全国病媒生物抗药性监测方案(试行)4.doc

全国重要病媒生物抗药性监测（试行）方案 1 背景2 1.1 抗药性监测在疾病预防控制中的重要性2 1.2 抗药性概况.2 1.3 抗药性监测的基础条件.3 1.3.1 疫情控制的需要 .3 1.3.2 人民生活和社会与经济的需要 .3 1.3.3 已有的工作基础 .4 1.4 当前抗药性监测中存在的问题.4 1.4.1 专业技术人员缺乏 .4 1.4.2 测定方法不统一 .4 1.4.3 抗药性监测结果的利用率低 .4 2 监测目的5 2.1 掌握抗药性水平，指导防制.5 2.2 制定控制预案，提高疾控能力.5 3 监测的组织、分工和职责5 3.1 监测网络.5 3.2 分工和职责.5 3.2.1 中国疾病预防控制中心传染病所 .5 3.2.1 省(自治区，直辖市)疾病预防控制部门.5 4 监测内容和方法5 4.1 蚊虫抗药性监测.5 4.1.1 靶标蚊虫及监测点的选择 .5 4.1.2 监测时间 .6 4.1.3 试虫采集 .6 4.1.4 监测药剂 .6 4.1.5 设施和器材 .6 4.1.6 监测方法 .6 4.1.6.1 幼虫浸渍法 .6 4.1.6.2 成蚊监测法 .7 4.1.7 统计与计算 .7 4.2 家蝇抗药性监测.7 4.2.1 监测点的选择 .7 4.2.2 试虫采集 .7 4.2.3 监测药剂 .7 4.2.3 设施和器材 .8 4.2.4 监测方法 .8 4.2.5 数据统计 .8 附录 1 淡色库蚊对化学药剂的抗药性测定原始记录表9 附录 2 白纹伊蚊对化学药剂的抗药性测定原始记录表.10 附录 3 中华按蚊对化学药剂的抗药性测定原始记录表11 附录 4 家蝇对化学药剂的抗药性测定原始记录表.12 附录 5 中华按蚊测试基本情况记录.13 附录 6 测试杀虫剂的推荐使用浓度.13 附录 7 推荐使用敏感基线.13 附录 8 成蚊测定用药纸的计算.13 附录 9 关于化学杀虫剂对昆虫的毒力回归线统计问题.14 1. 使用国际通用的统计软件 POLOPC14 2. 使用具有我国知识产权的 DPS 数据处理系统.15 附录 10 关于敏感基线的现状和设想.16 1 建立敏感性基线的重要性.16 2 昆虫产生敏感性差异的原因.16 3 如何建立敏感基线.17 根据卫生部2007 年卫生应急工作要点中“提高卫生应急能力”的精神， 和卫生部发布的 2007 年卫生工作要点中“大力开展爱国卫生运动”的要求，落 实中国疾病预防控制中心的关于重要病媒生物年度工作计划，特制定本方案。 方案的实施能够指导和推进“十一五”期间我国重要病媒生物控制水平、提升 突发公共卫生事件中病媒生物控制技术支撑水平、规范我国重要病媒生物抗药 性监测方法。 抗药性是影响全球公共卫生、农业、林业、畜牧业等领域中有害生物控制 的重要问题，是影响媒介生物性传染病疾病预防控制的关键因素。抗药性的产 生和发展与药剂的使用有非常密切的关系。开展和加强重要病媒生物抗药性监 测，可以指导化学药剂的科学合理使用，提高控制效果，延缓抗药性发展速度， 减少人畜中毒事件的发生，保护有益生物，维持生态平衡。 1 背景 1.1 抗药性监测在疾病预防控制中的重要性 目前，我国登革热、疟疾、鼠疫、肾综合征出血热、肠道传染病（如霍乱、 细菌性痢疾）等疫区处理中，化学控制是其媒介生物控制的主要措施。通过对 常用化学药剂的敏感性调查和抗药性动态监测，可以选择并储备适宜的控制药 剂，针对疫情种类、疫区的病媒生物种类、疫情的发生季节和生境等背景材料 制定“病媒生物应急控制预案” ，提高我国在传染病预防控制中病媒生物控制能 力。 