中药脱花煎协同米非司酮与米索前列醇终止早期妊娠的机理研究

1、DOC格式论文，方便您的复制修改删减 中药脱花煎协同米非司酮与米索前列醇 终止早期妊娠的机理研究 （作者：单位：邮编：） 作者：邓高丕孙冬莉李道成 【摘要】目的通过采用高倍显微镜、免疫组化的方法，检测药物流 产的绒毛、 蜕膜组织坏死率以及增殖细胞核抗原（PCNA蛋白和细胞凋亡相关基因2 （Bel 拟2）的表达，探讨活血化淤，祛淤下胎的中药古方脱花煎协同米非司酮、米索 前列醇终止早期妊娠的作用机理。方法对在70例临床疗效研究中收集到的完整 的药物流产标本25例（其 中观察组8例，对照组17例），采用前瞻性的对照 研究方法，检测两 组的绒毛、蜕膜组织结构坏死率以及PCNAg白和Bel拟2的 表达。

2、结 果两组的绒毛、蜕膜组织结构坏死率比较有显著差异（P0.05）；两组 的PCNAg白阳性表达率有显著性差异（P0.05）；两组的Bel-2阳性 表达率无显 著性差异（P0.05） o结论脱花煎协同米非司酮、米索前列醇可增加早期妊娠的 绒毛、蜕膜组织结构坏死率，提高流产效果；脱花煎协同米非司酮、米索前列醇 可降低药物流产的绒毛、蜕膜组织的 PCNAg白表达，促进妊娠组织细胞凋亡，提高流产效果；脱花煎协同米非司 酮、米索前列醇对药物流产蜕膜组织的Bel-2表达与米非司酮、米索前列醇组无 明显差异。 【关键词】脱花煎米非司酮米索前列醇增殖细胞核抗原细胞凋 亡相关基因拟2 经过阅读复习文献发现，对中

3、药药物流产的研究绝大多数集中在临床 疗效、减少 副作用等方面的探讨，且中药的使用时间大多数是在妊娠组织排出后，目的在于 缩短阴道流血时间和减少流血量1,鲜见对其作用机制方面的深入探讨。本研究 采用活血化淤、祛淤下胎的中药 古方脱花煎协同米非司酮、米索前列醇终止早期 妊娠，观察其对早期 妊娠的绒毛、蜕膜组织结构坏死率以及对细胞滋养细胞胞浆 增殖细胞 核抗原（PCNA蛋白和细胞凋亡调控因子细胞凋亡相关基因-2 （Bcl- 2 ）表达等方面的影响，探讨其终止早期妊娠的作用机制。 1临床资料 11研究对象 研究对象均来源于200或1092007以02在广州中医 药大学第 一附属医院妇科就诊，要求药物终

4、止妊娠者。所有研究对象严格按照下列的诊断 标准、纳入标准和排除标准进行筛选，按SAS9.0系统设置的随机方法分组，对 在70例临床疗效研究中（观察组34例，对照组36例）能完整收集到的流产标 本25例按原分组方法分为观察 组8例，对照组17例。 1.2诊断标准停经日数w49d, HCG阳性；确诊为宫内妊娠（B型超声见 到宫腔内有妊娠囊）。 1.3纳入标准符合上述诊断标准者；年龄1842岁之间；血 分析正常； 本人自愿使用药物终止早期妊娠，签署知情同意书者。 1.4排除标准不符合诊断标准和纳入标准者；对米非司酮或米索前列醇过敏 者；可疑异位妊娠，妊娠剧吐者；有生殖器官肿瘤 或畸形者；合并有心血

