果蝇唾腺染色体标本的制作和观察_第1页
果蝇唾腺染色体标本的制作和观察_第2页
果蝇唾腺染色体标本的制作和观察_第3页
果蝇唾腺染色体标本的制作和观察_第4页
果蝇唾腺染色体标本的制作和观察_第5页
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文档简介

果蝇唾腺染色体标本的制作和观察果蝇唾腺染色体标本的制作和观察第1页一、试验目标学习剖离果蝇幼虫唾腺和压制唾腺染色体标本方法;观察唾腺细胞巨染色体。果蝇唾腺染色体标本的制作和观察第2页二、试验材料果蝇三龄幼虫果蝇唾腺染色体标本的制作和观察第3页三、试验原理果蝇唾腺染色体是一个经典多线染色体。它是果蝇唾腺细胞核内有丝分裂所致,即核内染色体中染色线连续复制而染色体并不分裂,结果使每条染色体中染色线多达500~1000条,其长度和体积分别比其它细胞染色体长100~200倍、大1000~倍,所以也称巨型染色体。因为每条染色体染色线在不一样区段螺旋化程度不一,因而出现一系列宽窄不一样、染色深浅不一或明暗相间横纹。不一样染色体横纹数量、形状和排列次序是恒定。利用这些特征不但能够判定不一样染色体,还能够结合遗传试验结果进行基因定位。另外,因为其体细胞同源染色体配对,故易于进行染色体缺失、重复、倒位和易位细胞学观察和研究。果蝇唾腺染色体标本的制作和观察第4页四、试验用具药品

1.仪器用具:显微镜、双目解剖镜、培养瓶、载玻片、盖玻片、镊子、解剖针、吸水纸、酒精灯、火柴等。2.药品试剂:无水酒精、冰醋酸、1%醋酸洋红、改良品红、生理盐水(0.7%NaCl)、1N盐酸、蒸馏水。3.培养基:玉米琼脂培养基。果蝇唾腺染色体标本的制作和观察第5页五、试验步骤

果蝇唾腺染色体标本的制作和观察第6页幼虫培养:

置于16—18℃下喂养,当幼虫爬上瓶壁准备化蛹前,即为三龄幼虫,此时虫体肥大,便于解剖,是制备唾腺染色体最理想时期。果蝇唾腺染色体标本的制作和观察第7页2.腺体剖取

果蝇唾腺染色体标本的制作和观察第8页3.解离

把载玻片上幼虫其它个别除去,用吸水纸小心吸去生理盐水(注意吸水纸应离唾腺远些,以免吸附唾腺),加1滴1NHCl,浸2—3分钟,使组织疏松,方便压片时细胞分散,染色体散开。

果蝇唾腺染色体标本的制作和观察第9页4.染色

用吸水纸吸去盐酸,加1滴蒸馏水轻轻冲洗后吸干,加2滴醋酸洋红或改良品红染液,染色5—20分钟(此过程应保持腺体一直处于染液浸泡中)。果蝇唾腺染色体标本的制作和观察第10页5.压片

换上新鲜染液或45%醋酸,盖上盖玻片压片,然后用吸水纸包被玻片,吸干多出染色液,并用手指轻压盖玻片,再用铅笔橡皮头或解剖针柄垂直轻敲,或深入用拇指在盖玻片上适当用力压片

果蝇唾腺染色体标本的制作和观察第11页6.观察

将制片置低倍镜下找到分散好标本,移至视野中心,然后转到高倍镜下观察。对染色体分散、个体性清楚片子,应仔细观察染色体横纹数量、形状和排列次序,方便对照模式照片识别出不一样染色体臂。

果蝇唾腺染色体标本的制作和观察第12页果蝇唾腺染色体标本的制作和观察第13页果蝇唾腺染色体标本的制作和观察第14页六、作业及思索题

1.绘制你在显微镜下所看到果蝇唾腺巨染色体图,标明实际标本在观察中所能分辨经典部位。2.每人制1张染色体分散、横纹清楚暂时片。3.什么是染色中心(chromocenter)?4.依据你所学知识

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