老年非小细胞肺癌XIAP蛋白的表达及临床意义.doc

老年非小细胞肺癌XIAP蛋白的表达及临床意义【摘要】 目的 观察XIAP蛋白在老年非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达。方法 应用蛋白质印迹法检测39例NSCLC肿瘤组织和癌旁组织中XIAP蛋白的表达情况及其临床意义。结果 NSCLC肿瘤组织XIAP蛋白阳性率为62%，阳性病例中XIAP蛋白的相对表达量高于癌旁组织(P<0.01)。高表达的XIAP蛋白与患者的性别、年龄、吸烟史、淋巴结转移无关，与肿瘤临床分期、病理分级有关(P<0.05)。结论 XIAP蛋白可能是判断老年NSCLC预后的重要指标之一。 【关键词】 非小细胞肺癌;XIAP;蛋白质印迹非小细胞肺癌(NSCLC)的临床发展进程、生物学活性及预后各异，临床上大部分病例确诊时已属肿瘤晚期，5年生存率不足13%1。X染色体相关凋亡抑制蛋白(X chromosome-linked inhibitors of apoptosis protein，XIAP)是近年来发现的最强的凋亡抑制因子之一，是导致肿瘤凋亡率下降、预后差的重要原因。本研究着重观察老年人NSCLC中XIAP蛋白的表达及临床意义，探讨其在老年NSCLC的发生、发展中的作用。1 资料与方法1.1 一般资料 NSCLC肿瘤标本39例，均经病理学检查确诊。男25例，女14例。年龄4673岁，平均59.3岁。其中鳞癌23例，腺癌16例。采取国际抗癌联盟(UICC)2002年NSCLC临床分期标准:期13例，期9例，期16例，期1例。所有病例手术前均未接受药物治疗。1.2 主要试剂 兔抗人抗XIAP抗体购于美国Santa Cruz公司;辣根过氧化物酶结合鼠抗人抗体购于BD公司;ECL显影剂来自美国Pierce公司;硝酸纤维素膜、电泳仪、免疫印迹分析仪(quality one 4.5.0)购于美国Bio-Rad公司。1.3 方法 肿瘤标本取自手术切除后肿瘤中央的新鲜组织，对照组为同一病例的癌旁组织(距肿瘤边缘约5 cm以上的远癌组织)，所有标本置于-70液氮中保存，测定XIAP蛋白浓度。应用免疫印迹分析仪定量分析XIAP蛋白及内参蛋白GAPDH的OD值，以相对积分光密度XIAP的OD值/GAPDH的OD值比较蛋白表达的高低。1.4 统计学方法 应用SPSS17.0软件分析，计量资料用xs表示，采用t检验或2检验。2 结 果2.1 NSCLC中XIAP蛋白的表达 本组中24例(62%)XIAP蛋白表达阳性，15例(38%)XIAP蛋白无表达。XIAP蛋白阳性表达的肿瘤组织中XIAP蛋白相对表达量为0.160 40.203 3，对照组为0.036 10.050 9，两组间比较有显著性差异(P<0.01)。2.2 XIAP蛋白的临床意义 NSCLC病例中XIAP的高表达与年龄、性别、吸烟史及淋巴结转移无关，与肿瘤的临床分期及病理分级程度有关(P<0.05)。见表1。表1 NSCLC中XIAP蛋白表达与临床资料的相关性3 讨 论XIAP定位于Xq25,mRNA全长9 kb，主要由3个杆状病毒IAP重复序列区和一个RNG锌指结构域组成。XIAP是凋亡抑制蛋白家族中最具效力的胱天蛋白抑制物，在肿瘤中的作用主要是结合并抑制caspases3、caspases7及caspases9，从而达到抑制凋亡的目的，促进肿瘤细胞生存。此外，XIAP还能通过激活丝裂原激活蛋白激酶家族的另一成员CJUN N末端激酶1，从而抑制由TNF及ICE介导的细胞凋亡2。研究表明，XIAP蛋白在多种肿瘤中存在高表达，与肿瘤的进展、复发、预后及肿瘤化疗的耐药性密切相关35。张丽娜6等研究发现，XIAP高表达是急性白血病患者预后不良的高危因素之一。Tamm 等7对儿童急性粒细胞性白血病患者随访发现，XIAP的高表达与生存期短有关。Zhang等8应用RNA干扰技术研究发现，明显抑制乳腺癌MCF7细胞XIAP mRNA和蛋白的表达能够抑制肿瘤的生长，诱导细胞凋亡。Ma等9通过siRNA技术下调XIAP基因的表达能够诱导凋亡，逆转卵巢癌细胞对顺铂的耐药。本研究表明，XIAP蛋白在老年NSCLC中62%的病例存在高表达，且蛋白的相对表达量明显高于对照组,说明XIAP蛋白在肿瘤的发生、发展中起着重要的作用。本研究还表明，XIAP蛋白的高表达与老年人NSCLC肿瘤分期、病理分级有关，随着临床分期与病理分级的升高, XIAP蛋白的表达也逐渐增多，而肿瘤分期及病理分级是判断肿瘤预后的重要影响因素，XIAP蛋白高表达提示老年NSCLC患者的预后差。因此，检测XIAP蛋白有可能成为判断老年NSCLC预后的一个重要指标。【参考文献】 1 Ferreira CG，Vander VP，Span SW,et al.Expression of Xlinked inhibitor of apoptosis as a novel prognostic marker in radically resected nonsmall cell lung cancer patientsJ.Clin Cancer Res,2001;7:246874.2 Laurence DD，Alban D，Jessy C.IAPs more than just inhibitors of apoptosis proteinsJ.Cell Cycle,2008;7(8):103646.3 Sun C, Cai M，Meadows RP,et al.NMR structure and mutagenesis of the third birdomain of the inhibitor of apoptosis protein XIAPJ. J Biol Chem，2000;275(43)：3377781.4 Nomura T，Mimata H，Takeuchi Y，et al.The Xlinked inhibitor of apoptosis protein inhibits taxolinduced apoptosis in LNCaP cellJ.Urol Res,2003;31(1): 3744.5 Sasaki H，Sheng Y，Kotsuji F，et al.Downregulation of Xlinked inhibitor of apoptosis protein induces apoptosis in chemoresistant human ovarian cancer cellsJ.Cancer Res,2000;60(20)：565966.6 张丽娜，魏旭东，李玉富，等.X相关凋亡抑制蛋白在86例急性白血病中的表达J.肿瘤学杂志,2009;15(2)：1202.7 Tamm I，Richter S，Oltersdorf D，et al.High expression levels of xlinked inhibitor of apoptosis protein and survivin correlate with poor overall survival in childhood de novo acute myeloid leukemiaJ. Clin Cancer Res，2004;10(11): 373744.8 Zhang Y，Wang Y，Gao W，et al.Transfer of siRNA against XIAP induces apoptosis and reduces tumor cells growth potential in human breast cancer in vitro and in vivoJ.Breast Cancer Res Treat,2006;96(3):26774.9 Ma JJ,Chen BL,Xin XY.XIAP gene downregulation by s