生物选修一实验知识点

1、1.参与果酒(如葡萄酒)生产的微生物以酵母菌属真核生物，代谢类型为双阳兼性厌氧，酒精发酵原理(反应式)略有。酵母菌有线粒体(有/无)牙齿，线粒体中不能完全分解葡萄糖氧化。酒精发酵通常在18-25温度控制，20左右是酵母菌的最佳繁殖温度。果酒制作初期，发酵装置通气的目的是酵母在有氧条件下大量繁殖，提高菌种密度。主要作用于葡萄酒自然发酵过程中的是附着在葡萄皮上的野生型酵母菌。葡萄酒红色的原因是酒精度数升高，红葡萄皮的色素进入发酵液。在缺氧、呈酸性的发酵液中，酵母菌可以生长繁殖，大部分其他微生物因不能适应牙齿环境而受到抑制，与酵母菌进行种间关系竞争。酵母菌的繁殖方式主要包括条件适当时的出芽生殖和条件

2、恶劣的孢子生殖。2.参与果醋(如葡萄醋)生产的微生物是醋酸菌，原核生物，代谢类型是双氧水型。氧，当党员充足时，葡萄汁中的糖可以分解成乙酸。氧气充足，党员不足时，可以将乙醇转化为乙醛，乙酸，典型的细胞增殖方式是二分裂。酵母菌和醋酸菌最大的区别是无核膜胞形成的细胞核。3.教材中P4果酒醋发酵装置图1-4B的膨胀球作用是在醋酸发酵时充氧。排气孔的作用是去除发酵时产生的CO2和残留气体。排气口的作用是提取发酵液进行检查，释放发酵液。其中排气口通过细长的橡胶管连接瓶身的目的是防止空气中的微生物污染。做果酒的时候要及时排出。因为发酵过程中气压太高，防止瓶子反弹。用装置1-4A制作果汁醋，排气时不能完全打开

3、瓶盖，松开瓶盖即可。对葡萄的处理不能先冲洗(茄子茎/冲洗)，去除茄子茎(茄子茎/冲洗)，反复冲洗，以免酵母的数量减少。制作果醋的时候要及时通风，原因是醋酸菌是好氧菌，果酒变成果醋的过程中需要氧气。发酵装置需要消毒处理，我们做果酒的时候不需要葡萄汁煮(需要/不需要)。果酒发酵到第10-12天，可以检查果酒，在酸性条件下，用中铬酸钾与发酵液反应，可见发酵液呈灰色绿色，颜色深，酒精度数高。如果需要进一步检查发酵液中酵母菌的数量，可以使用稀释度板、显微镜直接计数法。到了果酒生产后期，酵母的数量会发现减少，主要是因为营养素枯竭，酒精浓度提高，对细胞的毒害作用PH减少。果酒制作完成后，可以转换为果醋制作，

4、但要改变的实验条件是适当加热，通过氧气。4.为微生物的生长和繁殖提供营养的气质称为培养基。在物理性质分割中，主要可分为固体培养基和液体培养基，其中液体培养基主要用于工业生产和扩大培养，扩大培养的目的是提高菌种密度。要把培养基变成固体，通常要添加叫做琼脂的混凝剂。固体培养基可用于菌种的分离、鉴定、计数、菌种保存等。功能上可以分为选择培养基和鉴别培养基，其中选择培养基是抑制某种化学物质，不需要的微生物的生长，促进需要的微生物的生长。例如，以纤维素为唯一碳源的培养基，筛选纤维素降解菌。用无氮培养基筛选了固氮作用微生物。在培养基中加入高浓度NaCl，筛选金黄色葡萄球菌。在培养基中添加青霉素等抗生素，抑

5、制细菌、放线菌，筛选酵母菌、真菌。以尿素为唯一氮源的培养基筛选尿素降解菌。鉴别培养基根据微生物的代谢特征，在培养基中加入某种指示剂，鉴别相应的微生物。例如，在培养基中添加李红-美蓝，可以鉴别大肠杆菌，使菌变成黑色。培养基选择都是固体培养基。5.任何培养基一般都含有水、碳源、氮源、无机盐等营养素，必须满足微生物生长对pH、特殊营养物质(如细菌生长所需的化合物、维生素、部分氨基酸、嘌呤、嘧啶等)。培养乳酸菌时，需要在培养基中添加维生素。培养霉菌需要用酸性控制PH。培养细菌时，要把PH调整为中性或微碱性。培养厌氧微生物时，要提供无氧条件。牛肉奶油蛋白培养基中的牛肉奶油可以为微生物提供碳源、氮源、磷酸

