尿蛋白检验

尿液化学检查（尿蛋白的检验）,河南科技大学第二附属医院,王善龙,尿液化学检查,尿液化学检验包括酸碱度、蛋白质、糖、酮体、胆色素、酶、激素等检查pH、PRO、GLU、 KET 、BIL、URO,本节要点,了解尿液特殊化学检验的项目方法及临床意义掌握尿液一般化学检验的原理重点掌握尿液一般化学检验中蛋白、糖、酮体及三胆等的注意事项及临床意义,尿液蛋白质,尿液蛋白质检查,健康人尿中的蛋白质含量甚微（30130mg/24h), 当尿液中蛋白质100mgL或150mg/24h时,蛋白定性为阳性，称为蛋白尿,尿蛋白定性检测方法,加热乙酸法磺基水杨酸法干化学试带法,干化学法,指示剂蛋白质误差原理，1909年Soerensen发现成分主要酸碱指示剂溴酚蓝（阈值.2）柠檬酸缓冲系统表面活性剂 1971年日本生产对白蛋白、球蛋白、本周氏蛋白均反应1993年生产出免疫学方法,干化学法-指示剂蛋白质误差原理,1909年Soerensen发现,3，3，5，5-四溴苯酚磺酰酞,尿蛋白试剂带组成及特性,试带法检测尿蛋白的干扰因素,仅作为过筛实验,不同对尿蛋白的影响,青霉素对蛋白质测定影响,大剂量青霉素滴注后对试带法测定尿蛋白的影响,h后检测尿蛋白,加热醋酸法测定尿蛋白,加热可使蛋白质变性凝固，加酸使蛋白质接近等电点，在含有适量无机盐的情况下，蛋白沉淀,标本要新鲜，陈旧尿液因大量细菌生长可引起假阳性,其他分泌物也可能出现假阳性加酸过多或过少远离蛋白质等电点,可呈假阴性无盐或低盐饮食的病人，因尿内电解质含量少，不利蛋白质沉淀，可致假阴性。可先加-滴饱和氯化钠液后再操作严格按照加热加酸再加热程序，否则假阴性,加热乙酸法注意事项,磺基水杨酸法,试管法玻片法,磺基水杨酸法-干扰因素,假阳性尿液混浊 含有大量尿酸、尿酸盐、草酸盐一些药物如大剂量青霉素、含碘造影剂、降血糖药可呈假阳性混入生殖系统分泌物假阴性尿液过碱（PH9)或过酸（PH3),大剂量青霉素滴注后对磺基水杨酸法测定尿蛋白的影响,尿蛋白定性实验方法学评价,在疾病发展过程中需要系统观察尿蛋白含量的，建议使用磺基水杨酸（加热醋酸）和双缩尿法,对单纯球蛋白有特殊反应,尿液蛋白质的定量检验,比浊法,磺基水杨酸三氯乙酸钨酸氯化苄甲乙氧胺氯化苯甲烃胺,双缩脲法：经典方法,通过加酸于尿液中使蛋白质沉淀而形成一定的浊度,碱性环境下，蛋白质与季胺盐结合形成不溶性沉淀,染料结合法,直接法,考马斯亮蓝G-250邻苯三酚红,染料和蛋白质结合时，其最大吸收峰发生漂移,沉淀法,丽春红S苯胺蓝,蛋白质与结合的染料在TCA的作用下共沉淀。然后碱性环境使沉淀复溶，测定吸光度,免疫法电泳法,尿液蛋白质定量检验方法评价,临床意义,定性试验（）定量试验：150mg/24h(9万的蛋白如IgG、IgA、IgM、C3和中分子量以及小分子量蛋白2-MG免疫球蛋白清蛋白比值0.5尿蛋白+，定量0.53g/L,多见于原发性肾小球疾病：激进性肾炎、慢性肾炎、膜性或膜增生性肾炎继发性肾小球肾炎：糖尿病、红斑狼疮提示预后差,肾小管性蛋白尿,尿中蛋白以1-M、2-M、LZM、RNase增多为主，清蛋白正常或轻度增多尿蛋白+，定量2g/L 试带法可出现假阴性，其他方法阳性,肾小管性蛋白尿,肾小管间质病变间质性肾炎、肾盂肾炎、遗传性肾小管疾病、慢性失钾性肾病中毒性肾间质性肾病 重金属中毒,苯、四氯化碳有机溶剂抗生素中草药：马兜铃、木通c)器官移植,马兜铃,混合性蛋白尿,肾脏病变累及肾小球和肾小管，由此产生的蛋白尿称为混合性蛋白尿标题1非选择性肾小球性蛋白尿伴游离轻链;2肾小管性蛋白尿伴游离轻链3生理性蛋白尿4混合性蛋白尿5选择性肾小球性蛋白尿,图1 SDS-PAGE电泳图谱,肾后蛋白尿,组织性蛋白尿 在尿液代谢过程中，肾小管代谢产生的和肾组织破坏