抗磷脂酶A受体PLAR抗体

1、主要内容主要内容 1 1、原发性膜性肾病的疾病概况 2 2、抗PLA2RPLA2R抗体的临床意义与应用价值 3 3、抗PLA2RPLA2R抗体的指标检测性能 主要内容主要内容 1 1、原发性膜性肾病的疾病概况 2 2、抗PLA2RPLA2R抗体的临床意义与应用价值 3 3、抗PLA2RPLA2R抗体的指标检测性能 膜性肾病，又称膜性肾小球肾炎。 一种针对正常肾小球上皮细胞膜上的抗原成分产生的自体 抗体介导的肾小球损害，免疫复合物由上皮细胞膜上脱落 到基底膜的上皮细胞形成典型的免疫复合物沉着。沉着的 免疫复合物激活补体，补体膜攻击复合物引起蛋白尿。 病变过程中激活的细胞因子导致基底膜细胞外基质成

2、分改 变引起基底膜增厚。 临床特点：临床以肾病综合征(NS)或无症状性蛋白尿 为主要表现 膜性肾病（MNMN） 膜性肾病膜性肾病 - - 定义定义 特特发性发性MNMN（ I IMN )70-80%MN )70-80% 抗PLA2RPLA2R抗体（90%） 膜性肾病（膜性肾病（MNMN）的病因）的病因 THSD7A或查无自身抗体或已知的继发病因（10%） 继发性继发性MN ( sMN )MN ( sMN )（可参见（可参见KDIGOKDIGO列表）列表）20-30%20-30% 病原体感染（例如HBVHBV、HCVHCV、梅毒和疟疾） 自身免疫性疾病（例如系统性红斑狼疮、类风湿性关节炎、干燥综

3、合征和类天疱疮） 癌症 其他疾病（例如镰状细胞贫血、格林- -巴利综合征） 药物诱导（例如非甾体类抗炎药，黄金，汞和青霉胺、布洛芬、双氯芬酸等） 膜性肾病膜性肾病 - - 分类分类 特特发性膜性肾病发性膜性肾病 - - 致病机制致病机制 PLA2R 表达于人肾小球足细胞表面，抗磷脂酶A2 受体 抗体阳性的膜性肾病患者中，抗原/ 抗体复合物沉积在肾小 球基底膜上，激活补体系统，最终引起足细胞和肾小球滤过 屏障损伤，蛋白进入原尿，随后出现蛋白尿。 Beck LH Jr. Bonegio RG, Lambeau G, Beck DM,et al.M-type phosphorlipaseA2 rec

4、eptor as target antigen in idiopathic membranous nephropathy. N Engl J Med 361:11-21,2009 特特发性膜性肾病发性膜性肾病 诊断诊断 病理：肾小球上皮细胞下免疫复合物沉积，导致毛细血管基底膜弥漫性增厚。 Fervenza, F. C. et al. Clin J Am Soc Nephrol 2008;3:905-919 光镜：基底膜增厚，钉突 形成，无系膜细胞增生 免疫荧光：IgG和C3沉积 电镜：上皮下电子致密 物沉积 诊断: 肾活检 组织学检查（光镜、免疫荧光染色） 肾脏组织电镜检测 主要内容主要内容

5、1 1、原发性膜性肾病的疾病概况 2 2、抗PLA2RPLA2R抗体的临床意义与应用价值 3 3、抗PLA2RPLA2R抗体的指标检测性能 （1）原发性膜性肾病的诊断和鉴别诊断 抗PLA2R抗体是原发性膜性肾病的高特异性和灵敏度的血 清学标志物，可以用于区分原发和继发性膜性肾病。 (Hoxha, Harendza et al. 2011, Dahnrich, Komorowski et al. 2013) 抗抗PLA2RPLA2R抗体检测的临床意义与应用价值抗体检测的临床意义与应用价值 37例MN患者纳入研究 IMN：37例 sMN：8例 疾病对照：22例 健康对照：30例 PLA2R是原发性

6、膜性 肾病的靶抗原! 抗抗PLA2RPLA2R仅出现于仅出现于原原发性膜性肾病中发性膜性肾病中 Beck et al., N Engl J Med 361, 11-21 (2009) （2 2）疾病活动性和病情预测 抗PLA2RPLA2R抗体的水平与临床疾病活动性密切相关，抗体含量 的变化与临床结局存在一致性，是预测疾病进程的良好指 标。 抗PLA2RPLA2R抗体滴度越高，低白蛋白、eGFR下降越明显，肾 病范畴蛋白尿比例越高；疾病的自发缓解率越低；抗体滴 度高组仅有很小比例（4%）的患者获得自发缓解，当IMN 自发缓解或免疫抑制剂治疗获得缓解后该抗体迅速转阴； 肾功能衰竭风险及非肾病患者发

