甲壳素与壳聚糖的制备.

1、甲壳素与壳聚糖的制备 适用对象 生物工程专业 实验学时 15 学时一、实验目的1、掌握以虾壳或蟹壳为原料，用酸碱法制备甲壳素；用制备好的甲壳素脱 乙酰化制备壳聚糖。2、了解甲壳素与壳聚糖的应用，黏度计的使用。二、实验原理 甲壳素广泛存在于虾、蟹、昆虫等甲壳动物的外壳。甲壳素一般 与蛋白质或碳酸钙或两者同时紧密结合在一起， 成为络合物， 通过酸 碱处理可除去钙盐及蛋白质等杂质，虾、蟹壳还有色素，可以通过氧 化还原除去。甲壳素是聚-2-乙酰胺基-2-脱氧-D-吡喃葡糖，是一种 线形中性高分子多糖， 经浓碱处理去掉乙酰基得到脱乙酰甲壳素， 即 壳聚糖。三、仪器设备旋转黏度计、烘箱、水浴锅、天平等。四

2、、相关知识点 多课程知识点：多糖化学特点，生化提取方法：蛋白质分解方法，碳酸盐降 解方法，有机化学知识：酰胺基脱酰基方法。五、实验步骤（一）原料处理1、洗净 将市场上收集的虾、蟹壳原材料用自来水冲洗，并除去非虾、蟹 壳类的杂质。2、烘干洗净后的虾、蟹壳，置烘箱 100C直至烘干，每组称取50克， 适当掰碎。（二）盐酸浸泡1、称取每组称取 50 克，适当掰碎。2、2M盐酸配制3、盐酸浸泡除钙盐将称好的50克虾、蟹壳置于 2000ML的烧杯中，加入2M盐酸 1000ML在水浴锅中40C浸泡，时而玻棒搅拌，直至无泡产生，除 碳酸钙和磷酸盐等。4、水洗至中性 虾、蟹壳盐酸浸泡除钙盐后，将泡酸液倒入废液

3、缸，虾、蟹壳用自来水冲洗至中性（PH试纸检测）。（三）碱处理1、10%的氢氧化钠配制2、碱回流将炮了酸洗至中性的虾、蟹壳倒入 2000ML的烧瓶中，加入10% 的氢氧化钠1000ML水浴锅中90C -95 C加热3-4小时。用于除蛋白 质，脂质，色素3、水洗至中性 虾、蟹壳碱回流后，碱液倒入废液缸，虾、蟹壳用自来水冲洗至 中性。（四）脱色1 、高锰酸钾浸泡5%高锰酸钾浸泡 30 分钟氧化脱色，倒掉高锰酸钾浸泡液于废液缸。2、亚硫酸钠浸泡高锰酸钾浸泡后的虾、蟹壳用 5%亚硫酸钠浸泡 15 分钟到 30 分 钟脱色，倒掉亚硫酸钠泡液于废液缸。3、水洗至中性 脱色完后样品用自来水洗至中性得产品为白色

4、片状甲壳素 。（五）甲壳素脱 乙酰基制备壳聚糖1、甲壳素氢氧化钠回流脱乙酰基。称取5g甲壳素加40%-503的氢氧化钠500ML,在烧瓶中110C回 流 1 小时脱乙酰基。2、水洗至中性，烘干回流完毕后，倒掉回流碱液于废液缸中， 产品用自来水洗至中性， （PH试纸检测），并置于烘箱中100C直至烘干。产品为壳聚糖，白 色或淡黄色。（六）测壳聚糖的黏度1 、调试黏度 计安装好 NDJ-1 旋转黏度计，调至水平状态， 插上电源，并调试好。2、测黏度称取 1 克壳聚糖于 200 毫升烧杯中用 100毫升 2%的冰醋酸水浴 溶解。杯中溶解液置于如图中转子中，液面指示线与杯中液面相齐。 试调转速与转换转子，直至读数指针停在在10100之间。测转速。连测三次取平均值。若黏度较高，说明壳聚糖含量高。否则则甲壳素 还没完全转化为壳聚糖，还需继续强碱热水解。六、实验报告要求务必写实验项目，目的要求，实验原理，实验工艺路线或流程，结果与分析。七、思考题甲壳素与壳聚糖何者水溶性好，各有何应用？八、实验成绩评定办法主要评分点：原理描述