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文档简介
实验三肠道内及组织内病原,实验目的,掌握肠道致病菌与非致病菌的常用鉴别方法。学习组织内及血液内病原的检查方法了解肠道杆菌的生化反应。学习分区划线接种法。,实验内容,大肠杆菌、痢疾杆菌的EMB、SS培养基的接种。溶血现象示教:完全溶血及不完全溶血现象咽拭试验血浆凝固酶试验:玻片法抗“O”试验,实验原理,EMB、SS培养基鉴别肠道致病菌及非致病菌的原理。,EMB(伊红美兰培养基): 蛋白胨 乳糖 磷酸氢二钾 琼脂 2%伊红Y溶液(酸性染料指示剂) 0.65%美蓝溶液(碱性染料),EMB平板(伊红美蓝琼脂培养基) 原理: 细菌 乳糖 产酸:伊红美蓝 紫黑/紫红 结果: 非致病菌 致病菌,分解,菌落变黑,有金属光泽,菌落无色、半透明,肠道致病菌与非致病菌在EMB培养基上的生长,SS培养基:蛋白胨 乳糖柠檬酸钠 硫代硫酸钠 10%柠檬酸铁溶液 1%中性红溶液(酸性指示剂) 0.1%煌绿溶液,SS平板-分离肠道致病菌的强选择培养基,原理:胆盐、枸橼酸钠、煌绿: 抑制肠道非致病菌2.乳糖、中性红(pH6.8-8.0,红橙黄) : 致病菌不分解乳糖,但分解蛋白胨产生碱性物质菌落淡黄色; 大肠杆菌分解乳糖产酸,菌落呈红色。,致 病 菌:小,无色,半透明非致病菌:大,红色,实验材料,每组四块培养基:两块EMB、两块SS培养基大肠杆菌、痢疾杆菌斜面培养物接种环酒精灯,实验步骤,将大肠杆菌以分区划线的方式分别接种至EMB、SS 培养基上。将痢疾杆菌以分区划线的方式分别接种至EMB、SS 培养基上。将接种好的培养基置入37培养箱培养24小时。记录并分析结果。,分区划线法 (得到单个菌落做纯培养),肠道杆菌的生化反应,伤寒,葡萄糖,甘露醇,乳糖,靛基质,硫化氢,动 力,大肠,葡萄糖,甘露醇,乳糖,靛基质,硫化氢,动 力,四、抗“O”实验: 1、实验原理 2、应用 3
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