6、根、维生素，主要提供碳源。蛋白质可以向微生物提供碳源、氮源、维生素，主要提供氮源。6.获得纯培养物的关键是防止外来杂菌入侵。主要包括消毒和灭菌。实验操作空间，操作者的衣服，双手要清洁消毒。Petri盘子、徽章、接种设备必须灭菌。实验工作应在酒精灯火焰旁进行。操作员的双手通常用体积分数为70%的酒精消毒。接种环，涂布机必须用火焰灭菌。培养基一般用高压蒸汽灭菌法灭菌。Petri盘子、滴管等玻璃器材一般用干热灭菌。接种室、超净工作台、接种箱使用前可以用紫外线照射30min进行消毒处理。无论是消毒还是灭菌，主要原理是由于异化因素的作用，引起微生物蛋白变性或核酸破坏损伤，杀死微生物。7、固体培养基的制备

7、一般包括计算、计量、溶解、PH调节、灭菌、逆板。灭菌后培养基冷却到50左右时，可以进行逆板工作。在逆板过程中，拔下棉塞后，要让锥虫病入口通过火焰，原因是防止瓶口微生物污染培养基。板凝结后需要反转的原因是防止盘子盖子上的水滴落到培养基上。培养基中的水分能防止挥发得太快。8.微生物接种最常用的方法是稀释度板法、平线法。其中稀释图版法不仅可以用于微生物的分离、纯化，还可以用于菌落的数量。平板线法通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线，逐渐稀释聚集的菌种，将其分布在培养基表面，多次划线和培养，可以分离出一个细胞繁殖的肉眼可见的菌落。划线工作中，在划第一行之前燃烧接种环的目的是防止接种环中可能存在的微生

8、物污染培养物。第二、三次.底线前骑的接种环的目的是杀死接种环上残留的菌种。下一个下划线的菌种来源于上一个下划线的末端，可以得到单个菌群。划线结束后还要燃烧接种环的原因是杀死接种环上残留的菌种，不污染环境或感染者。燃烧的接种环必须冷却，才能进行划线工作。这是因为接种环的温度太高，不会杀死菌种。第二条和后续下划线操作必须从最后一条下划线的末尾开始。原因是末端菌体数量少，可以得到单个菌落。大卫亚设，Northern Exposure(美国电视电视剧，女)打开试管棉塞，插上棉塞之前，必须先把试管入口通过火焰烧掉。(。稀释度规则是将菌液进行一系列梯度稀释，然后将徐璐其他稀释度的菌液分别涂在琼脂固体培养基

9、表面。稀释度足够高的菌液中聚集在一起的微生物分散成单个细胞，在培养基表面形成单个菌落。牙齿方法主要包括一系列稀释工作和涂层板工作两个阶段。稀释时，要灭菌并编号每个装有9毫升水的试管。将菌液添加到移动液管中相应稀释倍数的试管中时，要将手指硬压力移动液管的橡胶头吹3次，充分搅拌。移行管要事先灭菌处理。陶片操作，使用的陶片是陶片。事先放入含有酒精的烧杯，然后在涂布前点燃火焰，冷却后才能涂布。(David aser，Northern Exposure美国电视电视剧，Exposure)用涂布机从试管里取菌液，而不是用橡胶滴管取的菌液一般不超过0.1毫升。整个接种工作应在酒精灯火焰旁进行。9.用平板接种后

10、，培养基一条线上的细菌分布成槽形，原因是划线时力太大，把培养基撕开。如果第二个虚线区域的第一条线上没有真菌生长，可能是因为最后一条下划线末端没有开始，接种环没有冷却。最有可能的原因是用稀释图版法接种的培养基右下方没有菌落生长，其他地方菌落长得很多，涂层不均匀。不(是/否)，每次划线的菌种都来自最后一个善意的末端。如果平板电脑有5个下划线区域，接种环必须乘坐6次。10.接种后，应把未接种培养基和接种培养基都放在37孵化器中同时培养。这是判断培养基灭菌是彻底的还是受污染的。微生物培养时有时需要振动培养，其主要目的是增加培养液中的溶解氧，充分利用营养素。接种后培养基在12h和24h时菌落的颜色、位置

11、、形状几乎没有变化，大小(有/无)明显的差别。11.对于经常使用的菌种，可以使用临时保存方法，首先在试管的固体倾斜培养基上接种菌种，在适当的温度下培养，然后将试管保存在4的冰箱里，直到菌落长大。但是牙齿方法的缺点是保存时间不长，容易发生变异或污染。对于需要保存器官的菌种，可以使用-20的冷冻箱中保存甘油管的方法。12.尿素不能作为农业氮肥直接被农作物吸收，必须被土壤中的细菌分解为NH3才能被植物吸收，尿素还有些被细菌分解的反应式。寻找目的菌时的思维方式是根据生存环境的要求寻找相应的环境。以尿素为唯一氮源的培养基起选择作用的原因是原则上只有能够利用尿素的微生物才能在上面生长。为了判断牙齿培养基是

