天然药化黄酮

黄酮类化合物,是一类重要的天然色素，也是中药中一类重要的有效成分。分布广泛，多分布于高等植物中，集中在被子植物。以唇形科、玄参科、爵麻科、菊科等存在较多。常以游离态或与糖结合成苷的形式存在。在花、叶、果中多为苷；在木质部多为苷元，生理活性多种多样，作用强，毒性不大。,黄酮类化合物生物合成的基本途径: 以前，黄酮类化合物(flavonoids)主要是指基本母核为2-苯基色原酮(2-phenyl-chromone)类化合物，现在则是泛指两个苯环（A-与B-环）通过中央三碳链相互联结而成的一系列化合物。,生物合成研究表明A环来自于三个丙二酰辅酶A，B环来自于桂皮酰辅酶A。,主要的生理活性,1.对心血管的作用，如葛根总黄酮及葛根素(puerarin)、银杏叶总黄酮等具有扩张冠状血管作用 。芦丁（rutin）、橙皮苷（hesperidin）、d-儿茶素（d-catechin）等具有降低毛细血管脆性和异常通透性作用，可用作毛细血管性出血的止血药及治疗高血压、动脉硬化的辅助药 。2.抗菌、抗病毒作用，如黄芩苷，木犀草素苷等。3.止咳祛痰作用，如杜鹃素、甘草素和甘草苷等。,主要的生理活性,4. 肝保护作用，如从水飞蓟种子中得到的水飞蓟素，临床上用以治疗急、慢性肝炎，肝硬化及多种中毒性肝损伤等疾病。5. 雌性激素样作用，如大豆素等异黄酮有雌性激素样作用，可能是由于其结构与己烯雌酚结构相似的缘故。6. 泻下作用，如营实中的营实苷A有致泻作用。,根据中央三碳链的氧化程度、B-环连接位置（ 2-或3-位）以及三碳链是否构成环状等特点，可将重要的天然黄酮类化合物分类如下：,第一节 结构与分类,（一）黄酮类(flavones) 黄酮类是以2-苯基色原酮为基本母核，3位无含氧取代的一类化合物。 天然黄酮A环的5，7位几乎同时带有羟基，而B环常在4位有羟基或甲氧基，3位有时也有羟基或甲氧基。,黄酮类,常见的黄酮及其苷类有芹菜素、木犀草素、黄芩苷等。,芹菜素,木犀草素,黄芩苷,（二）黄酮醇类(flavonol) 黄酮醇类在黄酮基本母核的3位上连有羟基或其他含氧基团。,黄酮醇,常见的黄酮醇及其苷类有山柰酚、槲皮素、杨梅素、芦丁等。,山柰酚,杨梅素,槲皮素 R=H芦丁 R=芸香糖,（三）二氢黄酮类（Flavanones） 二氢黄酮类结构可看作是黄酮基本母核的2、3位双键被氢化而成。,二氢黄酮类,如橙皮中的橙皮素和橙皮苷；甘草中的甘草素和甘草苷。,橙皮素 R=H橙皮苷 R=芸香糖,甘草素 R=H甘草苷 R=glc,（四） 二氢黄酮醇类（Flavanonols） 二氢黄酮醇是黄酮醇类的2、3位被氢化的黄酮类化合物，而且常与相应的黄酮醇共存于同一植物中。,二氢黄酮醇类,如满山红叶中的二氢槲皮素和槲皮素共存，桑枝中的二氢桑色素和桑色素共存。,二氢槲皮素,二氢桑色素,黄柏叶中具有抗癌活性的黄柏素-7-O-葡萄糖苷也属于二氢黄酮醇类。,黄柏素-7-O-葡萄糖苷,（五）异黄酮类（Isoflavanone） 异黄酮类母核为3-苯基色原酮的结构，即B环连接在C环的3位上。,异黄酮类,豆科植物葛根中所含有的大豆素、大豆苷、大豆素-7，4-二葡萄糖苷、葛根素和葛根素木糖苷均属于异黄酮类化合物。,大豆素 R1=R2=R3=H大豆苷 R1=R3=H R2=glc葛根素 R2=R3=H R1=glc大豆素-7，4-二葡萄糖苷 R1=H R2=R3=glc葛根素木糖苷 R1=glc R2=xyl R3=H,（六）二氢异黄酮类（Isoflavanones） 二氢异黄酮具有异黄酮的2、3位被氢化的基本母核。