1.2 抗药性概况 据统计，全球几乎所有病媒生物（如蚊类、蝇类、鼠类、蚤类等）都有产 生抗药性的报道。据统计，全世界已经有 90 种蚊虫对一种或几种杀虫剂产生抗 性，其中按蚊 51 种、库蚊 20 种、伊蚊 19 种。51 种按蚊中，对 DDT 产生抗性 的有 49 种，有机磷抗性 24 种，氨基甲酸酯 14 种，拟除虫菊酯 10 种。产生抗 性的库蚊有 20 种。家蝇的抗药性问题在我国十分突出，对 DDT、六六六等有 机氯类，对敌百虫、敌敌畏、马拉硫磷、毒死蜱等有机磷类，对残杀威等有机 磷类，对二氯苯醚菊酯、胺菊酯、氯氰菊酯、溴氰菊酯等拟除虫菊酯类药剂， 都已经产生了不同程度的抗药性。 1978 年，全国蚊虫抗性调查显示：淡色库蚊对有机氯类杀虫剂产生抗性， 且无明显的区域性差异；淡色库蚊对有机磷类杀虫剂抗性在我国的东部高于西 部。中华按蚊对 DDT 的抗性现象发生普遍。在 1984-1986 年的调查显示，淡色 库蚊对拟除虫菊酯类杀虫剂普遍产生抗性。在二十世纪 90 年代，淡色库蚊对溴 氰菊酯的抗药性趋势显示，东南沿海高于华北和东北，城市高于农村。目前， 淡色库蚊、白纹伊蚊、家蝇、中华按蚊、三带喙库蚊在我国多数地区已经产生 了不同程度的抗药性，印鼠客蚤在广东省、云南省产生抗药性，褐家鼠、黄胸 鼠、小家鼠在我国的多数分布区也对抗凝血剂产生抗性。鉴于目前媒介生物性 传染病发生的严峻形势，必须加强我国主要病媒生物抗药性监测工作。 1.3 抗药性监测的基础条件 1.3.1 疫情控制的需要 媒介生物性传染病占我国法定传染病的 1/3，控制病媒是控制这类疾病的有 效措施之一，化学药剂是快速降低媒介密度的必须手段，其依据是控制预案。 了解当地病媒对常用化学药剂的敏感程度、掌握有效药剂种类及其使用技术、 制定针对性的控制预案，以应对可能出现的疫情。 1.3.2 人民生活和社会与经济的需要 随着社会和经济的发展，人们的健康意识增强。控制能够影响人类健康和 生活的病媒生物，倍受各界人士的关注。无论在大型活动（如奥运会、亚运会、 世博会等） 、大型工程（如三峡工程、南水北调、青藏铁路等） ，还是在市民群 众的出游和日常生活中，对公共卫生要求更高，对环境保护的意识更强，这些 都要求我们既要控制有害生物，又要绿色环保，抗药性调查可以使我们科学用 药、少用药。 1.3.3 已有的工作基础 由于病媒生物控制在我国疾病预防控制中的重要作用，国家对此非常重视， 全国爱国卫生委员会是我国的病媒生物控制的积极推动者，在此平台上开展了 一系列工作，如于二十世纪 70 年代末进行的全国蚊、蝇、鼠的抗药性监测，在 全国范围广泛进行，基本摸清了当时的抗药性现状和发展动态，奠定了抗药性 监测的理论基础和本底资料，同时也培养了大量的专业技术人员。 针对重要媒介生物性传染病和具有严重骚扰性的媒介，进行抗药性调查。 调查以 WHO 的测定方法为基础，统一检测方法，成果与信息共享。与此同时， 也进行抗性机制、抗性遗传规律、抗药性治理策略等的研究，对我国疾病预防 控制和环境卫生的改善起到积极作用。 另外，在全国重要病媒生物监测正在运行，在该平台的支持下，使对抗药 性的监测网络化成为可能，可以利用已有的人才、物资和系统资源，丰富各级 疾控系统的病媒生物预防控制工作，为了实现病媒生物可持续控制，提高疾控 能力。 1.4 当前抗药性监测中存在的问题 1.4.1 专业技术人员缺乏 二十世纪 90 年代，由于工作经费紧张和工作重心的转移，全国抗药性协作 中断，使一些从事抗药性监测的专业技术人员离开原工作岗位，使病媒生物控 制的发展受到极大损失。 