入到过滤后DNA 的 NaCl 中产生特定的颜色反应11、某同学在做叶绿体中的色素的提取与分离的实验时收集到的色素提取液为淡绿色。其原因可能（）A 选材不当B丙酮加入太少，色素未提取出来C丙酮加入太多，稀释了提取液D研磨不充 分，色

21、素未充分提取出来三、填充：12、回答实验 “叶绿体中色素的提取和分离”的下列问题。(1) 分别在 A 、B、C 三个研钵中加 2 克剪碎的新鲜菠菜绿叶，并按下表所示添加试剂，经研磨、过滤得到三种不同颜色的溶液，即：深绿色、黄绿色(或褐色 )、几乎无色。注： + 表示加； 表示不加。处理ABCSiO 2（少量）+CaCO3（少量）+95% 乙醇（ 10 毫升）+蒸馏水（10 毫升）+试回答：（ 1）A 处理得到的溶液颜色是，原因是。（ 2）B 处理得到的溶液颜色是，原因是。（ 3）C 处理得到的溶液颜色是，原因是。（ 4）提取和分离叶绿体中色素的正确顺序应该是（）A 进行纸层析 制取滤液 在滤纸

22、条上画线 将实验材料研磨B制取滤液 进行纸层析 在滤纸条上画线 制取滤液 再画线C将实验材料剪碎、研磨 在滤纸条上画线 制取滤液 进行纸层析D将实验材料剪碎、研磨 制取滤液 在液纸条上画线 进行纸层析（ 5）在叶绿体色素的分离实验中，要使色素带清晰又整齐，应采取的措施是。（写序号）6名校名 推荐定性滤纸要干燥剪去滤纸条一端两角滤液细线画细而直重复画线盖上培养皿盖（ 6）色素下行分离法也能将叶绿体中四种色素分离，具体做法如图所示，在圆形滤纸上倒入少量色素滤液， 随后不间断地倒入层析液， 在玻璃管的底部用抽气机不断地抽气。已知胡萝卜素遇Al 2O3 会呈红色，其余色素遇Al 2O3 不改变其原有的

23、颜色，问：最先进入Al 2O3的叶绿体中的色素呈（）A 橙黄色B红色C蓝绿色D黄绿色（ 7）把叶绿体色素滤液放在自然光源和三棱镜之间，从棱镜的另一侧观察连续光谱中的明显变暗的区域是（）A 黄光和蓝紫光区B 绿光和红光区C红光和蓝紫光区D 黄光和绿光区13、下面是以小麦为材料所进行的实验，请回答有关问题。（ 1）将发芽的种子研磨液置于试管中，加入班氏试剂，并，试管中出现红黄色，说明发芽的小麦种子中含有。（ 2）在盛有 10 mL3% 过氧化氢溶液的试管中，加入新鲜发芽的小麦种子研磨液时，试管中有大量气泡生成， 将点燃的卫生香插入试管， 火焰变得明亮， 这个实验证明发芽的小麦种子中含有（ 3）利用小麦叶片进行“叶绿体色素提取与分离”实验时，将盛有叶绿体色素提取液的试管经静置后置于透射光和反射光下，依次呈色和色。（ 4）小麦幼根吸水能力最强的部位