,二氢异黄酮类,（七）查耳酮（Chalcones） 结构特点为二氢黄酮C环的1、2位键断裂生成的开环衍生物，即三碳链不构成环。,查耳酮类,在酸的作用下，查耳酮可转化为无色的二氢黄酮，碱化后又转为深黄色的2-羟基查耳酮。,2-羟基查耳酮,二氢黄酮,如红花的花中含有的红花苷,红花苷,（八）二氢查耳酮类（Dihydrochalcones）二氢查耳酮为查耳酮,双键氢化而成。,二氢查耳酮类,二氢查耳酮在植物界分布极少，如蔷薇科梨属植物根皮和苹果种仁中含有的梨根苷。,梨根苷,（九）橙酮类 结构特点为C环为含氧五元环。母核碳原子的编号也与其他黄酮类不同。,橙酮类,此类化合物较少见，主要存在于玄参科、菊科、苦苣苔科以及单子叶植物沙草科中，如在黄花波斯菊花中含有的硫磺菊素属于此类。,硫磺菊素,（十）花色素类（Anthocyanidins） 结构特点是基本母核的C环无羰基，1位氧原子以烊盐形式存在。,花色素类,花色素在中药中多以苷的形式存在。花色素是使植物的花、果、叶、茎等呈现蓝、紫、红等颜色的色素，如矢车菊苷元、飞燕草苷元和天竺葵苷元以及它们所组成的苷最为常见。,矢车菊苷元 R1=OH R2=H飞燕草苷元 R1=R2=OH天竺葵苷元 R1=R2=H,（十一）黄烷醇类 根据C环上的3，4位存在羟基的情况分为黄烷-3-醇和黄烷-3，4-二醇。1. 黄烷-3-醇类，又称儿茶素类,黄烷三醇类,主要存在于含鞣质的木本植物中。如儿茶素为中药儿茶中的主要成分，有四个光学异构体，但在植物中主要有异构体两个，儿茶素和表儿茶素。,儿茶素,表儿茶素,2. 黄烷-3，4-二醇类 又称为无色花色素类,黄烷3，4二醇类,这类化合物在植物界中分布很广，在含鞣质的木本植物和蕨类植物中更为多见，如：无色矢车菊素。,无色矢车菊素,（十二）双黄酮类 是由二分子黄酮衍生物聚合而成的二聚物.常见的是由两个分子的芹菜素或其甲醚衍生物构成,根据其结合方式分为三类:1. 3,8”-双芹菜素型2. 8”-双芹菜素型3. 双苯醚型,（十三）其他黄酮类 双苯吡酮类又称为苯骈色原酮，母核由苯环和色原酮的2，3位骈合而成，是一种特殊类型的黄酮类化合物。 常分布在龙胆科、藤黄科、百合科植物当中，如：存在于石苇、芒果叶和知母叶中,具有止咳去痰作用的异芒果素。,异芒果素,榕碱,水飞蓟素,另外少数黄酮类化合物结构复杂,如:,天然黄酮类化合物多和糖形成苷而存在，并且由于糖的种类、数量、连接位置及连接方式不同，组成了各种各样的黄酮苷类。,组成黄酮苷的糖类主要有单糖、双糖类、三糖类和酰化糖类。 .单糖类： D-葡萄糖、D-半乳糖、D-木糖、L-鼠李糖、L-阿拉伯糖及D-葡萄糖醛酸等。,.双糖类： 槐糖（glc 12 glc）、龙胆二糖(glc 16 glc)、芸香糖(rh 16 glc)、新橙皮糖（rh 12 glc）、刺槐二糖（rh 16 gal）等。,.三糖类： 龙胆三糖(glc 16 glc 12 fru)、槐三糖(glc 12 glc 12 glc)等。.酰化糖类： 2-乙酰葡萄糖、咖啡酰基葡萄糖(caffeoylglucose)等。,第二节 理 化 性 质,一、性状 1、性状：苷元为结晶性固体，苷为无定形粉末。 