课件：第十一章-肠道感染细菌.ppt

第十一章 肠道感染细菌,粪-口途径传播 主要包括 肠杆菌科细菌（最重要） 弧菌属细菌 幽门螺杆菌和弯曲菌属,2019,-,1,一大群生物学性状近似的革兰阴性杆菌,多数是肠道的正常菌群，,至少有30个菌属，120个以上的菌种,少数为致病菌，是胃肠传染病的最重要病原菌,肠杆菌科,2019,-,2,包括 埃希菌属 志贺菌属 沙门菌属 变形杆菌属 克雷伯菌属 摩根菌属 枸橼酸菌属 肠杆菌属 沙雷菌属等,致病菌,2019,-,3,乳糖发酵试验,共同特性,1、相似的形态染色 中等大小，G-杆菌，无芽胞，多数为周毛菌，大多数有菌毛,少数有荚膜或微荚膜。,2、简单的培养条件,3、活泼的生化反应,初步鉴别肠道致病菌和肠道非致病菌,肠道致病菌,肠道非致病菌,不发酵乳糖,发酵乳糖,2019,-,4,SS培养基（沙门志贺培养基）,乳糖、中性红指示剂、胆盐、煌绿等抑制剂,2019,-,5,没有发酵,有发酵,2019,-,6,EMB（伊红美兰培养基），乳糖、伊红、美兰,2019,-,7,EMB(Eosin Methylene Blue)平板上的E.coli,2019,-,8,4、抗原构造复杂,鞭毛抗原（H）,菌体抗原（O）,K或Vi抗原,2019,-,9,5、抵抗力,不强,6、易变异,溶源性转换,生化反应性变异,通过,引起,耐药性变异,毒力性变异,转导,接合,2019,-,10,第一节 埃希菌属,埃希菌属(Escherichia)有5个种，其中大肠埃希菌（E. coli）是最常见、临床上最重要的一个菌种。大肠埃希菌通称大肠杆菌，主要意义表现在四方面：大肠埃希菌是肠道中重要的正常菌群，能为宿主提供一些具有营养作用的合成代谢产物；在宿主免疫力低下或细菌侵入肠道外组织器官后，可成为条件致病菌，引起肠道外感染；有一些血清型大肠埃希菌具有致病性，能导致人类胃肠炎；在环境卫生和食品卫生学中，常被用作粪便污染的卫生学检测指标。,2019,-,11,一、生物学性状,形态染色 符合肠杆菌特点，周毛菌，有菌毛 培养特性 符合肠杆菌特点 EMB紫黑色有金属光泽 乳糖发酵菌落 S-S桃红色 生化反应 IMViC（+ + - -） 抗原 O 抗原（O1-O173） H 抗原（H1-H56） K 抗原（K1-K100） 血清型表示法：O：K：H,2019,-,12,二、致病性,菌毛、定植因子抗原 K抗原 与侵袭力有关 抗吞噬与抗补体的溶菌 外毒素 肠毒素及溶血毒素 内毒素 与感染特征和严重程度有关,（一）致病物质,2019,-,13,（二）所致疾病,肠道外感染 泌尿道感染病原菌来自病人肠道 占泌尿道感染首位、女性多见（尿道炎、膀胱炎、肾盂肾炎等） 化脓性感染定位转移 腹膜炎、阑尾炎、创伤感染、手术刀口感染、肺炎、败血症、新生儿脑膜炎等 胃肠炎,2019,-,14,引起胃肠炎的大肠埃希菌,肠产毒型大肠埃希菌 enterotoxigenic E. coli ETEC 肠侵袭型大肠埃希菌 enteroinvasive E. coli EIEC 肠致病型大肠埃希菌 enteropathogenic E. coli EPEC 肠出血型大肠埃希菌 enterohemorrhagic E. coli EHEC 肠集聚型大肠埃希菌 enteroaggregative E. coli EAggEC,2019,-,15,肠产毒素型大肠埃希菌（ETEC）,致病物质 heat labile enterotoxin(LT) heat stable enterotoxin(ST) 菌毛粘附素 内毒素 K抗原 所致疾病 5岁以下婴幼儿腹泻 旅游者腹泻,肠毒素,2019,-,16,2019,-,17,肠侵袭型大肠埃希菌（EIEC）,致病物质 不产肠毒素，侵袭结肠粘膜上皮细胞 细菌死亡后释放内毒素，引起炎症 所致疾病 主要侵犯较大儿童和成人 腹泻呈脓血便，有里急后重诊断,2019,-,18,肠致病型大肠埃希菌（EPEC ）,致病物质 不产生肠毒素及其他外毒素 无侵袭力 粘附和破坏肠粘膜微绒毛 上皮细胞排列紊乱，功能受损，导致腹泻 所致疾病 婴幼儿腹泻,2019,-,19,肠出血型大肠埃希菌（EHEC）,亦称为vero毒素大肠埃希菌 