高中生物 DNA和蛋白质技术 5.1 DNA的粗提取与鉴定课件1 新人教版选修1.ppt

dna粗提取与鉴定 1 dna分子由两条链组成 这两条链按反向平行的方式盘旋成双螺旋结构 2 dna分子中的磷酸和脱氧核糖交替连接 排列在外侧 构成基本骨架 碱基排列在内侧 3 dna分子两条链上的碱基通过氢键连接成碱基对 原则 根据dna在nacl溶液中的溶解度曲线图 思考在什么浓度下 dna的溶解度最小 dna在nacl溶液中的溶解度是如何变化的 dna在nacl溶液中的溶解度曲线图 在nacl溶液浓度低于0 14mol l时 dna的溶解度随nacl溶液浓度的增加而逐渐降低 在0 14mol l时 dna溶解度最小 当nacl溶液浓度继续增加时 dna的溶解度又逐渐增大 如何通过控制nacl溶液的浓度使dna在盐溶液中溶解或析出 当氯化钠的物质的量浓度为2mol l时 dna的溶解度较大 浓度为0 14mol l时 dna的溶解度最低 利用这一原理 可以使dna在盐溶液中溶解或析出 2 dna对酶 高温 洗涤剂的耐受性3 dna遇二苯胺 沸水浴 会变成蓝色 因此 二苯胺可以作为鉴定dna的试剂 1 dna不溶于酒精溶液 但细胞中的某些蛋白质则可以溶于酒精 利用这一原理 可以提取出含杂质较少的dna 实验过程 二 dna的释放 一 材料的选定 三 dna与蛋白质等分离 四 dna的析出 获取 鉴定 一 材料的选定 1 dna含量是否较高 2 材料是否好取材 3 是否容易提取dna 植 动 为什么不用哺乳动物的红细胞 1 怎样使鸡血细胞破裂 原理是什么 2 如果实验材料是植物细胞又该如何处理 3 加洗涤剂和食盐的作用是什么 4 提取洋葱dna时 在切碎的洋葱中加入一定的洗涤剂和食盐 进行充分的搅拌和研磨 如果研磨不充分 会对实验结果产生怎样的影响 二 dna的释放 1 获得的滤液中可能含有哪些细胞成分 2 为了纯化提取的dna需要将滤液作怎样的进一步处理 3 为什么反复地溶解与析出dna 能够去除杂质 4 方案二和方案三的原理有什么不同 三 dna与蛋白质等物质分离 2 如何鉴定dna分子 还可以用什么物质来鉴定 1 纯的dna应该是什么颜色 四 dna的析出 鉴定 1 制鸡血细胞液 活鸡鲜血经分离或沉淀获得 玻棒搅拌 离心 分离或静置沉淀 除去血液中的上清液 即血浆 2 提取dna 取血细胞5 10ml 20ml蒸馏水 用玻棒沿一个方向快速搅拌 纱布过滤 滤液中含dna和其他核物质 如蛋白质 提取血细胞核物质 溶解核内的dna 滤液 2mol l的nacl溶液40ml 玻棒沿一个方向轻缓搅拌 实验步骤 析出含dna的粘稠物 滤取含dna的粘稠物 dna粘稠物的再溶解 在上述溶液中缓缓加入蒸馏水 并沿一个方向轻轻搅拌 出现丝状物 当丝状物不在增加时 停止加水 此时nacl溶液的浓度相当于0 14mol l 用多层纱布过滤 含dna的粘稠物留在纱布上 在20ml烧杯中轻缓搅拌3min 使尽可能多的dna溶解在nacl溶液 过滤含有dna的nacl溶液 用放有两层纱布的漏斗过滤步骤 所得的溶液 滤液中含有dna 提取含有杂质较少的dna 步骤 所得的滤液 体积分数为95 的冷却酒精50ml 用玻棒沿一个方向轻缓搅拌 溶液中 析出 出现乳白色丝状物 用玻棒将丝状物卷起 并用滤纸吸取上面的水分 3 dna的鉴定 加入二苯胺试剂4ml 用玻棒搅拌使dna溶解 沸水浴5min 观察溶液是否出现蓝色 1 共有 三次过滤 两次析出 七次搅拌 2 加入 两次蒸馏水 三次nacl溶液 一次酒精 三 实验小结 加入柠檬酸钠溶液的目的是防止血凝固 加速血细胞破裂 溶解dna 使2mol l的nacl溶液稀释至0 14mol l使得dna最大限度地释出 使含dna的黏稠物被留在纱布上 使含dna的黏稠物尽可能多的溶解于溶液中 除去含dna的滤液中的杂质 提取dna a出现蓝色b无变化 2 实验中nacl的物质的量浓度为2mol l和0 14mol l对dna有何影响 1 在dna的粗提取实验过程中 两次向烧杯中加入蒸馏水的作用是 a 稀释血液 冲洗样品b 使血细胞破裂 降低nacl浓度使dna析出c 使血细胞破裂 增大dna溶解量d 使血细胞破裂 提取含杂质较少的dna 答 b 答 前者是溶解dna 后者是使dna析出 3 dna遇二苯胺 沸水浴 会染成 a 砖红色b 橘黄色c 紫色d 蓝色 4 提取鸡血中的dna时 为什么要除去血液中的上清液 答 dna的提取 关键是对杂质的去除 由于上清液是血液中的血浆部分 不含dna 所以要除去上清液 含有蛋白质 答 d 5 关于dna粗提取与鉴定实验的有关说法正确的是a 充分溶解dna的