肠道杆菌(1)PPT专业课件.ppt

1,肠杆菌科,2,本章重点及难点,掌握致病性大肠埃希菌及其所致疾病掌握志贺菌属与沙门菌属的致病性掌握志贺菌属与沙门菌属微生物学检查步骤熟悉肠杆菌科的共同特性了解大肠埃希菌的微生物学检查及防治原则、志贺菌和沙门菌的防治原则、沙门菌分类、其他肠道细菌,3,肠杆菌科细菌,是一大群生物学性状相似的革兰阴性杆菌，常寄居在人和动物的肠道内，亦存在于土壤、水和腐物中。目前已有44个属，170多个种。引起人类感染的并不多。,4,与医学的关系：,致病菌：有少数细菌总是引起人类疾病，如伤寒沙门菌、志贺菌、鼠疫耶尔森菌等；机会致病菌：一部分细菌属于正常菌群，但当宿主免疫力降低或细菌移位至肠道以外部位时，即可引起机会性感染，如大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、奇异变形杆菌等；,5,由正常菌群转变而来的致病菌：由于获得位于质粒、噬菌体或毒力岛上的毒力因子基因后而成为致病菌，如引起胃肠炎的大肠埃希菌。,6,肠杆菌科细菌共同生物学特性：,形态与结构中等大小G-杆菌。大多有菌毛，多数有周鞭毛，少数有荚膜，不产生芽胞。培养兼性厌氧或需氧。,7,生化反应活泼，可发酵多种糖类乳糖发酵试验有重要鉴别意义,肠道致病菌与非致病菌鉴定中重要的生化反应,乳糖发酵试验,肠道非致病菌（埃希菌）发酵乳糖,（志贺菌、沙门菌等）不发酵乳糖,8,抗原结构菌体抗原（O）:LPS最外层的特异性多糖，刺激机体产生IgM抗体。鞭毛抗原（H）：鞭毛抗原，IgG抗体。荚膜抗原（K或Vi抗原）。,9,10,抵抗力不强胆盐、煌绿等染料对肠道非致病菌有选择抑制作用，藉以制备选择培养基来分离有关病原菌。,11,变异易变异,耐药性变异毒性变异生化反应变异,接合、转导、溶源性转换等,12,第一节埃希菌属Escherichia,大肠埃希菌最为重要肠道内正常菌群引起肠道外感染少数致病性血清型引起人类胃肠炎卫生监测指标,13,生物学性状,G-杆菌，多数菌株有周身鞭毛，有菌毛，无芽胞兼性厌氧生化反应有O、H和K三种抗原能产生大肠菌素（colicine）,葡乳麦甘蔗尿素酶H2SIMViC动力+-+-+,14,SS培养基,15,致病性与免疫性,致病物质黏附素定植因子抗原（CFA）、集聚黏附菌毛（AAF）、束形成菌毛（bundleformingpili,Bfp）、紧密黏附素（intimin）、P菌毛、Dr菌毛、I型菌毛和侵袭质粒抗原（invasionplasmidantigen,Ipa）蛋白等。外毒素志贺毒素（Stx）、耐热肠毒素（ST）、不耐热肠毒素（LT）；内毒素、荚膜、载铁蛋白和III型分泌系统（typeIIIsecretionsystems）,16,所致疾病肠道外感染败血症、新生儿脑膜炎、泌尿道感染最常见由尿路致病性大肠埃希菌（UPEC）引起。胃肠炎某些血清型可引起人类胃肠炎，与食入污染的食品和饮水有关。,17,引起胃肠炎的大肠埃希菌,18,肠产毒性大肠埃希菌EnterotoxigenicE.coliETEC,旅游者腹泻、婴幼儿腹泻致病物质enterotoxin肠毒素不耐热肠毒素heatlabileenterotoxin(LT)耐热肠毒素heatstableenterotoxin(ST)thecolonizationfactor定植因子(菌毛）,19,不耐热肠毒素（LT）：分LT-I和LT-两型蛋白质，对热不稳定，与霍乱肠毒素相似。