7、生肾病综合征的风险越高； 治疗时间越长。 抗抗PLA2RPLA2R抗体检测的临床意义与应用价值抗体检测的临床意义与应用价值 Beck et al, Kidney Int 77, 765-770 （2010） 抗抗PLA2RPLA2R与与临床结局存在一致性临床结局存在一致性 抗抗PLA2RPLA2R抗体滴度越高，抗体滴度越高，低白蛋白、低白蛋白、eGFReGFR下降越明显下降越明显 Chin J Inter Med，September 2015，Vol.54，No.9 抗体滴度越高，自发缓解率越低抗体滴度越高，自发缓解率越低 Hofstra JM et al. J Am Soc Nephrol

8、23 : 1735 1743, 2012 合并肾衰病例极少表达较低滴度的抗PLA2R抗体 自发性痊愈的病例极少表达较高滴度的抗PLA2R抗体 结果抗PLA2RPLA2R抗体 低滴度 抗PLA2RPLA2R抗体 中等滴度 抗PLA2RPLA2R抗体 高滴度 P P值 部分缓解 42%31%41%n.s. 完全缓解 27%35%30%n.s. 肾衰竭4%12%19%n.s. 持续蛋白尿 27%23%11%n.s. 自发缓解38%31%4%0,01 需要免疫抑制治疗48%54%88%- Hofstra et al, J Am Soc Nephrol 23, 1735-1743 （2012） 抗抗PL

9、A2RPLA2R抗体滴度抗体滴度疾病活动性与病情预测疾病活动性与病情预测 （3 3）治疗监测： 成功的免疫抑制治疗原发性MNMN患者可观察到抗PLA2RPLA2R抗体 滴度的下降，并在复发时抗体滴度再度升高 。 抗体滴度在蛋白尿水平升高之前升高，并在蛋白尿水平降低 前降低。 (Beck, Fervenza et al. 2011, Hoxha, Thiele et al. 2014) 抗抗PLA2RPLA2R抗体检测的临床意义与应用价值抗体检测的临床意义与应用价值 抗抗PLA2RPLA2R抗体水平可检测病情抗体水平可检测病情 Hoxha et al., J Am Soc Nephrol 25,

10、 1-10 (2014) CNI = 钙调神经磷酸抑制酶 Alk = 烷化剂 RTX = 利妥昔单抗 3种治疗方案无显著差异 抗PLA2R抗体水平迅速下降， 且先于尿蛋白 （4 4）风险评估： 40%40%的原发性MNMN患者在肾移植后会再次复发，尤其是移植 前抗PLA2RPLA2R抗体阳性的患者复发的风险更高。 (El-Zoghby, Grande et al. 2009) 抗体滴度可以用于评估肾移植后是否进行免疫抑制治 疗或判断治疗剂量，有助于预防肾移植后MNMN复发。 (Seitz-Polski, Payre et al. 2014) 抗抗PLA2RPLA2R抗体检测的临床意义与应用价值

11、抗体检测的临床意义与应用价值 抗抗PLA2RPLA2R抗体抗体 - - 风险评估风险评估 - 肾移植术后的风险评估 - 原发性膜性肾小球肾炎的诊断与鉴别诊断 评估疾病活动度和严重程度 辅助临床选择治疗方案 监测疾病的治疗效果 预测疾病预后：痊愈/复发（免疫学反应先于临床症状） 肾脏移植患者复发风险评估 抗抗PLA2RPLA2R抗体检测的临床意义与应用价值抗体检测的临床意义与应用价值 -抗PLA2R抗体定量检测的优势 主要内容主要内容 1 1、原发性膜性肾病的疾病概况 2 2、抗PLA2RPLA2R抗体的临床意义与应用价值 3 3、抗PLA2RPLA2R抗体的指标检测性能 标准化ELISA: -

12、 试剂通用性, - 温育时间短- 30 / 30 / 15 min - 半定量检测 （ratio or index） 或 - 定量检测 （5 个标准品, 2 1500 HEK PLA2R -transfected HEK control-transfected RU/ml） transmembrane domain intracellular tail Anti-PLA2R ELISA （EA 1254-9601 G） extracellular tail 抗抗PLA2RPLA2R抗体检测产品抗体检测产品 Anti-PLA2R RC-IIFT （FA 1254-xxxx-50） n Anti-

13、PLA2R positiveIgG RC-IFT Anti-PLA2R positiveIgG ELISA PrimaryMN,before treatment, within 8weeks after biopsy, anti-PLA2RRC-IFTpositive 198198（100%）190（95.9%） Other glomerulonephritides23000 Other autoimmune diseases31500 Healthy blood donors29101 Specificity836100%99.9% 抗抗PLA2RPLA2R抗体的灵敏度和特异性抗体的灵敏度和