1.4.2 测定方法不统一 抗药性的检测和研究，主要集中在各级疾控机构、研究所、大学等领域， 通过对近 20 多年发表的文献统计，出现试验方法不一致，即使相同的方法，试 验条件不同、试虫不统一、供试药剂各异、死亡率判断标准不一致、数据统计 方法各异等现象，致使获得资料间可比性差，不能实现资料的共享。 1.4.3 抗药性监测结果的利用率低 对病媒生物的监测是为了指导用药，科学合理用药，进而制定抗性治理方 案、疫情控制预案，最终为疾病预防控制提供理论依据。由于抗药性的发生有 区域性，不同的病媒生物、不同的药剂类型其抗性机制不同，只有充分利用抗 药性监测和研究的结果，实现成果共享，才能提供资料的利用率，更好地为疾 控服务。 2 监测目的 2.1 掌握抗药性水平，指导防制 掌握我国重要病媒生物对主要化学药剂的抗性水平，了解抗性动态和发展 规律。 2.2 制定控制预案，提高疾控能力 为病媒生物控制中药剂的选择和使用提供科学依据；针对不同疫情、不同 地区、不同病媒生物制定药剂的储备和使用预案。 3 监测的组织、分工和职责 3.1 监测网络 以中国疾病预防控制中心传染病预防控制所媒介生物控制室为依托，以各 省(自治区，直辖市)为监测试点单位，监测点由监测试点设立。 3.2 分工和职责 3.2.1 中国疾病预防控制中心传染病所 负责全国重要病媒生物抗药性监测方案 （以下简称方案 ）的制定、 组织、协调和督导；承担抗药性监测的技术指导和培训，提供监测药剂的标准 样品，负责监测信息的收集、整理、分析、总结和反馈；并进行监测工作的督 查和质量控制。 3.2.1 省(自治区，直辖市)疾病预防控制部门 按照方案要求，落实开展辖区内监测工作；确定一名主管领导负责协 调，督促检查监测方案落实；按时上报、分析监测结果。 4 监测内容和方法 4.1 蚊虫抗药性监测 4.1.1 靶标蚊虫及监测点的选择 淡色库蚊/致倦库蚊（幼虫）、中华按蚊（成虫）、白纹伊蚊（幼虫）为监 测对象。 各监测试点选择依据：（1）当地媒介生物性传染病的发生情况；（2）相 关疾病媒介生物的种类和发生强度；（3）病媒生物对人的骚扰程度等选择。监 测点要考虑地理分布（经纬度、生境），每省选两个监测点进行。监测点要相 对固定。 4.1.2 监测时间 在当地的发生高峰期，每年进行一次，年度间的测定时间相对固定。 4.1.3 试虫采集 淡色库蚊：雌成蚊100头以上，或幼虫300头以上，或淡色库蚊卵块50个以 上，以居民区为主（依据：自然情况下，昆虫抗药性的等位基因频率为 106108，抗性个体百分率为101。）。 白纹伊蚊：幼虫采集在150头以上，成蚊诱集在30头以上（伊蚊捕获成蚊的 难度较大）。 中华按蚊：在牲口棚内采集成蚊100头以上、或在稻田、积水等处采集300 头以上幼虫。 抗药性监测，在采集试虫的当代或室内饲养的12代进行。 4.1.4 监测药剂 拟除虫菊酯类 溴氰菊酯、氯氰菊酯、氯菊酯；有机磷类 敌敌畏、毒死 蜱、倍硫磷；氨基甲酸酯类 残杀威。根据当地用药情况进行药剂的选择。 （需要好好讨论） 4.1.5 设施和器材 配备抗性监测实验室，有测试室或光照培养箱（可以调解温湿度和光周期） ，蚊虫饲养室，有通风橱、烘箱、防蚊驱避剂、防蚊罩等防护用品，诱蚊灯、 吸蚊器、采集勺等蚊虫的采集器具。 有电子天平（感量为0.1毫克），200微升、1000微升移液器，200ml烧杯等。 有计算机、数据处理软件。 4.1.6 监测方法 4.1.6.1 幼虫浸渍法 以4龄初幼虫为测试对象，以丙酮将原药稀释，将待测药剂配置57个 系列浓度，即在200ml的烧杯中加入99ml脱氯水和1ml相应的药液（最后一次 稀释用水为溶剂），加入30头试虫，以200ml脱氯水为对照。