A亚单位毒素活性成分机制B亚单位与肠上皮细胞受体（GM1神经节苷脂）结合A进入细胞内激活腺苷酸环化酶耐热肠毒素（ST）：分STa、STb两型，对热稳定。机制为激活细胞鸟苷酸环化酶，使cGMP导致腹泻。,ATPCAMP,肠腔积液、腹泻,20,肠侵袭性大肠埃希菌EnteroinvasiveE.coliEIEC,侵犯较大儿童和成人发热，腹痛，有脓血便，似菌痢样致病机制：侵袭并破坏结肠黏膜上皮,21,肠致病性大肠埃希菌EnteropathogenicE.coliEPEC,婴幼儿腹泻致病机制黏附到小肠上皮细胞，破坏刷状缘，导致邻近微绒毛破坏，A/E组织病理损伤，引起严重水样腹泻。过程：BfP(bundleformingpili)介导细菌与细胞疏松黏附，细菌主动分泌的紧密素与宿主细胞膜上相应受体紧密结合，细胞内肌动蛋白重排，微绒毛破坏，干扰肠道对液体的吸收功能。,22,肠出血性大肠埃希菌EnterohemorrhagicE.coliEHEC,主要血清型：O157:H7所致疾病可逾万人流行轻度水泻伴剧烈腹痛的血便出血性结肠炎溶血性尿毒综合症死亡率：3%5%致病物质志贺毒素(Stx-IandStx-II).,23,出血性肠炎（HC）的典型临床表现为：鲜血样便、腹部痉挛性疼痛、低烧或不发烧。患者可表现为先水样腹泻，约数小时至1天后转为血性腹泻。溶血性尿毒综合症（HUS）主要发生在儿童，常出现在腹泻后数天或1-2周后，病例主要表现为血小板减少、溶血性贫血、急性肾功能衰竭三大特征。大多数HUS发生在急性腹泻之后，儿童和老人易感。病死率一般在10%，个别可高达50%。,临床表现,24,肠集聚型大肠埃希菌EnteroaggregativeE.coliEAEC,婴儿、旅行者持续性水样腹泻致病机制黏附肠细胞表面聚集，形成砖状排列。导致微绒毛变短，单核细胞浸润和出血产生肠毒素,25,（一）标本肠外感染：采取中段尿、血液、脓液、脑脊液等；胃肠炎：取粪便。,三、微生物学检查法,（三）卫生细菌学检查大肠菌群数,（二）分离培养与鉴定,（1）肠外感染。涂片染色检查：革兰染色阴性短杆菌。分离培养：标本血琼脂平板菌落特征鉴定IMViC（+-）试验和系列生化反应血液肉汤增菌离心沉淀物体液尿路感染尚需记数菌落量，每毫升10万才有诊断价值。（2）肠内感染粪便鉴别培养基可疑菌落鉴定为大肠杆菌后肠毒素、毒力因子和血清型方法：ELISA、核酸杂交、PCR,我国卫生标准规定，大肠菌群在每升饮水中不得超过3个；每100ml瓶装汽水、果汁中不得超过5个。,26,预防疫苗正在研制中加强水和食品、环境的卫生细菌学监测，注意饮食卫生进行诊疗技术时应严格无菌操作，减少医院感染隔离治疗腹泻病人，切断传染源治疗耐药性菌株普遍（一种或多种抗生素）抗生素治疗应在药物敏感试验的指导下进行,四、防治原则,27,第二节志贺菌属Shigella,引起细菌性痢疾俗称痢疾杆菌,28,1、形态结构G短小杆菌、有菌毛,无鞭毛2、培养特性营养要求不高S.S等选择培养基上，呈无色半透明菌落,生物学性状,3、生化反应分解葡萄糖，产酸不产气。除宋内志贺菌个别菌株迟缓发酵乳糖（一般需34天）外，均不分解乳糖动力阴性，硫化氢阴性。,29,4.