细胞工程张韶杰

1、细胞工程基本技术,植物,动物,基础，植物克隆,（基础，细胞克隆,动物克隆,（细胞杂交,第2讲 细胞工程（克隆技术,植物组织培养,植物体细胞杂交,动物细胞培养,动物体细胞核移植,动物细胞融合,制备单克隆抗体,第2讲 植物细胞工程,一、植物组织培养（植物克隆,一）基本流程,离体,脱分化,愈伤组织,再分化,二）基本原理,细胞的全能性,三）培养条件,四）主要优点,1. 繁殖，保持,2.快速、高效,无性,亲本优良性状,1.组织要,离体,营养,激素（生长素和细胞分裂素,2.培养基要,3.,4.,无菌,无机（ 和,有机（ 糖、维生素等,5.其他如：,大量元素,微量元素,蔗,光照、温度、pH等,一、植物组织培

2、养,五）主要应用,1.快速繁殖（又叫： ，优点：,2.作物脱毒（选材： ，如：,3.工厂化生产细胞产物（选材：,4.作物育种,1）人工种子（人工种皮包裹 、不定芽等,2）诱变育种（选材： ，易,3）单倍体育种（方法：,4）体细胞杂交育种,5）基因工程育种,是它们的下游技术,微型繁殖,保持亲本优良性状,分生区细胞,茎尖,愈伤组织,胚状体,愈伤组织,被诱导基因突变,花药离体培养，秋水仙素加倍,3+2P252 基础题,B,愈伤组织,胚状体、根、芽等,3+2P253 高考题,D,离体组织等,植物体,得单倍体植株，需再加倍,3+2P35 模拟题,C,组织培养：无性繁殖,植物组织培养,二、植物体细胞杂交,

3、第2讲 植物细胞工程,一）基本流程,二）基本原理,1.,2.,细胞膜的流动性,细胞的全能性,三）主要优点,打破 ，克服,生殖隔离,远缘杂交障碍,纤维素酶,果胶酶,物理诱导,化学诱导,离心、振动、电激,聚乙二醇，PEG,脱分化,再分化,愈伤组织,3+2P252 基础题,去掉细胞壁,纤维素酶和果胶酶处理,PEG（聚乙二醇,诱导原生质体融合,植物组织培养,脱分化,再分化,双亲性状,杂种细胞具有双亲的遗传物质,四倍体,可育,否,存在生殖隔离,克服远缘杂交障碍,否,无性繁殖，无减数分裂,第2讲 动物细胞工程,一、动物细胞培养 （细胞克隆,一）基本流程,胰蛋白酶,原代 培养,传代 培养,第一次 分瓶,10

4、代,50代,二）基本原理,细胞增殖（有丝分裂,三）培养条件,1.培养液要,2. 营养,无机（ 和,有机（ 糖、 、氨基酸等,大量元素,微量元素,葡萄,血清或血浆,3.温度和pH（ 和,4.气体环境 （ 和,无菌、无毒,37,近中性,O2,CO2,衰老,胚胎或幼龄,3+2P253 高考题,C,D,癌细胞,50代，癌变后,植物固体,动物用,动物不可,AB,3+2P36 模拟题,动物特有,二、动物体细胞核移植（动物克隆,第2讲 动物细胞工程,一）基本流程,体外培养,细胞培养,去核,诱导融合,胚胎移植,减中期卵母细胞,二）基本原理,1.,细胞（核）的全能性,2.细胞融合,细胞膜的流动性,3.细胞培养,

5、细胞增殖,3+2P253 高考题,B,植物,动物体细胞核移植,动物细胞融合,早期胚胎培养,3+2P252 基础题,BC,胚胎工程：体外受精早期胚胎培养胚胎移植,克隆人,3+2P35 模拟题,B D,减数分裂时,囊胚期的内细胞团,3+2P35 模拟题,C,植物可以,新物种,动物体细胞核移植（动物克隆,受精卵中有家驴基因,3+2P252 基础题,D,克隆：可理解为复制、无性繁殖、有丝分裂,个体克隆：植物组织培养、动物体细胞核移植、胚胎分割,细胞克隆：动物细胞培养,基因克隆：PCR技术,无性繁殖,植物组织培养、动物体细胞核移植,动物细胞培养,三、动物细胞融合（细胞杂交,1.基本原理：,2.诱导融合：

6、,4.重要用途：,3.主要优点：打破 ，克服,第2讲 动物细胞工程,细胞膜的流动性,类似（+灭活的病毒,生殖隔离,远缘杂交障碍,制备单克隆抗体,植物体细胞杂交和动物细胞融合比较，正确的是 A诱导融合的方法完全相同 B所用的技术手段基本相同 C所采用的原理完全相同 D都能形成杂种细胞,D,3+2P252 典例2,动：灭活的病毒,植：酶解法去壁,植：细胞膜流动性、细胞的全能性,3+2P35 模拟题,B,细胞增殖,愈伤组织,1.右图表示某反应物剩余量随pH及温度的变化情况，正确的是A该酶的最适温度是37B随着pH的升高，酶的活性先降低后增大C随着温度的升高，酶的最适pH不变D随着温度的升高，酶的活性

7、逐渐降低,C,每节2题 2011中山期末,2.在植物体的细胞中，葡萄糖分解为丙酮酸的反应（双选） A既可以在线粒体中进行，也可以在细胞质基质中进行 B既可以在叶肉细胞中进行，也可以在根细胞中进行 C既可以在有氧条件下进行，又可以在无氧条件下进行 D只能在有光条件下进行，不能在无光条件下进行,BC,35,先增大后降低,先增大后降低,只能,与光无关,pH=8,都在其细胞质基质,有氧呼吸需氧,四、单克隆抗体,一）制备流程,细胞培养,免疫,诱导融合,杂交瘤 细胞,分泌所需抗体 的杂交瘤细胞,体外培养,体内培养,PS：杂交瘤细胞特点：既能 ，又能,大量增殖,产生专一抗体,第2讲 动物细胞工程,二）主要优点,强， 高，并可,特异性,灵敏度,大量制备,三）主要应用,1.作为诊断试剂，如：诊断怀孕,2.定向运载药物，如：生物导弹,原理：,抗原-抗体特异性结合,3+2P253 高考题,D,脱分化,已免疫的B细胞,X-Y杂交细胞,细胞分化：基因的选择性表达，形态、结构、功能发生稳定性差异,筛选掉X-X、Y-Y,胞吐,不断增殖,全能性低,再分化,3+2P254 高考题,逆转录,限制酶,DNA连接酶,动物细胞融合,杂交瘤细胞,抗A蛋白的单克隆抗体,RNA序列,A蛋白,杂交瘤细胞,免疫,抗原,逆转录,构建表达载体,疫苗：抗原，预防 抗体：治疗和检测,3+2P35 模拟题,D,限制酶,DNA连接酶,已免