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文档简介
1、速率法和苦味酸法测定血清肌酐比较速率法原理肌酐在肌酸脒基水解酶作用下生成肌氨酸，肌氨酸在肌氨酸氧化酶作用下生成过氧化氢，后者在过氧化氢酶作用下与4-氨基安替比林、ESPAS反应生成呈色产物紫红色醌亚胺，在546nm处引起吸光度增高，通过监测546nm处吸光度值的上升来测定肌酐的浓度过程过程结果计算：肌酐浓度(umol/L)= （A测定 / A标准） C标准 (其中A为吸光度的变化,C标准为标准品浓度。)注意事项必须严格的控制反应的时间，以尽量避免快速或慢速反应假肌酐物质的干扰溶血产生的红细胞内非特异性物质将干扰反应胆红素可引起负偏差。某些全自动生化分析仪，能设置空白速率参数，能去除胆红素负干扰
2、。评价特异性 本法基本上可消除生理浓度的葡萄糖、维生素C和蛋白质等的干扰。回收试验96.7% 100.4%，平均98.5%。线性范围 肌酐在1760mol/L范围内线性良好。去蛋白苦味酸法测定血清肌酐去蛋白苦味酸法原理血浆或血清标本经除蛋白处理后，肌酐与碱性苦味酸产生Jaffe反应，生成橙红色的苦味酸肌酐复合物，在510nm和520nm间测定吸光度，与肌酐含量呈正比。尿液标本可稀释后直接测定。试剂步骤结果计算注意事项碱性肌酐苦味酸复合物的最大吸光度在485nm，过量苦味酸离子存在于反应液中，在波长低于500nm时会产生明显的吸收。反应温度以1525为宜，10以下，会抑制Jaffe反应。温度升高，可使碱性苦味酸溶液显色增深，但测定管较标准管更为明显。呈色后标准管色泽稳定，但测定管吸光度随时间延长而增加，可能与血标本中存在的非特异性物质有关，故在加入显色剂后30分钟内比色为宜。苦味酸一定要纯，否则要纯化。若含有杂质，则使试剂空白吸光度增加而影响测定结果。评价特异性血浆中的蛋白质和糖、丙酮、维生素、丙酮酸、乙酰乙酸等均能与碱性苦味酸发生非特异性反应，反应速度稍慢。红细胞中这类物质最多，约有60，血浆或血清约20，尿约5，故血清和血浆需制备无蛋白滤液后测定。回收率受无蛋白滤液PH影响，滤液PH在34.5时，回收率为85
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