la2r在特发性膜性肾病诊断中的作用.pptx

抗PLA2R抗体 在原发性肾小球肾炎的诊断作用,原发性肾小球肾炎简介 流行病学 致病机制 诊断方法 血清学检测指标：抗PLA2R抗体,主要内容,膜性肾小球肾炎 分类,原发性MN,抗PLA2R抗体,特发性（查无自身抗体或已知的继发病因）,继发性MN（可参见KDIGO列表）,病原体感染（例如HBV、HCV、梅毒和疟疾）,自身免疫性疾病（例如类风湿性关节炎、干燥综合征和类天疱疮）,癌症,其他疾病（例如镰状细胞贫血、格林-巴利综合征）,药物诱导（例如非甾体类抗炎药，黄金，水银和青霉胺）,原发性膜性肾小球肾炎（primary membranous glomerulonephritis; pMGN），也被称为特发性膜性肾病（idiopathic membranous nephropathy; IMN） 是最常见的以肾病综合征（nephritic syndrome；NS）为特点的肾脏疾病。 可见于几乎所有的种族和性别，更易出现在40岁以上的男性和白种人患者。,疾病介绍,pMGN是原发性膜性肾病，与继发性膜性肾病不同。 继发性膜性肾病是一种感染、药物治疗、滥用、吸毒、胶原病或其他自身免疫病以及肿瘤的继发病（并发症），并可随着潜在疾病的治疗而改善。 pMGN是作为一种独立疾病治疗的，尤其是对伴有肾病综合征和高渗性的pMGN。,疾病介绍,约80%的pMGN患者具有肾病综合征； 有时胳膊和眼皮出现严重水肿，体重减轻，排尿减少； 约20%的pMGN患者具有蛋白尿，但是无其他任何症状。尿沉渣检查常见脂肪粒、滴、管； 约50% pMGN患者具有显微镜血尿，蛋白尿与糖尿； 约70% pMGN患者在发病初期血压与肾功能正常。,pMGN的临床表现,肾病综合征：由多种病因引起，以肾小球基底膜通透性增加为特征，表现为大量蛋白尿、低蛋白血症、高度水肿、高脂血症的一组临床症候群。,流行病学,国内pMGN发病率约占原发性肾小球疾病的9.9%13.5%，居IgA肾病、系膜增生性肾小球肾炎之后，列第三位。 pMGN患者随着蛋白尿的增加肾衰竭发病率及死亡率风险也在不断升高，这种长期风险尤其与血栓和心血管并发症相关。,致病机制,自身免疫反应导致肾小球免疫球蛋白和补体复合物沉积，导致这种反应的抗原主要为M型磷脂酶A2受体（M-type phospholipase A2 receptor, PLA2R），是在成年特发性膜性肾病患者中发现的第一个抗原。,pMGN临床诊断的困惑,如何辨别原发还是继发？ 如何进行鉴别诊断？,SLE相关肾炎 乙肝相关肾炎 非膜性肾小球肾炎 紫癜性肾小球肾炎 ,诊断方法,诊断: 肾穿刺 组织学检查 肾脏组织电镜检测 新方法学: 血清学检测 (anti-PLA2R) 血清学检测特点： 减轻病人痛苦 节约时间和成本 可定量化,Anti-PLA2R 阳性,pMGN诊断,诊断方法,诊断方法,肾脏穿刺活检是诊断金标准，但也是高风险的创伤性检查手段！,活检确定为膜性肾病,pMN,sMN,排查继发病因,询问病史 体格检查 实验室检测：血清学、影像学 肾脏活检：光镜、免疫荧光、电镜,-,+,激素+烷化剂治疗,治疗原发疾病,治疗方案不同,KDIGO Clinical Practice Guideline for Glomerulonephritis. 2012. ,pMN诊断主要依赖“排除法诊断(exclusion of diagnosis)”,PLA2R结构模式图： N-terminal cysteinerich domain (CysR)， fibronectin type II domain (FNII), 8个 CTLDs, 一个跨膜结构 (TM) intracellular C terminal tail (IC).,N Engl J Med 2009;361:11-21.,PLA2R,PLA2R是在人肾小球足细胞表面表达，参与调节细胞中磷脂酶的结合过程。目前PLA2R主要分为两型（M型与N型），M型PLA2R是自身抗体的主要靶抗原。,抗PLA2R抗体血清学检测,抗PLA2R IgG抗体检测有助于： 原发性与继发性膜性肾小球肾炎的鉴别诊断 疾病活动性评估 制定治疗方案 治疗监测,标准化ELISA: - 试剂通用性, - 温育时间短- 30 / 30 / 15 min - 半定量检测 （ratio or index） 或 - 定量检测 （5 个标准品, 2 1500 RU/ml）,Anti-PLA2R RC-IIFT （FA 1254-xxxx-50）,Anti-PLA2R ELISA （EA 1254-9601 G）,抗PLA2R抗体检测产品,使用间接免疫荧光法检测抗PLA2R抗体 PLA2R 转染细胞,目前，间接免疫荧光（IIFT）是血清学诊断的唯一方法 (金标准），该方法适于抗PLA2R抗体的定性与定量分析。,转染细胞,间接免疫荧光法 检测抗体,基于重组细胞的间接免疫荧光法（RC-IFT）,含两个基质的生物薄片马赛克:,生物薄片: PLA2R转染HEK细胞 对照质粒转染HEK 细胞,抗PLA2R抗体的RC-IFT,基于抗原特异转染细胞的间接免疫荧光法,HEK293 cells,PLA2R-transfected,Anti-PLA2R Recombinant Cell IFT - BIOCHIP Technology -,敏感度: 52% 特异性: 100%,Hoxha, Fechner, Stahl et al., Nephrology Dialysis Transplantation: 26(8);2526-32, 2011,Anti-PLA2R Ab - 敏感性和特异性-,PLA2R-Ab,J Am Soc Nephrol 22: 11371143, 2011,检测anti-PLA2R 抗体对IMN鉴别诊断有很重要的意义（国内数据）,敏感度：81.7%； 特异性：89.1%,灵敏度和特异性,Dhnrich, Stahl, Schlumberger et al., Clin Chim Acta 421, 213-218 (2013),Dhnrich, Stahl, Schlumberger et al., Clin Chim Acta 421, 213-218 （2013）,抗PLA2R抗体的疾病特异性,Hoxha, Fechner, Stahl et al., Nephrology Dialysis Transplantation: 26(8);2526-32, 2011,IIFT检测性能,Hoxha, Stahl et al; Kidney Int 2012,对88例膜性肾病患者进行检测 采用欧蒙 RC-IFT产品 结果: 灵敏度：82 % 82%的 MN患者确认为原发性MN 所有的继发性MN患者均未检出抗PLA2R抗体 特异性：100%,几乎所有阳性检出率数据均来自于回顾性研究! 抗体滴度会随着疾病活动性而发生波动，甚至可能因取样时发生以下事件而检测不出： 自发性缓解 免疫抑制治疗 原发性/特发性膜性肾病并非单一的疾病，可能存在多种靶抗原 一些患者可能被误判为原发性膜性肾病（实际为继发性）,为什么并非所有的pMN患者均能检出抗PLA2R抗体?,Hoxha, Fechner, Stahl et al., N Engl J Med 363, 496-498 (2010),Anti-PLA2R Ab - 预测疾病预后-,患者肾脏移