高中生物-2.1《微生物的实验室培养》课件-新人教版选修1

1、课题1：微生物的实验室培养1精选ppt1.了解有关培养基的基础知识；2.掌握无菌操作技术；3.了解纯化大肠杆菌的基础知识。霉 菌细 菌酵母菌放线菌 上图都是一些常见的微生物，微生物是结构简单、形体微小的单细胞、多细胞或没有细胞结构的低等生物，与人类关系密切。人工的培养和分离，使得我们更进一步认识微生物。 今天我们就来学习如何培养和分离大肠杆菌！1.特点：结构都相当简单,个体多数十分微小，通常要用光学显微镜或电子显微镜才能看到，有的甚至没有细胞结构，且体内一般不含有叶绿素，不能进行光合作用。2.微生物包括五类病 毒细 菌放线菌真 菌原生动物 培养基（培养液）是由人工方法配制而成的，专供微生物生长

2、繁殖使用的混合营养液。固体培养基 液体培养基 半固体培养基1.培养基的类型成分区别：琼脂2.不同的微生物往往需要采用不同的培养基配方细菌喜荤，霉菌喜素大肠杆菌配方 酵母提取物：0.25g 蛋白胨：0.5g Nacl：0.5g 琼脂：1g 水：50ml3.培养基内所含的基本物质一般营养物质水、碳源、氮源、无机盐其他物质pH、特殊营养物质,例如:生长因子(即细菌生长必需，而自身不能合成的化合物)以及氧气、二氧化碳、渗透压等的要求。 4.培养基的用途液体培养基：增菌、工业生产固体培养基：纯化（分离），鉴定、活菌计数、保藏菌种半固体培养基：动力检测1.无菌操作泛指在培养微生物的操作中，所有防止杂菌污染

3、的方法。 无菌操作是培养微生物成功的关键！（1）消毒定义：2.消毒与灭菌的概念及两者的区别 （2）灭菌的定义：是指杀灭病原微生物的方法。 是指杀灭或清除环境中一切微生物（包括芽胞、孢子）的方法a.灼烧灭菌3.常用灭菌的方法b.干热灭菌：160-170 下加热1-2h。c.高压蒸气灭菌：100kPa、121 下维持15-30min.取2个250ml的三角瓶中分别装入50mlLB液体培养基和50mlLB固体培养基（刚配好，尚未凝固），加上封口膜，牛皮纸包装后高压锅灭菌15min。LB液体培养基细菌的扩大培养LB固体培养基细菌的划线分离灭菌后的培养基在无菌操作台上倒入4个培养皿中，倒后立即置于水平位

4、置上，轻轻晃动，使培养基铺满平皿底部，待凝，使之形成平面。 1.培养基灭菌后，需要冷却到50 左右时，才能用来倒平板。你用什么办法来估计培养基的温度？ 答：可以用手触摸盛有培养基的锥形瓶，感觉锥形瓶的温度下降到刚刚不烫手时，就可以进行倒平板了。 2.在倒平板的过程中，如果不小心将培养基溅在皿盖与皿底之间的部位，这个平板还能用来培养微生物吗？为什么？ 答：空气中的微生物可能在皿盖与皿底之间的培养基上滋生，因此最好不要用这个平板培养微生物。将斜面上培养的大肠杆菌菌种接种到灭菌后的液体培养基中，使其在37摇床培养12小时。 注意事项:1.火焰旁从斜面上用接种环取菌；2.取菌前接种环要用酒精灯灼烧灭菌

5、，冷却后方能取菌；3.取菌后封口膜和棉塞复原。1.平板划线法： 1）灼烧接种环； 2）接种环冷却后，蘸取带菌培养物； 3）在近火焰处，让带菌接种环在固体培养基上划线。 注意事项:1.接种环只蘸一次菌液，但要在培养基不同位置连续划线多次。2.划线首尾不能相接。3.划线后，培养皿倒置培养1224h。1 1.线条不重叠 2 2-3.从上次的末端开始，交叉23条线3 4 4.最后的划线不能与第一区相连。分离后，一个菌体便会形成一个菌落，这是消除污染杂菌的通用方法，也是用于筛选菌株的最简便方法之一。2.稀释涂布平板法稀释操作 注意：移液管需要经过灭菌。操作时，试管口和移液管离火焰12cm处.1.临时保藏

6、：接种到固体斜面培养基，菌落长成后置于4冰箱保存。2.长期保存：甘油冷冻管藏法（一）培养基的制作是否合格 如果未接种的培养基在恒温箱中保温12 d后无菌落生长，说明培养基的制备是成功的，否则需要重新制备。实验操作成果评价3（二）接种操作是否符合无菌要求 如果培养基上生长的菌落的颜色、形状、大小基本一致，并符合大肠杆菌菌落的特点，则说明接种操作是符合要求的；如果培养基上出现了其他菌落，则说明接种过程中，无菌操作还未达到要求，需要分析原因，再次练习。（三）是否进行了及时细致的观察与记录 培养12 h与24 h后的大肠杆菌菌落的大小会有明显不同，及时观察记录的同学会发现这一点，并能观察到其他一些细微

7、的变化。这一步的要求主要是培养学生良好的科学态度与习惯。1关微生物营养物质的叙述中，正确的是（ ）A.是碳源的物质不可能同时是氮源 B.凡碳源都提供能量C.除水以外的无机物只提供无机盐 D.无机氮源也能提供能量D解析：A、B选项的表达是不完整的。有的碳源只能是碳源；有的碳源可同时是氮源；有的碳源同时是能源；有的碳源同时是氮源，也是能源。对于C选项，除水以外的无机物种类繁多，功能也多样。对于D选项，无机氮源提供能量的情况还是存在的，如NH3可为硝化细菌提供能量和氮源。2下面对发酵工程中灭菌的理解不正确的是（ ）A.防止杂菌污染 B.接种前菌种要进行灭菌C.培养基和发酵设备都必须灭菌 D.灭菌必须在接种前B退出解析：发酵所用的菌种大多是单一的纯种，整个发酵过程不能混入其他微生物（杂菌），A正确；B错误，因为灭菌的目的是防止杂菌污染，但实际操作中不可能只消灭杂菌，而是消灭全部微