5、管、脑血管、糖尿病、甲状腺病、肝肾和造 血系统等严重疾病及精神病患者； 有肝炎、结核等传染病者；患者不合作，无法按方案进行者。 2研究方法 2.1服药方法 2.1.1观察组（脱花煎+米非司酮、米索前列醇组）口服米非司酮150 mg,服 药前后均空腹2 ho口服米非司酮后2 h,开始服中药脱花煎，2剂/d,共3 d,水煎服中药脱花煎组成：当归15 g，川茸10g,肉桂3g （煽服），川 牛膝15g,红花3g,车前子15 g。48 h后口服米索前列醇600 Pg,服 药前后均空腹2 ho 2.1.2对照组（米非司酮、米索前列醇组）服药方法同观察组。 2.2标本收集及处理 将药流排出的绒毛、蜕膜组织

6、，马上用10%福尔马林固定 后，将所得到的绒毛及蜕膜组织，制作芯片，常规包埋，切片，备用于检测。每 张切片中均有观察组、对照组，以保证检测条件一致。 2.3检测方法采用高倍显微镜检测绒毛、蜕膜组织结构坏死率；采用免疫组化的 方法检测PCNA和Bcl-2的表达。免疫组织化学染色结 果判断：（-）无染色信 号。（+ ）染色信号呈细颗粒状，棕黄色，阳性细 胞占总细胞数50%以下。 （+）染色信号呈细颗粒状，棕黄色，阳性细胞占总细胞数50%以上；或染色 信号呈粗颗粒状、块状，棕黑色，阳性细胞占总细胞数50%以下。（+）染色信 号呈粗颗粒状或块状，棕黑色，阳性细胞占总细胞数50%以上。 2.4统计方法采

7、用SPSS11.0统计软件，计量资料采用t检验，计数资料米用X 2检验。 3结果 3.1 一般资料两组孕者的年龄、孕周比较见表1。表1两组孕者的年龄、孕周比 较两组的年龄分布差异无显著性(P0.05),具有可比性。其中观察组最大年龄为 34岁，最小年龄为20岁；对照组最大年龄为41岁，最小年龄为20岁。两组的 孕周分布差异无显著性(P0.05),具有可比性。 3.2两组的绒毛、蜕膜组织结构坏死率比较见表2o表2绒毛、蜕 膜组织结构面 积的坏死率比较 经独立样本t检验，观察组比对照组 绒毛及蜕膜组织变性坏死面 积更大，坏死程度更彻底，两组比较有显著性差异(P0.05)o 3.3两组的蜕膜PCNA

8、蛋白表达结果比较见表3。由表3可见，PCNA在观察组 的蜕膜组织表达多为+,而对照组多为+-+,有组间差 异(P0.05)o表3两 组蜕膜PCNAg白表达结果比较 3.4两组的绒毛、蜕膜Bcl-2表达结果比较见表4。由表4可见，在绒毛合体细 胞滋养层细胞浆和蜕膜中，两组Bcl-2均呈强阳性表达，无组间差异(P0.05)o 表4两组的绒毛、蜕膜Bcl-2表达结果比较例 4讨论 脱花煎出自景岳全书妇人规，由当归、川茸、肉桂、川牛膝、红花、车前 子组成。功效为理气行血，祛淤下胎。方中当归、川茸活 血，川茸又能行血中之 气；肉桂温通血脉，红花祛淤，牛膝引血下行；车前子软坚滑利以下胎。合而用 之，淤血去

9、而死胎下。现代药理研究证实2:当归含有兴奋子宫和抑制子宫两 种不同成分，对多种动物已孕、未孕的离体子宫、在位子宫具有“双向性”调节 作用。当归的兴奋成分为水溶性甚高、溶于醇而不溶于醯的非挥发性物质，能使 子宫平滑收缩加强，大量或多次给药时，甚至可出现强直性收缩。醇 溶性物质比 水溶性物质作用强。当归的抑制成分为高沸点挥发油，1 : 50浓度即对子宫产生 迅速而持久的抑制作用，使子宫肌弛缓，节律性收缩减少，1 ： 25浓度即可使收 缩完全停止、但洗去药液后子宫收缩可恢复，对子宫无明显损害。川茸浸膏能 使孕兔离体子宫收缩加强，甚至痉挛；大剂量则转为抑制，使子宫麻痹，收缩停 止。川茸浸膏给妊娠兔或大

