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文档简介
血糖与血脂检测的
分析前质量控制1血糖与血脂检测的分析前质量控制课件5/9/2024主要内容血糖、胰岛素、糖化血红蛋白、血脂四项的常用检测方法和基本原理影响结果准确性的分析前因素样品采集、运输、处理、保存和检测过程中的注意事项2血糖与血脂检测的分析前质量控制课件5/9/2024一、常用测定方法与基本原理1.血糖测定方法葡萄糖氧化酶法已糖激酶葡萄糖脱氢酶法3血糖与血脂检测的分析前质量控制课件5/9/2024已糖激酶(HK)法检测原理D-葡萄糖+ATPD-6-磷酸葡萄糖+ADPD-6-磷酸葡萄糖+NADP+
6-磷酸葡萄糖酸+NADPH+H+4血糖与血脂检测的分析前质量控制课件5/9/2024葡萄糖氧化酶(POD)法检测原理-D-葡萄糖-D-葡萄糖-D-葡萄糖+H2O+O2
葡萄糖酸+H2O2还原性色原+H2O2
氧化性色原+2H2O5血糖与血脂检测的分析前质量控制课件5/9/2024葡萄糖脱氢酶(GlucDH)法检测原理-D-葡萄糖-D-葡萄糖-D-葡萄糖+NAD+
D-葡萄糖酸--内酯+H+6血糖与血脂检测的分析前质量控制课件5/9/20242.胆固醇氧化酶法测定胆固醇酯+H2O
游离胆固醇+游离脂肪酸游离胆固醇+O2
4胆甾烯酮+H2O2H2O2+4-AAP+4-氯酚醌亚胺+2H2O7血糖与血脂检测的分析前质量控制课件5/9/20243.甘油三酯测定方法LPL:脂蛋白脂酶GK:甘油激酶GPO:磷酸甘油氧化酶POD:过氧化物酶8血糖与血脂检测的分析前质量控制课件5/9/20244.HDL-C测定原理9血糖与血脂检测的分析前质量控制课件5/9/20245.LDL-C测定原理10血糖与血脂检测的分析前质量控制课件5/9/2024
6.胰岛素测定(电化学发光法)11血糖与血脂检测的分析前质量控制课件5/9/202412血糖与血脂检测的分析前质量控制课件5/9/202413血糖与血脂检测的分析前质量控制课件5/9/20247.糖化血红蛋白(HbA1c)HbA95~97%血红蛋白AHbA090%非糖化血红蛋白部分HbA15%~7%糖化血红蛋白A0(
2
2)-HbA1a果糖1-,6-二磷酸的糖化葡萄糖-6-磷酸的糖化糖化HbA1
链-HbA1bHbA1带有未知反应部分-HbA1c75~80%的HbA1,在
链-N末端缬氨酸D-葡萄糖糖化HbA2<3%血红蛋白A(
2
2)HbF<1%血红蛋白A(
2
2)HbSHbC14血糖与血脂检测的分析前质量控制课件5/9/2024糖化血红蛋白(HbA1c)的检测方法阳离子交换色谱法亲和层析色谱法免疫分析电泳(等电聚焦)硫代巴比妥酸比色测定15血糖与血脂检测的分析前质量控制课件5/9/2024阳离子交换色谱法的影响因素醛亚胺被部分测定,乙醛副产品干扰HbF、HbH、HbBart’s使结果偏高Hb变异体干扰,HbS、HbC使结果偏低对温度和pH敏感肝素抗凝使测定结果偏高参考区间不适用于溶血性贫血患者结果判断16血糖与血脂检测的分析前质量控制课件5/9/2024HbA1c的质量控制对患者准备和采样无特殊要求体外高糖血症时,糖化将继续进行,早测定长时间储存样本(3~4d)后,RBC产生血红蛋白相关的谷胱甘肽加合物(HbA1d/HbA3
)产生干扰溶血产物不如全血稳定17血糖与血脂检测的分析前质量控制课件5/9/2024患者的准备:视样本类型和分析项目而定样本采集的技术要求样本运送样本的储存和长时间的储藏分析前样本的准备已知和需考虑的生物因素和干扰因素二、影响结果准确性的分析前因素