12、否起选择作用，可以对接种的牛肉奶油蛋白培养基进行对比，同时培养。如果在对比培养基中生长的菌落数比牙齿选择培养基多得多(超过/低于)，则表明牙齿培养基有选择作用。培养基中生长的细菌不一定是我们的目的菌。以尿素为唯一氮源的选择培养基中加入酚红指示剂，培养出某种细菌，然后PH升高，指示剂变红，初步确认其中的细菌能分解尿素。鉴定尿素降解菌时，以尿素为唯一氮源的酚红鉴定培养基只能确认以前在选择培养基中生长的菌落。13.测量微生物数量的一般方法是稀释度板法(或活菌计数法)和显微镜直接计数法。牙齿中稀释涂片法可以统计菌落的数量，因此统计结果一般不使用生菌数。统计中一般选择菌群数为30 300的平板电脑进行计

13、数，其目的是确认结果是否正确。选择30 - 300的原因主要是：稀释低，不容易计算，实验误差稀释低，两个以上菌体可以连接在一起形成一个菌落。实验误差稀释低，培养基中微生物的种内斗争、种间竞争激烈，部分个体无法形成菌落。用牙齿方法统计的真菌数量往往低于活细菌的实际数量。因为当两个以上的细胞连接在一起时，平板电脑上观察到的只是一个菌群。用牙齿方法计算菌落数时，每个稀释度至少要涂3个板，几个板上的菌落数全部在30-300，数据差异不大，数个数据平均值也要计算为下面的菌落值。计算公式为每个土壤(ml)采样的菌株数=(C/V)M。其中C表示特定稀释度下的平均殖民地数，V表示用于涂层的稀释体积，M表示稀释

14、倍数。显微镜直接计算公式可以解释为：1ml原液的菌数=每隔一格平均菌群数25(或16)稀释倍数10000=每隔一格平均菌体数400稀释倍数10000。牙齿方法得到的数据比实际活细菌的数量多。14.据说，在土壤取样时不能直接选择表土，取样时使用的小铲子和填方型信封在使用前必须灭菌，采集和稀释土壤样品都要在酒精等火焰旁完成。测量土壤中细菌的数量时，通常使用104、105、106倍的稀释液进行涂布和培养，温度一般控制在30-37，培养时间通常为1-2天。测定土壤中放线菌的数量时，通常使用103、104、105倍稀释液进行涂布和培养，温度一般控制在25-28，培养时间通常为5-7天。测定土壤中真菌的数

15、量时，通常使用102、103、104倍的稀释液进行涂布和培养，温度一般控制在25-28，培养时间通常为3-4天。为了初步判断培养基中的两种细菌是否属于同一种，主要可以根据群落的特征(包括形状、大小、颜色、隆起程度)进行判断。15.在植物(或动物等)的个体发育过程中，细胞在形态、结构、生理功能上存在稳定性差异，因此形成这种差异的过程称为细胞分化。细胞分化的根本原因是遗传信息因细胞而异，执行情况牙齿不同。一般来说，分裂力强的细胞分化度低(高/低)，反之亦然。高度分化的细胞一般没有分裂能力。已经分化的细胞仍有发展成为完整个体的潜力，这被称为细胞的全能性。就是看是否反映了全能性，从根本上看细胞是否发展

16、成像马铃薯块茎无性繁殖一样的完整个体，不反映细胞的全能性。细胞之所以具有全能性，是因为细胞包含牙齿物种的全部遗传信息，植物细胞表现出全能性的必要条件之一是离子。万能的表现有难度差异。例如植物细胞比动物细胞容易。体细胞比生殖细胞，受精卵生殖细胞更难。幼细胞比老化细胞容易(困难或容易)。分化度低的细胞比分化度高的细胞更容易。分裂能力强的细胞比分裂能力弱的细胞容易。16.植物组织培养技术的理论基础是植物细胞的多功能性。离子植物组织，细胞被称为外植体，从它到愈合组织的过程被称为去分化或去分化。被愈合组织继续培养，再分化为根或芽的过程称为再分化。愈伤组织细胞的特征是排列松散的不规则性、高液饱和、不定形状态的薄壁细胞，根尖分生区的细胞特征是排列紧密的正方形。组织培养技术的应用可以实现部分植物的快速繁殖，通过培养没