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结核感染T细胞斑点试验 (T-SPOT -TB),感染二科,由来-干扰素释放试验(IGRAs),在2001年前,美国仅批准结核菌素皮肤试验(TST)用于结核分支杆菌的检测。在认识到IFN-在调节对结核分支杆菌的细胞介导的免疫反应中起重要作用,从而使得(interferon gamma release assays)IGRAs用于检测结核感染。IGRAs通过检测代表结核分支杆菌的抗原刺激T淋巴细胞反应后释放IFN-的量来判断是否存在结核杆菌感染。,T-SPOT-TB定义,以结核特异的混合抗原A和混合抗原B(分别为ESAT-6和CFP-10的部分多肽片断)刺激结核杆菌感染者外周血单核细胞中存在结核特异的活化T淋巴细胞分泌干扰素,从而应用ELISPOT方法检测对结核杆菌反应的效应T细胞数量,对结核杆菌感染进行辅助诊断。,特异抗原,ELISPOT,活化的T细胞,否存在感染,T-SPOT-TB几个概念,ELISPOT(enzyme-linked immunospot assay,)是一种新型的免疫酶技术,它是从单细胞水平检测分泌抗体细胞或分泌细胞因子细胞。(简单说:可以数出分泌特异因子的细胞的个数) ESAT-6和CFP-10蛋白:存在结核分枝杆菌及少数致病非结核分枝杆菌中名为“RD1”的基因序列,编码产生两种蛋白。在卡介苗菌株和大部分环境中的分枝杆菌基因中则缺乏次序列。,T-SPOT-TB示意,T-SPOT-TB解释,非黄金标准 定性检测而不是定量检测 敏感性95.3%-98.8% 特异性94.1%-100% 萨斯分枝杆菌( My cobacter ium kans asii ) 、海分枝杆菌(My cobacter ium mar inum ) 、斯氏分枝杆菌( My cobacter ium sz ul gai ) 等少数分枝杆菌中也存在完整RD1区,编码ESAT6 和CFP10, 可造成检测结果成假阳性。,2019/4/24,7,可编辑,T-SPOT-TB应用,在活动性结核病中的诊断意义 1.敏感性86-94%,特异性89-99% 2.在肝移植术后、艾滋病、血液肿瘤等免疫抑制患者中, T-SPOT-TB阳性率略低于免疫正常组,但仍具有较高的敏感性,且优于结核菌素试验。 3.在肺外结核患者诊断中的,敏感性优于结核菌素试验。 4.对小于4岁儿童,与结核菌素实验比较敏感性无优势,美国CDC更推荐结核菌素实验。,T-SPOT-TB应用,在结核性脑膜炎、结核性胸膜炎中的诊断意义 1.敏感性优于ADA、TB-DNA,约在62-75%,特异性无统计学差异。 在结核病治疗中的评价意义 1.其数值高低与严重程度无关。 2.效应T细胞随结核杆菌的清除而消失,其阴性及阳性结果可作为评估治疗效果的手段之一 。,T-SPOT-TB应用,在潜伏性结核杆菌感染者的筛选中 1.敏感性优于结核菌素试验,且不受卡介苗接种影响。
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