18血糖与血脂检测的分析前质量控制课件5/9/2024分析前影响因素生物因素可变生物因素:营养、禁食、饮酒、体重、肌肉重量、体力活动、姿势、气候、身高、作息规律、治疗药物固定生物因素:性别、年龄、种族、遗传干扰因素内在干扰因素:溶血、脂血、胆红素血、内源性抗凝剂、药物代谢物、输注液外在干扰因素:抗凝剂、残留洗液、细菌、真菌19血糖与血脂检测的分析前质量控制课件5/9/2024食物影响测定过程吸收到血液中的成分可产生浑浊,
颜色而干扰测定有些成分可能参与测定的化学反应产生干扰20血糖与血脂检测的分析前质量控制课件5/9/2024试验对食物的特殊要求
葡萄糖耐量试验
前三天要给患者足够的碳水化合物
肌酐清除率试验
前不能进食富含肌酐的食物(如肌肉)血脂测定至少2周内保持一般饮食习惯和体重稳定21血糖与血脂检测的分析前质量控制课件5/9/2024CK↑AST↑LDH↑尿酸↑(男性,可能因排泄减少)内分泌素↓(卵泡刺激素、黄体生成素、泌乳素、性激素)
(停止运动后数日可恢复正常)
运动的影响长期运动可导致:22血糖与血脂检测的分析前质量控制课件5/9/2024短时剧烈运动后血液试验结果的改变试验90km滑雪后40km跑步后Cr+40%+45%BUN+46%+31%Hb−33%-Ca2+−5.7%-Mg−10%-HCO3—−12%−17%K
-+23%P-+65%乳酸+113%-23血糖与血脂检测的分析前质量控制课件5/9/2024生理节奏昼夜周期变化举例:
清晨:皮质醇↑、ACTH↑、血清铁↑、胆红素↑
入睡时:生长激素高峰,皮质醇最低
午夜:蛋白质最低垂体激素:多在入睡1~2小时开始升高,在睡眠的中段达高峰24血糖与血脂检测的分析前质量控制课件5/9/2024月周期变化
性激素:女性按月经周期而变化胆固醇:月经前高,排卵时最低
纤维蛋白原:月经前增高长周期影响
维生素D夏天高,冬天低副甲状腺激素、钙有轻度的相同变化
25血糖与血脂检测的分析前质量控制课件5/9/2024
立位:
水和电解质从血管逸出,站立5min可使血
脂升高5%,15min可升高16%
坐位:
从立位到坐位,水的再平衡分布需要
15分钟
卧位:
从坐位到卧位,水和电解质回到血管,血浆蛋白及和蛋白结合的物质可降低
10%~15%
体位的影响26血糖与血脂检测的分析前质量控制课件5/9/2024
从立位到卧位时血液成分的变化
试验项目下降(%)
Hb4(0~17)Hct6(4~9)K1(0~3)Ca4(2~7)ALT7(4~14)AST9(6~11)ALP9(5~11)IgG7IgA7IgM5
甲状腺素11
27血糖与血脂检测的分析前质量控制课件5/9/2024大静脉的血流被止血带压迫阻塞时,引起静脉滤过压升高液体和低分子量的物质通过毛细血管逸出,使血液相对浓缩应用止血带的影响液体的丢失28血糖与血脂检测的分析前质量控制课件5/9/2024
静脉压持续升高,流到组织的新鲜血液减少,但细胞代谢继续进行,使静脉内的代谢产物增加,如乳酸堆积会使钾从细胞中漏出,血钾升高。采血时令患者握拳、松拳的动作也会增加代谢速率。用止血带时紧握拳1分钟可使血钾升高1
1.5mmol/L。细胞内含物的漏出29血糖与血脂检测的分析前质量控制课件5/9/2024静脉闭锁1
3分钟内血清成分改变举例:
试验
升高(%)
总蛋白铁总脂质
胆固醇
AST
胆红素
4.96.74.7
5.19.38.430血糖与血脂检测的分析前质量控制课件5/9/2024
药物
的影响药物对血、尿等成分及试验结果的影响是一个极其复杂的问题影响途径:
药理作用对生理病理过程的影响药物的毒副作用对测定方法的影响
31血糖与血脂检测的分析前质量控制课件5/9/2024主要作用于内分泌系统,儿茶酚胺明显增加
并导致葡萄糖、胰岛素的增加
胃泌素增加可高于基线五倍皮质醇、5-羟色胺增加
几种药物影响举例咖啡因32血糖与血脂检测的分析前质量控制课件5/9/2024
儿茶酚胺↑
胃泌素↑
皮质醇↑
生长激素↑(可达正常的10倍)免疫球蛋白↓
维生素B12↓