致病物质 菌毛：粘附作用 毒素：vero毒素 所致疾病 出血性结肠炎 溶血性尿毒综合征 血清型为 O157:H7,2019,-,20,Intimate Adherence of EHEC to Epithelial Cells,2019,-,21,The “life cycle” of E. coli O157:H7,5-10% prevalence in animals 40% prevalence in farms,2019,-,22,2019,-,23,肠集聚型大肠埃希菌 EAEC,致病物质 毒素 粘附素 所致疾病 引起婴儿持续性腹泻，脱水，偶有血便,2019,-,24,引起腹泻的大肠埃希菌,2019,-,25,三、微生物学检查法,标本 分离培养与鉴定 肠道外感染 标本涂片、染色分离培养鉴定 尿路感染时每ml尿含菌10万，有诊断价值 肠道内感染 用弱选择性培养基 分离培养+生化反应+血清分型+毒素测定+核酸检测等,2019,-,26,卫生细菌学检查,大肠菌群指数 每1000(g)ml水中大肠菌群数 大肠菌群是指在3724h内发酵乳糖产酸产气需氧和兼性厌氧的肠道杆菌，包括埃希菌属、枸橼酸杆菌属、克雷伯菌属及肠杆菌属等。 我国卫生标准, 3个大肠菌群数/1L饮水 5个大肠菌群数/100ml果汁,2019,-,27,四、防治原则,疫苗 母乳中sIgA可中和大肠埃希菌肠毒素，故母乳喂养婴儿可减少婴儿腹泻的发生。 治疗选用磺胺、庆大霉素、氟派酸等，但易产生耐药性。,2019,-,28,小结,肠道杆菌的共同特征及分类 致病性大肠埃希菌的种类和致病机制 大肠埃希菌的微生物学检查法 大肠埃希菌的卫生细菌学检查及其意义,2019,-,29,第二节 志贺菌属,志贺菌属（Shigella）是人类细菌性痢疾的病原菌，通称痢疾杆菌(dysentery bacterium)。,2019,-,30,一、生物学性状,形态染色 ：G-杆菌，无鞭毛，无荚膜， 有菌毛 培养特性：营养要求不高，肠道鉴别培养基上的无色透明、乳糖不发酵菌落 生化反应：葡萄糖（+）、乳糖（-）（宋内志贺菌迟缓发酵乳糖）、H2S（-）、尿素（-）、动力（-）,2019,-,31,抗原构造及分类,由O和K抗原组成 分类： 菌种 群 型 亚型 痢疾志贺菌 A 110 8a、8b、8c 福氏志贺菌 B 16、 1a、1b、2a 、2b 、 3a x y变型 3b、3c、4a、4b 鲍氏志贺菌 C 118 宋内志贺菌 D 1,抵抗力：比其他肠道杆菌弱；对酸和 一般消毒剂敏感,2019,-,32,二、致病性与免疫性,侵袭力 菌毛：黏附肠黏膜上皮细胞 型分泌系统穿透上皮细胞并扩散、 传播 内毒素强烈内毒素，作用于局部并可 吸附入血引起全身症状 外毒素A群（、型）产生志贺毒素 （ST）有肠毒素、细胞毒性、神 经毒性3种生物活性,（一）致病物质,2019,-,33,(二)所致疾病,菌痢 患者和带菌者 粪-口 表现： 潜伏期数小时至7d 发热、腹痛、腹泻、里急后重、粘液脓血便,2019,-,34,2019,-,35,临床表现：,急性细菌性痢疾,急性典型：发热、腹痛、脓血粘液便,非急性典型：小儿中毒型 成人易误漏诊,病程迁移二月以上,慢性细菌性痢疾,2019,-,36,中毒性痢疾患儿,2019,-,37,（三）免疫性,免疫期短，不稳固 免疫主要是消化道粘膜的SIgA,2019,-,38,三、微生物学检查,及时送/暂用30%甘油缓冲水保存,SS平板（无色透明小菌落）,血清学反应（玻片凝集）,明确诊断,分离培养,新鲜脓血便/肛拭,双糖培养基（生化反应）,快速诊断,荧光菌球试验,协同凝集试验,2019,-,39,四、防治原则,隔离患者、彻底治疗 试用的口服菌苗 抗生素,多种抗生素可选择,但很易引起耐药性,2019,-,40,小结,生物学性状特点（抗原构造及分类） 致病物质及所致疾病 微生物学检查法 志贺菌的防治原则,2019,-,41,第三节 沙门菌属,是一群革兰阴性杆菌 菌种繁多，血清型超过2400个 多对动物致病 对人类致病的占少数 动物沙门菌也可对人致病,2019,-,42,一、生物学性状,1.