api菌种鉴定系统介绍

1、.,1,API菌种鉴定系统介绍,.,2,API鉴定系统是由法国生物-梅里埃公司生 产的细菌数值分类分析鉴定系统。可鉴定的细 菌大于800种。 API系统用于细菌鉴定的产品有15种, 别 有相应的数据库。,.,3,A P I 鉴定系统的组成,A P I 鉴定系统的主要部分是 API试剂条、辅助试剂 及结果判读系统组成,鉴定主要依据API试剂条的生化反应结果，将一种细 菌与其它细菌相鉴别,并用% id (鉴定百分率) 表示每 种细菌的可能性。,.,4,1.发酵或同化抑制试验: 是根据待测菌是否受到反应杯中特异抑制物的抑制而不能产生分解代谢或不能生长来判断。,2.酶试验: 根据待测菌含有相应的酶就可

2、分解底物, 再通过显色反应来判断。如碱性磷酸酶、氧化酶、B- 半乳糖苷酶、赖氨酸脱羧酶、鸟氨酸脱羧酶、色氨酸脱羧酶、吲哚产生等。,3.其它生化反应: 如硝酸盐还原酶、七叶苷、明胶、硝酸盐还原等。,4.发酵试验: 为碳水化合物与酸的分解代谢试验, 结果是通过PH 的变化引起酸碱指示剂颜色的改变来判断。如葡萄糖、乳糖、甘露糖、蔗糖、甘露醇、肌醇、山梨醇等。,5.同化试验: 根据待测菌能否利用反应杯中的单一碳水化合物作为碳源而得以生长来判断。如葡萄糖、阿拉伯糖、甘露糖、甘露醇、N - 乙酰葡糖铵、葵酸、乙二酸、苹果酸等。,常见的生化反应,.,5,API试剂条,API试剂条由透明的PVC材料制成, 不

3、同的试剂条有不同数量 的反应杯, 每个反应杯内包被有相应的干燥生化基质,在A P I 鉴定系统中有15 个鉴定系列, 20 余个品种, 对于不同的细菌，分别使用不同的试剂条,.,6,某些试验在孵育完成后需添加试剂才能进行判断。如吲哚 试验需添加IND 或James 试剂, V P 试验需添加V P1、V P2 试剂, 硝酸盐还原试验需添加N IT1、N IT 2 试剂、色氨酸脱羧酶试验需 添TDA 试剂等,辅助试剂,.,7,结果判读系统,A P I LAB Plus 分析软件,原理：生化结果组合跟资料库內的典型条目作比较，经计算後得出： 鉴定百比率（%Id）机会率 与数据库中各个项的接近程度来

4、确认未知菌是否属于某一个分类单位(科,属,种) T值（T index）=变异程度 待检菌的分类单位被确定以后，T 值表示其生化反应结果与该菌最典型生化谱的接近程度,.,8,鉴定前常规的分离培养是必不可少的。 分离培养后挑选可疑菌落进行预试验, 如革兰氏 染色、镜检、氧化酶实验、触酶试验等。 预试验起定向的作用, 根据定向的结果选用不同 的A P I 试剂条。,鉴定前的准备,.,9,杆菌,球菌,接触,接触,革兰氏,革兰氏,杆菌,球菌,氧化,氧化,革兰氏,革兰氏,.,10,革兰氏染色 (compare with selective medium &morphology),.,11,.,12,.,13,.,14,数 码 鉴 定,将每3个生化反应分成一组,每组中阳性结果分别标记为1、2、4 将每组数值相加,得到一组编码,.,15,.,16,结果判读,极好的鉴定 % id 99.9 T 0.75 非常好的鉴定 % id 99 T 0.5 好的鉴定 % id 90 T 0.25 可接受的结果 % id 80 T 0 不可接受的结果 % id 80,每一个鉴定结果都会附有相应的评语- 鉴定结果的可信性,.,17,弯曲菌的生化确认,革兰氏阴性 海鸥型 氧化酶阳性 接触酶阳性,.,18,VIDAS CAMPYLOBACTER,前培养肉汤,24hr-48hr ,