2、颜色： 与交叉共轭体系及助色团（羟基、甲氧基）等的数目、类型以及位置有关。在4-或7-位引入供电子基，因形成P-共轭，具有推电子作用，促进电子转移，使化合物颜色加深。 黄酮、黄酮醇及其苷：灰黄黄色； 查尔酮：黄橙黄色； 二氢黄酮、二氢黄酮醇、黄烷醇：不显色； 异黄酮：微黄色； 花色苷及苷元：为紫色、蓝色，兰紫色。,黄酮（灰黄黄色） 二氢黄酮黄酮醇（灰黄黄色） 二氢黄酮醇查耳酮（黄橙黄色） 二氢查耳酮 二氢异黄酮 黄烷醇类 异黄酮（无或微黄色）,花色素类（颜色随pH而改变 红色（pH 8.5）,交叉共轭体系,旋光性 取决于 不对称碳原子的有无 有 无 所有黄酮苷（糖） 游离黄酮 游离黄酮 黄酮 二氢黄酮 黄酮醇 二氢黄酮醇 异黄酮 二氢异黄酮 查耳酮（二氢 ） 黄烷醇类 橙酮 花色素类等,3旋光性：,二溶解性 1、游离苷元易溶于甲、乙醇，乙酸乙酯，乙醚及稀碱液中，不溶或难溶于水。其中在水中的溶解度，花色苷二氢黄酮（醇）黄酮（醇）查耳酮. 原因：平面型分子，分子中存在着交叉共轭体系。花色苷为离子型化合物，易溶于水。,（1）分子的立体结构 平面型分子 非平面型分子 黄酮 二氢类（C-环半椅式结构） 黄酮醇 异黄酮（羰基与B-环立体障碍） 查耳酮 交叉共轭 分子间排列不紧密，水分子易于进入 水溶度小 水溶度大,黄酮类化合物的理化性质,R=OH 二氢黄酮醇,R=H 二氢黄酮,游离苷元的母核上引入羟基，水溶性增加，且与羟基数目成正比。引入甲氧基或异戊烯基后，脂溶性增加，水溶性降低。,2、黄酮苷类易溶于热水，甲醇，乙醇。难溶或不溶亲脂性有机溶剂中。,（1）三糖苷 双糖苷 单糖苷 苷元（2）3 - O - 糖苷 7 - O - 糖苷（平面性分子）（3）花色素(平面性分子,离子型) 非平面性分子 平面性分子,三酸碱性（一）酸性： 黄酮类化合物分子中具有酚羟基，故显酸性。 酸性强弱顺序：7，4-二羟基7或4-羟基一般 酚羟基5-羟基，可分别用5%碳酸氢钠、5%碳酸钠、0.2%NaOH、4%NaOH。 a、7，4-OH酸性强于其他位置羟基的酸性（处于羰基对位，羰基的共轭诱导）。 b、5-OH酸性最弱（处于羰基邻位，形成分子内氢键）。 c、酚羟基数目越多，酸性越强。,（二）碱性： 黄酮类化合物因为分子中的-吡喃酮环上的 1-氧原子，有未共用电子对，可接受质子而显弱碱性，与强酸结合生成烊盐，极不稳定，加水分解。不同的黄酮溶于浓硫酸时，常表现出特殊的颜色。,2.碱性：,-吡喃酮环1-氧原子,微弱碱性（孤对电子，接受质子）,仅溶于强的、浓酸+水 （浓硫酸）,烊 盐（呈色） 应用 初步鉴别黄酮母核类型：黄酮、黄酮醇 黄橙色，并有荧光 二氢黄酮 橙红（冷）、紫红（热） 查耳酮 橙红洋红 异黄酮（二氢） 黄色 橙酮 红洋红,四显色反应 与分子中的酚羟基及-吡喃酮环有关。 1、还原反应 （1）HCl-Mg： 方法：将样品的甲醇或乙醇液，加入少许镁粉振摇，再滴加几滴浓盐酸，泡沫处呈红色。黄酮、黄酮醇、二氢黄酮（醇）显橙红或紫红色。 B环上有-OH或取代。颜色加深。花青素及部分橙酮，查耳酮等在浓盐酸下会发生色变，故预先需对照排除。,（2）四氢硼钠反应： 样品的甲醇液，加等量2%NaBH4的甲醇液，加浓盐酸或硫酸，生成紫色或紫红色，为二氢黄酮类专属反应。,2、与金属盐类试剂的络合反应分子中具有3-羟基，4-羰基或5-羟基，4-羰基或邻二酚羟基的黄酮类化合物 （1）三氯化铝显色：定性及定量分析显鲜黄色荧光（4-OH或7，4-OH显天蓝色荧光）。 （2）锆盐-枸橼酸反应：区分3-OH或5-OH黄酮，加2%ZrOCl2/MeOH样品的甲醇液，形成黄色锆络合物，仍呈鲜黄色（3-OH），加2%枸橼酸黄色溶液显著褪去（5-OH）。,（3）醋酸镁显色：区别二氢黄酮（醇）类化合物。在纸片上滴加样品液，喷醋酸镁甲醇液，加热干燥，UV观察，二氢黄酮（醇）显天蓝色荧光，黄酮、黄酮醇异黄酮，显黄至橙黄乃至褐色。 （4）氨性氯化锶：检识具有邻二酚羟基的黄酮。氯化锶的甲醇溶液和氨气饱和的甲醇液。产生绿色至棕色乃至黑色沉淀。,3、硼酸显色：具有5-羟基黄酮和6-羟基查耳酮结构。在草酸条件下，与硼酸反应，呈黄色并有绿色荧光。枸橼酸-丙酮黄色无荧光。 4、与碱的反应：黄酮类化合物溶于碱水中显黄色、橙色或红色，化合物类型不同，显色情况不同。,显色反应总结 1还原显色反应,反应类型 鉴别特征 鉴别意义 备注,盐酸-镁粉 黄酮、二氢黄酮、 红紫红 黄酮类特征性 假阳性 反应 黄酮醇、二氢黄酮醇 红紫红 鉴别反应 （花色素） （最常用） 查耳酮、橙酮、 （-） 儿茶素类、异黄酮 （-）,四氢硼钠 二氢黄酮、二氢黄酮醇 红紫红 二氢黄酮类特有 还原反应 其它黄酮类 （-）,2.与金属盐类试剂络合反应,反应类型 鉴别特征及鉴别意义 备 注,锆盐 枸橼酸 锆盐-枸橼酸 3-OH或3，5 -二OH 黄色 黄色不褪 PPC,(ZrOCl2) 5-OH 黄色褪去 示,氨性氯化锶(SrCl2) 邻二酚羟基 绿、棕乃至黑色沉淀 三氯化铁(FeCl3) 酚羟基 紫、蓝、绿,三氯化铝 3-OH，4-C=O 黄色 （AlCl3） 5-OH，4-C=O 鲜黄色荧光 PPCTLC 邻二酚羟基 （4或7，4黄酮醇，天蓝色荧光）,3. 硼酸显色反应,硼酸 5 - 羟基，4 - 羰基黄酮 黄色，绿色荧光（草酸液）,（H3BO3） 6-羟基，4 - 羰基查耳酮 黄色，无荧光（枸橼酸）,2-羟基查耳酮在酸的作用下可转化为： c A 黄酮 B 黄酮醇 C 二氢黄酮 D 黄烷-3-醇 E 异黄酮,下列哪类物质无旋光性？a A 异黄酮 B 二氢异黄酮 C 二氢黄酮醇 D 二氢黄酮 E 黄烷醇,下列那种物质的酸性最强？aA 7，4-二羟基黄酮 B 5，4-二羟基黄酮 C 3，5-二羟基黄酮D 3，7-二羟基黄酮 E 3，4-二羟基黄酮,某中药提取液不加镁粉，只加盐酸即产生红色，则其可能含有：c A 黄酮 B 黄酮醇 C 花色素 D 二氢黄酮 E 异黄酮,比较下列四种黄酮类化合物酸性大小,A、R1R2HB、R1H, R2RhamC、R1Glc, R2HD、R1Glc, R2Rham,一提取方法 溶剂法,第三节 黄酮类化合物的提取、分离,溶剂法关键: 溶剂的选择 溶剂选择依据: 黄酮类成分的存在状态 （游离、苷）及溶解性,提取方法选择依据: 溶剂的溶解性能 （煎煮法、渗漉法、回流法等）,溶剂 提取原理 游离黄酮 黄酮苷 备 注,乙醇 溶解范围广 + + （甲醇） 苷、苷元均可溶 （9095%） ( 60%） 甲醇毒性大,沸水 多糖苷易于水 + 成本低、安全,水溶性杂质多,碱性水或 稀氢氧化钠溶出能力强,碱性乙醇 酚羟基的酸性 + + 石灰水除杂质效果好,黄酮类化合物的提取,二.