形态染色 G-杆菌 0.6-1.0m 2-4m 周身鞭毛，有菌毛 2.培养和生化反应 兼性厌氧 营养要求不高 不分解乳糖,2019,-,43,鼠伤寒沙门菌,2019,-,44,主要沙门菌的生化特性,2019,-,45,3.抗原构造,Vi抗原,2019,-,46,4. 抵抗力,较差 水中能存活2-3W 粪便中可活1-2个月 冰冻土壤中可过冬 耐受胆盐、煌绿及其他染料 对热耐力差,2019,-,47,二、致病性与免疫性,侵袭力 菌毛、Vi抗原抗吞噬 型分泌系统穿入细胞，扩散 具有耐酸性答基因及产生过氧化氢酶和超氧化物歧化酶等保护因子 内毒素 肠毒素 某些沙门菌如鼠伤寒沙门菌,（一）致病物质,2019,-,48,（二）所致疾病-人类沙门菌病,伤寒、副伤寒 伤寒、甲型副伤寒、肖氏、希氏沙门菌引起 胃肠炎（食物中毒） 鼠伤寒沙门菌、肠炎沙门菌、猪霍乱沙门菌 沙门菌性食物中毒在我国占细菌性食物中毒的第一位。 败血症 鼠伤寒沙门菌、肠炎沙门菌、猪霍乱沙门菌、希氏沙门菌,肠热症,无症状带菌者,2019,-,49,肠热症,摄入的细菌,肠系膜淋巴结,胸导管,全身疼痛、不适 发热（前驱期）,菌血症,肝、脾、肾及胆囊等,胆囊,肾脏,持续高热、肝脾肿大、全身中毒、玫瑰疹、相对缓脉,菌血症,进入肠壁淋巴组织,粪便,尿,并发症：肠穿孔、血栓性静脉炎、胆囊炎,典型病例病程为3-4W,孤立和集合淋巴结坏死溃疡,淋巴管,吞噬细胞吞噬,2019,-,50,2019,-,51,伤寒玛丽,2019,-,52,（三）免疫性,肠热症后，能获得牢固免疫 即使发生，症状也轻，很少发生再感染 细胞免疫较重要,2019,-,53,三、微生物学检查,标本,伤寒和副伤寒 食物中毒 败血症 第1周取静脉血 可疑食物 血 第1-3周取骨髓液 呕吐物 第2周起取粪、尿 粪,SS平板,生化反应,血清学鉴定,2019,-,54,肠道杆菌生化反应,2019,-,55,肥达反应（Widal reaction）,用已知伤寒沙门菌O、H和甲型副沙寒沙门菌和肖氏沙门菌H抗原与病人血清做定量凝集试验，用以辅助诊断肠热症,血清学诊断,2019,-,56,判定结果时，应着重考虑：,正常凝集价 伤寒沙门菌O抗体的凝集价1：80以上，H抗体1：160以上 甲型副伤寒、肖氏沙门菌H抗体凝集价在1：80以上 动态观察 O与H抗体的诊断意义,2019,-,57,H与O抗体的性质及其消长意义,2019,-,58,四、防治原则,“三管一灭”(粪便管理、水源管理、饮食卫生管理和消灭苍蝇） 疫苗 伤寒、甲及乙型副伤寒3联菌苗 Ty2la伤寒沙门菌口服活菌苗 伤寒Vi荚膜多糖疫苗 治疗 氯霉素、氨苄青霉素、环丙氟哌酸,2019,-,59,小结,O、H抗原 致病性及机制 血清学诊断、肥达反应及其意义 微生物学检查法 防治原则,2019,-,60,第四节 弧菌属（Vibrio）,菌体短小，弯曲成弧形，革兰阴性菌 广布于自然界 氧化酶试验阳性 有单鞭毛,2019,-,61,霍乱弧菌,Vibrio cholerae,2019,-,62,O139群： 1992年印度分离，流行于南亚和东南亚,2019,-,63,Dr. John Snow 18131858年,英国医生约翰.斯诺证明,霍乱是通过受污染的饮用水来传播的.他追查到1854年伦敦霍乱爆发的根源,是一条街道上已被脏水污染的一台水泵.他的研究表明,向各户人家供给纯净饮用水十分重要.,2019,-,64,布罗德大街,2019,-,65,2019,-,66,Robert Koch,18431910,It wasnt until 1883 that the cholera bacteria was discovered by Robert Koch.,2019,-,67,一、生物学性状,1.形态与染色 G- 弧形或逗点状 周身菌毛 ，有荚膜，无芽胞 单鞭毛，运动活泼,2019,-,68,图注：霍乱弧菌的鞭毛（）和它可溶解的鞘膜（） 负染，3 100,图注：分裂中的霍乱弧菌 冰冻蚀刻，70 000,2019,-,69,2. 培养特性 兼性厌氧 耐碱不耐酸（pH8.89.0的碱性蛋白胨水） 3. 