碳氧血红蛋白↑WBC↑Hct↑尼古丁33血糖与血脂检测的分析前质量控制课件5/9/2024
决定于每次的饮酒量和饮酒时间的长短
葡萄糖↓
甘油三酯↑
(采血前24h内勿饮)
γ-GT↑
HDL-C↑(与饮酒量相关)
ALT、AST↑
乙醇34血糖与血脂检测的分析前质量控制课件5/9/2024
雌激素引起:
HDL-C↑
甲状腺结合蛋白↑
铜蓝蛋白↑
某些凝血因子↑
黄体酮引起:
HDL-C↓LDL-C↑
口服避孕药35血糖与血脂检测的分析前质量控制课件5/9/2024作好对患者的解释工作,消除患者的顾虑指导患者如何进行合作避免饮食、药物、运动、情绪等影响分析前影响因素控制要点36血糖与血脂检测的分析前质量控制课件5/9/20241.护士培训与操作标准化、规范化责任心:检验申请、采血管、病人的查对技术操作:抽血部位、抽血用具、抽血技术、抽血过程、抽血量
获得“真实”样本三、样品采集、运输、处理、保存和检测
过程中的注意事项37血糖与血脂检测的分析前质量控制课件5/9/20242.血液样品采集每日同一时间采血(理想时间7:00-8:00)空腹12h不在服药期间:早晨服药前仰卧位或从位同一手臂静脉区38血糖与血脂检测的分析前质量控制课件5/9/2024采血操作寻找合适的静脉(肘窝以上10cm为加压处)无压力下消毒(70%异丙醇,70%~80%酒精)静脉加压(30-50mmHg)用另一只手拉紧穿刺区域皮肤采血针针头朝下30º刺入静脉真空管顺畅采血至4ml解除压力取出针头,压迫止血(勿让患者弯曲胳膊)39血糖与血脂检测的分析前质量控制课件5/9/2024采血技术引起的分析前变异体位:直立位比仰卧10min后蛋白质、细胞、胆固醇、Ig、Ca等结果高3%~8%静脉加压持续时间:大分子量物质增高,10min可使TP升高20%,应<2min进食:葡萄糖、磷酸盐、胆红素增加,CHO中到轻度增高OGTT试验前几天应连续摄入高碳水化合物食物40血糖与血脂检测的分析前质量控制课件5/9/2024采血不规范操作反复拍打、反复穿刺:凝血已启动凝血指标受影响;血小板聚集影响血常规分析血量过多或过少:抗凝剂与血液比例不合适影响凝血指标、血常规分析等血标本凝固:
影响凝血指标、血常规分析等溶血:针头过细、负压过大影响生化、凝血、血常规分析等多数项目静脉输注液体的污染:前臂静脉连接紧密,采血静脉易被旁侧输液静脉液体污染,因此,不能在输液同侧手臂静脉取血41血糖与血脂检测的分析前质量控制课件5/9/20243.抗凝剂氟化钠(2mg/ml血)抑制血液凝固抵制糖酵解抗凝剂污染:如血液污染EDTA-K,会使血K升高,Ca和Mg降低,并使CK、ALP活性降低。42血糖与血脂检测的分析前质量控制课件5/9/20244.样本运输样品储存可引起:细胞代谢蒸发作用升华作用化学反应酶活性失活微生物降解渗透作用光学作用气体扩散43血糖与血脂检测的分析前质量控制课件5/9/2024样本运输要求时间:不宜过长运送容器:密封,具一定避震性最好使用冷藏箱:1~4℃管架:一次性或可重复消毒试管:紧密橡皮塞,垂直放置标签:清晰易读、信息齐全、不易脱落44血糖与血脂检测的分析前质量控制课件5/9/2024及时运送标本:
APTT和PT室温2小时 尿常规室温2小时
血生化室温2小时血糖浓度室温小于1小时心肌损伤标志物小于20分钟运送真实标本:切忌丢失或洒漏标本后人为复制标本45血糖与血脂检测的分析前质量控制课件5/9/20245.样本准备血清:血液凝固和血块收缩约需30min;置冰箱或低温环境更长促凝剂、分离胶的应用:聚苯乙烯试管溶血离心:RCF=1.12×10-5×N²×R(全血2000g15min),离心力与离心时间成反比。不超外界温度15℃,应低于37℃。应在2h内完成血清分离46血糖与血脂检测的分
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