分离方法,（一）溶剂萃取法 黄酮与杂质 分离依据：成分之间 苷与苷元 之间的极性（分配系数K）差异 苷元与苷元 分离工艺： 原料的提取浓缩液（水溶液）,依次以石油醚、乙醚、乙酸乙酯、水饱和正丁醇萃取,石油醚液 乙醚液 乙酸乙酯 水饱和正丁醇 母液,（脂溶性杂质） 回收 回收 减压回收 （水溶性杂质) 苷元 单糖苷 多糖苷,（二）pH梯度萃取法 分离依据：游离黄酮类化合物的酸性差异 分离工艺：总游离黄酮的乙醚液,依次以5%NaHCO3 、5%Na2CO3、0.2 % NaOH、 4% NaOH萃取,5%NaHCO3液 5%Na2CO3液 0.2 % NaOH液 4% NaOH液 母液,酸化 （脂溶性杂质）,7，4-OH黄酮 7或4-OH黄酮 一般-OH黄酮 5-OH黄酮,（三）柱色谱法,吸附原理 异黄酮、二氢黄酮（醇）、 氯仿-甲醇不同比例（105，活化） 高度甲基化或乙酰化黄酮（醇） 混合溶剂洗脱 （极性小）,分配原理 多羟基黄酮醇或黄酮苷类 氯仿-甲醇-水,（加水失活或不活化） （极性大） （80 ：20 ：1）等比例,1硅胶柱色谱,2氧化铝柱色谱（少） 具有3-OH或5-OH 、4-羰基及邻二酚羟基黄酮类化合物与铝离子络和而被牢固吸附，难于洗脱。,2聚酰胺色谱,吸附规律：与黄酮类化合物酚羟基的数目、位置及介质有关。（1）酚羟基数目越多，吸附能力越强。（2）酚羟基数目相同的情况下，酚羟基所处的位置有利于形成分子内氢键，吸附能力减弱。 3-OH或5-OH黄酮的吸附力小于其他位置-OH黄酮； 邻二酚羟基黄酮的吸附力弱于间位或对位酚羟基黄酮（3）分子内芳香化程度越高，吸附力越强。 查耳酮 二氢黄酮 黄酮醇 黄酮 二氢黄酮醇 异黄酮（4）与介质的关系：吸附力 水（中） 甲醇、乙醇（浓度 由低到高） 碱性溶剂,（氢键吸附）,洗脱规律：与吸附规律正好相反，即吸附能力越强，越难洗脱,聚酰胺“双重色谱”原理,正相色谱 反相色谱,聚酰胺：极性固定相（极性酰胺基团） 非极性固定相（非极性脂肪链）洗脱剂：有机溶剂（氯仿-甲醇，极性小） 含水溶剂（甲醇-水，极性大） 先洗脱：游离黄酮（苷元，极性小） 苷（极性大）（柱色谱分离） Rf值： 苷元 苷 苷元 双糖苷 单糖苷 苷元 1-OH 2-OH 3-OH 4-OH 5- OH黄酮,4 . 葡聚糖凝胶柱色谱,“双重色谱”原理,常用洗脱剂： 碱水（0.1mol / L NH3.H2O） 盐水（0.5mol / L NaCl） 醇或醇水不同比例。,应用：适用于各种黄酮类化合物的分离 原理：反相柱色谱（黄酮类化合物极性大） 固定相：ODS 流动相：水-乙晴，水与甲醇不同比例,6高效液相色谱法（HPLC）,第四节黄酮类化合物的检识,一理化检识 1.颜色：多呈黄色 2.母核检识：盐酸-镁粉反应-黄酮、黄酮醇、二氢黄酮 二氢黄酮醇（+） 四氢硼钠反应-二氢黄酮（醇）类（+） 五氯化锑-查耳酮类（+） 3.取代基团检识：锆盐-枸橼酸反应-3-OH（+） 5-OH（-） 黄酮鉴别 氨性氯化锶反应-邻二酚羟基（+）二.色谱检识 （一）纸色谱（PPC） 原理：分配原理 适用范围：游离黄酮（苷元）及黄酮苷的分离鉴别,双相色谱,第I向 醇性展开剂 第II向 水性展开剂（BAW、TBA、水饱和正丁醇） （28%HAc、3%NaCl、1%HCl）,正相色谱 反相色谱固定相（水）极性 流动相 （ *有认为是吸附原理）？