14、特异性 抗体滴度会随着疾病活动性而发生波动，甚至可能因取样时发生以下事件 而检测不出： 自发性缓解 成功的免疫抑制治疗 原发性膜性肾病并非单一病因导致的疾病，可能存在多种靶抗原 一些患者可能被误判为特发性膜性肾病（实际为继发性） 为什么并非所有的为什么并非所有的IMNIMN患者均能检出抗患者均能检出抗PLA2RPLA2R抗体抗体? ? 文献文献 肾内科可以开展的项目肾内科可以开展的项目 项目名称标本要求送检时效检测方法临床意义报告时间价格备注 2微球蛋白 （2m）2微球 蛋白（2m） 血清2ml或尿2ml2ml 低温送检 7天 化学发光用于肾功能的评价和辅助诊断 周一至周日，2个 工作日 50

15、 尿微量白蛋白 （MAU） 晨尿2ml不加防腐剂不 加防腐剂 低温送检 7天 散射比浊法 糖尿病、高血压、心血管疾病、肾 病的病变程度及预后的临床参考 周一至周日，2个 工作日 25 异常免疫球蛋 白电泳 血清1.5ml及尿液1ml 及尿液1ml 低温送检 7天 蛋白电泳 辅助诊断多发性骨髓瘤及肾脏损伤 程度及类型 周一至周五，3个 工作日 810/ 960 血清游离轻链、 血清3ml或尿100ml （不加防腐剂）或尿 100ml（不加防腐剂） 低温送检 7天 散射比浊法 辅助诊断多发性骨髓瘤及自身免疫 性疾病、感染、肿瘤等 周一至周五，2个 工作日 490 免疫球蛋白+补 体6项 血清2ml

16、 低温送检 7天 免疫比浊法电 化学发光法 提示SLE、自身免疫性疾病、继发性 免疫缺陷等、自身免疫性疾病、继 发性免疫缺陷等 周一至周日，2个 工作日 200 免疫10项血清2ml 低温送检 7天 免疫比浊法免 疫荧光法 增高提示SLE 250 抗中性粒细胞 包浆抗体 （ANCA） 血清或血浆200ll 低温送检 14天 免疫荧光法 CANCA见于韦格氏肉芽肿血管炎， PANCA见于C-S综合征及溃疡性结 肠炎见于C-S综合征及溃疡性结肠炎 周一至周五，周 日，2各工作日 60 抗核抗体谱 （11项） 血清2ml 低温送检 14天 主要见于SLE，活动期阳性率达 80%-90%，活动期阳性率

17、达80%- 90% 周一至周五，周 日，2个工作日 410 抗肾小球基底 膜抗体（GBM） 血清或血浆200ll 低温送检 14天 免疫荧光法 是抗GBM抗体型肾小球肾炎特异性 抗体，包括Good-Pasture综合征，急 进型肾小球肾炎及免疫复合物型肾 小球肾炎，还见于药物诱导的间质 性肾炎抗体型肾小球肾炎特异性抗 体，包括Good-Pasture综合征，急进 型肾小球肾炎及免疫复合物型肾小 球肾炎，还见于药物诱导的间质性 肾炎 周一至周五，周 日，2个工作日 50 抗内皮细胞抗 体（AECA） 血清2ml 低温送检 5天 免疫荧光法主要见于原发性自身免疫性疾病等 周三，9个工作日40 SL

18、E自身抗体普 自身抗体普 血清2ml 低温送检 14天 系统性红斑狼疮的辅助诊断周三，9个工作日450 Thank you! （1）原发性膜性肾病的诊断和鉴别诊断 抗PLA2R抗体是原发性膜性肾病的高特异性和灵敏度的血 清学标志物，可以用于区分原发和继发性膜性肾病。 (Hoxha, Harendza et al. 2011, Dahnrich, Komorowski et al. 2013) 抗抗PLA2RPLA2R抗体检测的临床意义与应用价值抗体检测的临床意义与应用价值 37例MN患者纳入研究 IMN：37例 sMN：8例 疾病对照：22例 健康对照：30例 PLA2R是原发性膜性 肾病的靶抗原! Beck et al, Kidney Int 77, 765-770 （2010） 抗抗PLA2RPLA2R与与临床结局存在一致性临床结局存在一致性 结果抗PLA2RPLA2R抗体 低滴度 抗PLA2RPLA2R抗体 中等滴度 抗PLA2RPLA2R抗体 高滴度 P P值 部分缓解 42%31%41%n.s. 完全缓解 27%35%30%n.s. 肾衰竭4%12%19%n.s. 持续蛋白尿 27%23%11%n.s. 自发缓解38%31%4%0,01 需要免疫抑制治疗48%54%88%- Hofstra et al, J Am Soc Nephrol 23, 1