试虫在25、 相对湿度为8010的条件下放置24小时，调查并记录各处理的死亡数。死 亡判断标准，用锐器触动不能逃逸的幼虫为死亡。试验重复3次。对照死亡 率超过20，试验无效。 4.1.6.2 成蚊监测法 药纸的制备 将白油和乙醚(AR)按 12 比例混合作为溶剂。杀虫剂按需要 量溶解其中，配成一定浓度（附录 4） ，吸取 2.14 毫升均匀滴于 16 厘米12.5 厘米的新华 1 号滤纸或其他质量相近的滤纸上。2 小时后待乙醚完全挥发即可 应用。 药纸制备后应在 6 小时内使用，如需要可以把 l020 张药纸用大小相同的 玻璃板夹紧，用橡皮膏把间缝封实，再装入黑纸袋中，在较低温下大约可以存 放一个月，但一经开启即不能储存，必须在两三天内用完，如果已经装入接触 筒，就只能用一次。 先把恢复筒接装在放隔板的一面，用吸蚊器吸取 12 只雌蚊吹入筒内，然 后关闭隔板，在隔板另一面装上已衬贴药纸的接触筒，把隔板抽开，将恢复筒 内蚊虫轻吹入接触筒，迅速关上隔板，将筒平放，即开始计算接触时间，完毕 后再抽开隔板将蚊虫再吹入恢复筒，关上隔板，将筒直放，用浸有 5葡萄糖 水的棉花团置于尼龙网上。室温 271，无论测定时间的长短，皆从接触完 毕后 24 小时计算死亡率。为了便于蚊虫在恢复筒内停留，可用白纸衬贴在筒内 上端 l2 或 23，空出下端，以便于观察死亡掉下的蚊虫。每剂量应至少测 40 只蚊，实验重复 3 次。 4.1.7 统计与计算 用POLO软件或DPS软件进行数据统计，获得致死中浓度（LC50）值及其 95置信限，LC90及其95置信限，毒力回归线的斜率b值。 4.2 家蝇抗药性监测 4.2.1 监测点的选择 监测点要考虑地理分布（经纬度、生境），每省选两个监测点进行。监测 点要相对固定。 4.2.2 试虫采集 成蝇100头以上、幼虫300条以上，以居民区为主。 4.2.3 监测药剂 拟除虫菊酯类 溴氰菊酯、氯氰菊酯、氯菊酯； 有机磷类 敌敌畏、辛硫磷、毒死蜱； 氨基甲酸酯类 残杀威。 4.2.3 设施和器材 有抗性测试室或光照培养箱，有能够控制温湿度的家蝇饲养室。 电子天平（感量 0.1 毫克），200 微升、1000 微升移液器，0.050.1L 微量点滴器；500mL 烧杯；饲养缸；养蝇笼。 在温度为 251，相对湿度 7080%的条件下饲养，成蝇羽化后供给奶粉 和白糖（比例为 1:1） 。 4.2.4 监测方法 用丙酮（分析纯）将原药配成 57 个系列浓度。取 35 日龄，体重为 1820mg 的家蝇成虫。把含有乙醚（分析纯）的棉球将指形管口堵塞、轻度麻 醉后，选健康雌虫，每处理 30 只置于平皿中，用点滴器（类型）将药液按浓度 由低到高的顺序，点滴于中胸背板上，放入加有少量奶粉的 500 mL 洁净的烧 杯中，以 5mL 烧杯内放置海绵供水，在温度为 251，相对湿度 60%70% 的条件下饲养 24 h。记录各处理的死亡虫数。对照以丙酮处理，死亡率超过 20时需要重新进行。试验重复 3 次。死亡判断标准：凡腹部上翻，六足抽搐， 用探针触之不能翻身爬行者判为死亡。 4.2.5 数据统计 用POLO软件或DPS软件进行数据统计，获得致死中浓度（LC50）值及其 95置信限，LC90及其95置信限，毒力回归线的斜率b值。 