,Rf规律：极性小的化合物Rf大 极性大的化合物Rf大,苷元（0.7以上） 单糖苷 双糖苷（0.7以下） 苷元中，平面型分子 非平面型分子 Rf规律与左边相反 母核相同，2-OH 3-OH 4-OH 5- OH黄酮,苷元的分离鉴别 黄酮苷及花色素类,PPC色谱,1硅胶薄层色谱 极性较小的黄酮类化合物（黄酮苷元）2聚酰胺薄层色谱 可用于黄酮苷及游离黄酮的分离 鉴别，其色谱行为可参考聚酰胺柱色谱。3纤维素薄层色谱分配原理，其色谱行为可参考纸色谱。,（二）薄层色谱（TLC）,各种色谱的检识： 日光下观察多数黄酮有黄色斑点 紫外光下观察多数黄酮呈黄绿色荧光斑点 氨蒸气熏多数黄酮有颜色变化 喷显色剂（2%AlCl3甲醇液）多数黄酮黄色变深，荧光加强,第五节 黄酮类化合物的结构研究,一. 紫外可见光谱在黄酮类化合物结构测定中的应用 一般鉴定程序： 1、先测定在甲醇中的光谱。 2、再测定在加入各种诊断试剂后的紫外光谱。 3、如为苷类，则可水解或甲基化后再水解，并测定苷元或其衍生物的紫外光谱。 4、将以上各种光谱数据（或光谱图）进行对比分析，即可获得有关结构信息。,黄酮（醇）： 带 II、带I均强母核光谱特征 二氢黄酮类、异黄酮类：带 II强、 带I弱 母核的推断 （甲醇） 查耳酮、橙酮：带 II弱、带I强,取代基：OH等，为助色团 依红移规律推断取代基团,甲醇钠：强碱，所有酚羟基解离 醋酸钠：碱性弱，酸性强的酚羟基解离 加入诊断试剂 醋酸钠/硼酸：邻二酚羟基络和 相应吸收峰红移,三氯化铝：3-OH，4-羰基 5-OH，4-羰基 络和 邻二酚羟基,黄酮类化合物在甲醇中紫外光谱特征,苯甲酰系统 桂皮酰系统（带II 220280nm） （带1 300400nm） 黄酮类化合物结构中的交叉共轭体系,二氢黄酮（醇） 异黄酮（二氢） （由B环产生的桂皮酰系统不存在，带I弱，带II强）,黄酮类化合物在甲醇中紫外光谱特征,黄酮类化合物母核UV吸收特征,母核类型 带II （nm） 带I （nm） 备注黄酮 250280（强） 304350（强） 典型的交叉共轭系统黄酮醇（3-OH取代） 328357（强） 3-OH供电减弱，使黄酮黄酮醇（3-OH游离） 358385（强） 3-OH供电共轭，带1红移,异黄酮 245278（强） ( sh ) 桂皮酰系统破坏 二氢黄酮（醇） 270295（强） ( sh )查耳酮 220270（弱） 340390（强）橙酮 230270（弱） 370430（强） 花青素（苷） 270280 465560（可见区）,（2）取代基团对共轭吸收的影响,黄酮类核中引入-OH（酚羟基）等供电基团，使共轭程度增强，相应的吸收峰红移。 一般，A环引入 OH，带II红移，B环引入 OH带I红移。羟基甲基化或苷化后，原酚羟基的供电能力下降，引起相应的吸收峰紫移。 3-OH甲基化或苷化，带I紫移， 5-OH（与羰基形成分子内氢键）甲基化，带I、带II均紫移515nm， 4-OH甲基化，带I紫移310nm。羟基乙酰化后，乙酰基的吸电作用，使原来酚羟基对共轭系统的供电能力消失，对光谱的影响亦将完全消失。,黄酮 、黄酮醇加入诊断试剂后吸收峰（带I、带II）的位移规律诊断试剂 位移规律 归 属,NaOMe 带I红移4060nm，强度不降 示有4-OH 带I红移5060 nm，强度下降 示有3-OH、但无4-OH,NaOAc 带II红移520nm 示有7-OH,2.