10、鼠连续注射，可使胎仔坏死在子宫内，但不堕下，推 测胎仔的坏死可能受川茸的作用引起痉挛而影响胎仔营养有关。牛 膝具有兴奋子宫和抗生育作用，牛膝流浸膏或煎剂对离体子宫家兔不论已孕、未 孕均有兴奋作用，对收缩无力的小鼠离体子宫，则使收缩加强，对猫的未孕子宫 成弛缓作用，而对已孕子宫则发生强有力的收缩，牛膝总皂昔在0.1251.0 mg/ml的浓度内，对大鼠子宫平滑肌有明显兴奋作用，给药后子宫收缩幅度增 高，频率加快，张力增加，子宫收缩面积较给药前显著增大。有报告指出，怀牛 膝总皂苜给小鼠灌胃并有明显的抗着床作用。红花煎剂对小鼠、家兔、猫、豚 鼠、狗等动物在体或离体子宫均有不同程度的兴奋作用，小剂量可

11、使子宫紧张性 或节律性收缩，大剂量可使子宫紧张性与兴奋性升高，子宫收缩，甚至痉挛。此 作用对已孕子宫较未孕子宫更为明显。 根据表1：观察组和对照组年龄、孕周比较无显著性差异（P0.05）,说明两 组一般资料均衡，具有可比性。 根据表2:观察组和对照组的绒毛、蜕膜组织结构面积坏死率分别 为（43.75 士 34.62）唏口（24.76 士 14.68） %两组比较有显著性差异 （P0.05） o实验中，发现观察组绒毛、蜕膜组织细胞呈不同程度的退行性变、 水肿，可见炎细胞浸润、，变性、坏死，少数细胞核固缩、破碎，细胞质不均匀 及空泡变性，部分组织细胞界限不清，相互融合，正常组织细胞结构破坏，其坏

12、控制的细胞自我消亡过程，是细胞生命周期的重要环节。细胞凋亡是一种主动 的、固有的现象，它发生在胚胎发育、生物变态、内分泌器 官的萎缩及正常组织 的修复更新过程中5, 6o本研究中两组Bcl-2均呈强阳性表达，一方面可能是 由于米非司酮的作用已使Bcl-2呈强阳性表达，无法体现出中药脱花煎对Bcl-2 表达的影响。另一方面也可能是脱花煎对Bcl-2表达的影响很小或没有意义，仍 需做进一步的研究。 综上所述，脱花煎协同米非司酮、米索前列醇可增加早期妊娠的绒毛、蜕膜组织 结构坏死率，从而提高流产效果；脱花煎协同米非司酮、米索前列醇可降低药物 流产的绒毛蜕膜组织PCNAg白的表达，促进 妊娠组织细胞凋

13、亡，从而提高流产效果；脱花煎协同米非司酮、米索前列醇对 Bcl-2的表达与米非司酮、米索前列醇组无明显差异。 【参考文献】 ：1姜翠英，吴永庆.脱花煎辅助早期妊娠药物流产中100例临床观 察J甘肃科技，2004, 20( 10)：182. ：2马清钧，王淑玲.常用中药现代研究与临床购天津：天津科技翻译出 版公司，1995:382. 3 Hall PA,Levison DA, WoodsAL, et al. Proliferationing cell nuclear antigen (PCNA) immunolocation in paraffin section: Anin dex of ce

14、ll proliferati onwith evide nee in some neoplasms :J . J Pathol,1990,162:285. 4 Lipponen PK, Eskelinen MJ .Cell proliferation of tran siti oning cell bladder tumor determ ined by PCNA cycl in immuno sta ining and its prog no Stic valye J . Br J Can cer,1992, 66： 171. 5 Dai D, Mouiton BC, Ogle TF, etal. Regression of the decidu