生化反应 发酵甘露醇及蔗糖，缓慢发酵乳糖 霍乱红反应阳性，不同生物型生化反应不同,2019,-,70,2019,-,71,常用的选择培养基为硫代硫酸盐-枸橼酸盐-胆盐-蔗糖琼脂平板（TCBS），霍乱弧菌在其中可形成较大的菌落，因发酵蔗糖产酸而使菌落呈黄色。,2019,-,72,4.抗原结构,O抗原、H抗原 O抗原分200多个血清群 其中O1群、O139群引起霍乱 O1血清群可根据其A、B、C三种抗原成份的不同组成，分为三个血清型：含AC者为原型（又称稻叶型），含AB者为异型（又称小川型），A、B、C均有者称中间型（彦岛型）。,2019,-,73,以上为阳性；以上为阴性；阳性,O1群血清群分2个生物型,2019,-,74,2019,-,75,2019,-,76,4.抵抗力,El Tor生物型和其它非O1群霍乱弧 菌抵抗力较古典生物型强 怕干干燥时易死亡，水环境中可 存活两周（水源性传播，水性爆发） 怕酸正常胃酸4min 不耐热100，1-2min 对消毒剂敏感,2019,-,77,二、致病性,1. 致病物质,鞭毛 菌毛 霍乱肠毒素 Choleragen -最强的致泻毒素 -1A+5B结构 -不耐热,2019,-,78,2019,-,79,2019,-,80,霍乱肠毒素的作用机制,2019,-,81,2.所致疾病：霍乱（Cholera）,传染源：患者及带菌者 人类是唯一易感者 摄入108-1010个细菌可造成感染，引起霍乱 传播途径,2019,-,82,2019,-,83,潜伏期：2-3d 前驱期：不明显，少数有轻度吐泻、腹胀不适 吐泻期：剧烈吐泻、米泔样，每日数十次，持续2-3天，失水12000ml 脱水期：严重吐泻引起水电解质紊乱，脱水酸中毒，肾衰、循环衰竭、休克、死亡 表现：神志不安、淡漠“霍乱面容”呈脱水 貌，眼窝下陷，舟状腹，肌痉挛等 恢复期：吐泻停止、紊乱纠正、症状消失、病程平均为3-7天 免疫力：病人愈后可获得牢固免疫,2019,-,84,Higher power scanning electron micrograph showing single polar flagellum of the cholera vibrios,2019,-,85,“米泔水”样便及霍乱患儿,2019,-,86,2019,-,87,2019,-,88,3.免疫性,感染后机体获得牢固免疫力。 再感染少见 对肠毒素有体液免疫 sIgA,2019,-,89,三、微生物学检查法,2019,-,90,四、防治原则,2019,-,91,副溶血性弧菌,Vibrio parahaemolyticus,2019,-,92,一、生物学特性,根据O抗原有13个血清群 嗜盐性（halophilism） 与霍乱弧菌的显著差别 培养基含3.5% NaCl为宜 在TCBS平板上形成绿色蔗糖不发酵菌落。 神奈川试验（KP）：在高盐培养基上中使人或兔红细胞发生溶血（溶血）耐热性溶血毒素与致病性平行（KP+，KP-）。,2019,-,93,二、致病性：胃肠炎,传播途径 海产品或盐腌制品 临床症状 自限性腹泻 免疫力 病后免疫力不强，可重复感染 致病机制不明,2019,-,94,2019,-,95,血水样便,2019,-,96,三、诊断与防治,标本 粪便、肛拭或剩余食物 分离培养 SS琼脂平板 嗜盐菌选择平板 治疗 抗菌药物，如庆大霉素或复方SMZ -TMP,2019,-,97,小结,霍乱弧菌 形态和培养特性 霍乱肠毒素的性质和致病机制 微生物学检查 特异性预防 副溶血性弧菌,2019,-,98,螺旋形、S型 一端有26根鞭毛 运动活泼，呈鱼群样排列 微需氧 对营养要求高，生长缓慢 在含血液、血清或心脑浸液琼脂培养基，需要35天或更长时间培养，形成细小、无色透明菌落,螺杆菌属 （Helicobacter),生化反应不活跃，但尿素酶丰富快速脲酶实验强阳性（主要鉴定依据）,2019,-,99,致病性,幽门螺杆菌 慢性胃炎、消化性溃疡的主要病因 与胃腺癌、粘膜相关B细胞淋巴瘤发生有关,2019,-,100,2019,-,101,弯曲菌属 Campylobacter,革兰阴性 细长弯曲 呈S形、逗点状、螺旋形 单鞭毛，运动活泼 无荚膜，不形成芽胞 微需氧 （5%O2+10%CO2+