加入诊断试剂后引起的位移及其在结构测定中的意义,NaOAc / H3BO3 带I红移1230nm 示B环有邻二酚羟基 带II红移510nm 示A环有邻二酚羟基 （不包括5，6-邻二酚羟基）,诊断试剂 位移规律 归 属,AlCl3 及AlCl3/HCl AlCl3/HCl谱图 = AlCl3谱图 示无邻二酚羟基 AlCl3/HCl谱图 AlCl3谱图 示有邻二酚羟基 AlCl3/HCl谱较AlCl3谱 带I紫移3040 nm 示B环有邻二酚羟基 若紫移20 nm 示B环有邻三酚羟基 带I紫移5065 nm 示A、B环均可能有邻二酚羟基 AlCl3/HCl谱图 = MeOH谱图 示无3-及/或5-OH无邻二酚羟基 AlCl3/HCl谱图 MeOH谱图 示可能有3-及/或5-OH 带I红移3555 nm 示只有5-OH 无3-OH 仅红移1720 nm 示除5-OH外，尚有6-含氧取代 红移5060nm 示可能有3-OH及5-OH,异黄酮、二氢黄酮（醇）的吸收峰（带II）位移规律,NaOAc 异黄酮 带II红移620nm 示有7-OH 二氢黄酮（醇） 带II红移3437nm 示有5，7-二OH 带II红移5158nm 示有7-二OH,AlCl3/HCl AlCl3/HCl谱图与甲醇中的谱图比较 异黄酮 带II红移1014nm 示有5-OH 二氢黄酮（醇） 带II红移2026nm 示有5-OH,诊断试剂 位移规律 归 属,查耳酮、橙酮的吸收峰（ 带I ）位移规律,NaOMe 查耳酮 带I红移60100nm，强度增加 示有4-OH 带I红移60100nm，强度不增加 示有2-或4-OH 橙酮 带I红移7095nm， 示有或6-OH,AlCl3 及AlCl3/HCl 查耳酮、橙酮 （ AlCl3较 AlCl3/HCl谱图） 带I 红移4070nm 示有B-环邻二酚羟基 查耳酮（ AlCl3/HCl谱图较MeOH谱图） 带I 红移4060nm 示有2- OH,诊断试剂 位移规律 归 属,用UV法鉴定黄酮类化合物的结构中有无7-羟基，采用的诊断试剂是：b A 甲醇 B 醋酸钠 C 硼酸 D 三氯化铝 E 三氯化铝/盐酸,聚酰胺对黄酮类化合物发生最强吸附作用时, 应在( A )中。 A、水 B、95%乙醇 C、15%乙醇 D、酸水 E、甲酰胺 2黄酮类化合物的紫外光谱, MeOH中加入NaOMe诊断试剂峰带I向红移动4060nm, 强度不变或增强说明( C )。 A、无4OH B、有3OH C、有4OH, 无3OH D、有4OH和3OH3聚酰胺色谱的原理是( B )。 A、分配 B、氢键缔合 C、分子筛 D、离子交换,二1H-NMR谱在黄酮结构研究中的应用,测定溶剂 ： CCl4 - 样品需制备成三甲基硅醚化衍生物，不能显示羟基质子特征，目前已基本不被采用。 DMSO-d6 - 样品（苷、苷元）不需制备成衍生物，可以显示各酚羟基质子特征。,A 环质子 B环质子 C环质子 糖上质子 取代基团质子,芳环质子 芳环质子 与类型有关 端基质子 -OH、-CH3、 其它质子 -OCH3、,-OCOCH3,黄酮类化合物各质子的信号特征（、峰形状、J、峰面积）,6 8ppm，B-H位于较低场5-H最大8.0ppm（羰基去屏蔽）A-H 5.77.9 5-OH 12.40 (12.99) B-H 6.5 7.9,7-OH 10.93,1H-NMR谱在黄酮结构研究中的应用,J邻 6