抗原与分类O抗原与K抗原,我国以福氏、宋内流行多见,30,抵抗力低于其他肠道杆菌，对酸敏感多重耐药问题严重,31,菌毛,穿入回肠未端、结肠黏膜上皮细胞,黏膜固有层上皮细胞内增殖、炎症,型分泌系统,M细胞,Ipa,黏附,诱导内吞,致病性与免疫性,致病物质侵袭力,32,内毒素,脓血粘液便,刺激肠壁植物神经功能紊乱,破坏局部黏膜,加重坏死及溃疡形成,腹痛、里急后重等,典型痢疾症状,全身表现：内毒素血症、发烧、神志障碍、严重者中毒性休克,内毒素志贺菌致病的主要因素,肠黏膜通透性内毒素吸收,33,外毒素（A群、型）志贺毒素ST(VT)结构与功能：1个A亚单位进入细胞后，阻断蛋白质合成。5个B亚单位与宿主细胞糖脂受体结合，介导A亚单位入细胞A亚单位裂解60S核糖体亚单位的28SrRNA，阻止其与氨酰tRNA的结合，致使蛋白质合成中断。毒素作用的基本表现：上皮细胞损伤小部分病人可表现为肾小球内皮细胞损伤，导致溶血性尿毒综合征(HUS),34,细菌核糖体真核细胞核糖体,35,所致疾病细菌性痢疾传染源：患者和带菌者感染剂量：103个，最低10个传播方式：粪-口途径特点：感染限于肠道，细菌不入血,36,细菌性痢疾,急性典型发热、腹痛、水样便而后发展为脓血粘液便、里急后重、下腹部疼痛非典型易误诊，导致带菌和慢性中毒性痢疾小儿，无消化道症状而是全身中毒症状慢性反复发作，病程2个月带菌者细菌长期存在于结肠，重要传染源,20%,37,1、粘膜局部抗感染免疫主要是消化道粘膜表面的分泌型IgA（sIgA）；2、病后免疫期短暂，也不巩固。原因：细菌仅侵入肠壁组织，不入血菌属内型别多3、感染恢复后，血清中可产生循环抗体，但无保护作用。,免疫性,38,及时送检/暂用30%甘油缓冲盐水保存,SS平板（无色透明小菌落）,血清学试验（玻片凝集）,最后诊断,分离培养,新鲜脓血便/肛拭,双糖培养基（生化反应）,快速诊断,微生物学检查法,39,预防控制传染源，切断传播途径研制减毒活疫苗：如依链株治疗抗生素易引起耐药性，应联合用药,防治原则,40,第三节沙门菌属Salmonella,一大群人与动物肠道中的寄生菌两个种：肠道沙门菌、邦戈沙门菌菌群菌型甚多，仅少数对人致病，且多为人畜共患病,41,对人致病的血清型伤寒沙门菌、甲型副伤寒沙门菌、肖氏沙门菌、希氏沙门菌引起肠热症（伤寒或副伤寒）人畜共患病的血清型鼠伤寒沙门菌、猪霍乱沙门菌、肠炎沙门菌等可引起人类食物中毒或败血症,42,生物学性状,G-杆菌，有鞭毛，有菌毛，无芽胞，无荚膜生化反应,葡乳尿素酶H2SIMViC动力-+/-+-+（伤寒沙门菌除外）,43,主要沙门菌的生化特性,44,抗原构造菌体抗原（O抗原）：由数个成分组成不同型别之间常有交叉，特异性较差鞭毛抗原（H抗原）：有第相和第相第相特异性强Vi抗原伤寒、希氏沙门菌的表面抗原，与毒力有关抗原性弱，刺激机体产生短暂低效价抗体伴随活菌一起存在，故可用于检出带菌者,45,3、抗原构造主要有O和H两种抗原，少数菌中尚有Vi抗原。,常见的沙门菌的抗原组成,沙门菌对理化因素的抵抗力较差。在自然界中抵抗力较强，耐低温，在水面中可存活1-3周，在冰中可存活1-2月但对胆盐、煌绿的耐受性较强,46,（一）致病物质1、侵袭力有毒株能侵袭小肠粘膜致病作用：（1）耐酸应答基因抗酸性保护作用：（胃和吞噬体的酸性环境生存）（2）种特异性菌毛黏附、侵入M细胞内生长繁殖（3）SPI-I（沙门菌致病性岛）分泌侵袭蛋白：细菌内吞，细菌扩散并进入毗邻细胞淋巴组织。（4）Vi抗原：抗吞噬、抗有害物质破坏菌体2、内毒素3、肠毒素如鼠伤寒沙门菌可产生肠毒素，致胃肠炎。,二、致病性与免疫性,47,肠热症,伤寒沙门菌S.typhi,甲型副伤寒沙门菌S.paratyphiA,肖氏沙门菌S.schottmuelleri,希氏沙门菌S.hirschfeldii,小肠上部黏膜,肠系膜淋巴结,血液,血液,第一次菌血症,第二次菌血症,胸导管,持续高热相对缓脉肝脾肿大玫瑰疹白细胞减少,尿,肠道,粪,肠壁淋巴组织,肠出血肠穿孔,死亡主要原因,48,胃肠炎（食物中毒）,鼠伤寒沙门菌猪霍乱沙门菌肠炎沙门菌,大于108,食物中毒（发热、恶心、呕吐、腹痛、水样泻）,败血症：,希氏沙门菌鼠伤寒沙门菌猪霍乱沙门菌肠炎沙门菌,血,败血症（高热、寒战、厌食、贫血）,脑膜炎、骨髓炎、胆囊炎、心内膜炎,最常见,49,无症状带菌者,约1%5%伤寒或副伤寒患者，症状消失1年后，粪便仍可排菌，这些菌主要留在胆囊中，有传染性。,50,51,免疫性病后获得牢固免疫性，特异性细胞免疫是主要防御机制。胃肠炎的恢复与肠道局部生成sIgA有关。,52,微生物学检查法,标本肠热症：第1周血液第2周粪便第3周尿液第13周骨髓液胃肠炎：剩余食物和粪便败血症：血液带菌者：十二指肠引流液,53,血清学诊断肥达试验（Widaltest）用已知伤寒沙门菌O、H抗原，以及引起副伤寒的甲型副伤寒沙门菌、肖氏沙门菌和希氏沙门菌H抗原的诊断菌液与受检血清作定量凝集试验，测定受检血清中有无相应抗体及其效价的试验。,54,肥达试验的结果判断考虑正常人群抗体水平动态观察：恢复期效价增加4倍诊断意义O高H高肠热症可能性大O低H低排除O高H低早期或有交叉反应的其它沙门菌感染O低H高预防接种或曾患病,55,Ag测Ab已知未知滴度,Ag加样方向,1.稀释Ab,2.加Ag3.35孵育304.结果观察,病人1：10血清0.8ml,生理盐水0.8ml,吸管吹打3次混匀,血清1：201.6ml,生理盐水0.8ml,0.2ml4第一列小孔0.8ml,血清1：801.6ml,血清1：401.6ml,0.2ml4第二列小孔0.8ml,生理盐水0.8ml,56,57,Exampleofwidaltest,58,伤寒带菌者的检出最可靠的诊断方法是分离出病原菌。分离的标本来自可疑带菌者的粪便、胆汁或尿液，但通常分离检出率不高。因此，一般是先用血清学方法检测可疑者Vi抗体进行筛选，若效价1：10时，再反复取粪便等标本进行分离培养，以确定是否为伤寒带菌者。,三、微生物学检查法,59,预防水源和食品的管理发现、确诊、治疗带菌者带菌者带菌期间严禁从事餐饮业伤寒Vi荚膜多糖疫苗治疗环丙沙星,防治原则,60,克雷伯菌属肺炎克雷伯菌医院感染的重要细菌以肺炎最常见。可引起尿路感染、创伤感染及腹泻等，有时导致严重的败血症、脑膜炎、腹膜炎等,其他菌属,61,变形杆菌属条件致病菌，可引起泌尿道感染，食物中毒多形性有周鞭毛迁徙生长现象具有尿素酶与立克次体有共同抗原：外斐试验某些菌株与立克次体有共同抗原成分，因此临床上常用变形杆菌OX19、OX2、OXk代替立克次体抗原与斑疹伤寒或恙虫病患者血清作凝集试验（外斐试验），协诊立克次体病。,62,变形杆菌在血琼脂平板上的菌落,63,思考题,1.解释：肥达反应（WidalReaction）、外斐反应（WeilFelixreaction）2.简述引起肠道感染的大肠埃希菌的种类及其致病特点。3.大肠埃希菌最常见的肠道外感染有哪些？4.肠道杆菌的共同特点是什么？5.试述志贺菌属包括哪些细菌？引起什么疾病？主要的致病物质有哪些？我国常见的是哪种？6.如何采集细菌性痢疾病人粪便标本？7.急性菌痢的典型症状有哪些？解释其形成机制8.人类沙门菌感染有哪些？各由哪些沙门菌引起？解释其发生机制。临床最常见的是哪种？9.肠热症诊断标本采集的