10 附录 1 淡色库蚊对化学药剂的抗药性测定原始记录表淡色库蚊对化学药剂的抗药性测定原始记录表 试虫名称： 药剂名称： 测定人： 虫态： ；虫龄： 测定培育温度： ；湿度： 虫源地名： 英文药名： 处理日期： 年 月 日至 月 日 测定室温： ；湿度： 重复 1重复 2重复 3合计处 理 浓 度 单位： 死虫数总虫数死虫数总虫数死虫数总虫数死/总 对照 / / / / / / / / / / / / / / / / 处理虫数 ； 毒力回归线： ；卡方 X2： 斜率 b 值（95置信限）： LC50： 95置信限： LC95： 95置信限： 备注： 11 附录 2 白纹伊蚊对化学药剂的抗药性测定原始记录表对化学药剂的抗药性测定原始记录表 试虫名称： 药剂名称： 测定人： 虫态： ；虫龄： 测定培育温度： ；湿度： 虫源地名： 英文药名： 处理日期： 年 月 日至 月 日 测定室温： ；湿度： 重复 1重复 2重复 3合计处 理 浓 度 单位： 死虫数总虫数死虫数总虫数死虫数总虫数死/总 对照 / / / / / / / / / / / / / / / / 处理虫数 ； 毒力回归线： ；卡方 X2： 斜率 b 值（95置信限）： LC50： 95置信限： LC95： 95置信限： 备注： 12 附录 3 中华按蚊对化学药剂的抗药性测定原始记录表中华按蚊对化学药剂的抗药性测定原始记录表 试虫名称： 药剂名称： 测定人： 虫态： ；虫龄： 测定培育温度： ；湿度： 虫源地名： 英文药名： 处理日期： 年 月 日至 月 日 测定室温： ；湿度： 重复 1重复 2重复 3合计处 理 浓 度 单位： 死虫数总虫数死虫数总虫数死虫数总虫数死/总 对照 / / / / / / / / / / / / / / / / 处理虫数 ； 毒力回归线： ；卡方 X2： 斜率 b 值（95置信限）： LC50： 95置信限： LC95： 95置信限： 备注： 13 附录 4 家蝇对化学药剂的抗药性测定原始记录表对化学药剂的抗药性测定原始记录表 试虫名称： 药剂名称： 测定人： 虫态： ；虫龄： 测定培育温度： ；湿度： 虫源地名： 英文药名： 处理日期： 年 月 日至 月 日 测定室温： ；湿度： 重复 1重复 2重复 3合计处 理 浓 度 单位： 死虫数总虫数死虫数总虫数死虫数总虫数死/总 对照 / / / / / / / / / / / / / / / / 处理虫数 ； 毒力回归线： ；卡方 X2： 斜率 b 值（95置信限）： LC50： 95置信限： LC95： 95置信限： 备注： 14 附录 5 中华按蚊测试基本情况记录 1. 测定人 ，单位： 。 测定日期： 年 月 日。 2. 试虫来源： 省（市、自治区） 、 区（县） 、 街道 （村） 、生境 。试虫名称（中文） ， （拉丁文） , 性别 ,龄期 ,生理状态:吸血、未吸血、半 怀孕、怀孕。 测试杀虫剂：药剂来源 ，有效期 年 月 日，药剂的储存条件 。 3. 背景资料 杀虫剂使用: 处理蚊帐；室内滞留喷洒；使用灭幼剂；农田用药. 试虫的采集方式：幼虫，F1 后代，人诱法诱捕，动物诱法诱捕， 室内捕获，灯诱法、其它。如果采集幼虫注明：稻田、雨水坑、河 边、生活污水、其它。 附录 6 测试杀虫剂的推荐使用浓度 附录 7 推荐使用敏感基线 附录 8 成蚊测定用药纸的计算 WH0 对纸上的剂量标准系以杀虫剂在白油中的浓度计算。如混合液的 l实 际为 0.3 3。按照这种方法，每平方米滤纸滴混合液应为 107.1 毫升，乙醚 全部挥发后仅残留白油 3 5.7 毫升，如含药量 1，即为 0.357 克。滤纸的面 积定为 1612.5=200 平方厘米，为 1 平方米的 150。WH0 多年来皆以杀虫剂 在溶剂中的百分率为剂量标准，如溴氰菊酯的标准剂量为 0.025，实际每平 方米药量 0.00 8 9 克。WH 0 专家委员会认为百分率与墙面药量无直接联系， 建议今后使用“克平方米 的计量单位。 15 附录 9 关于化学杀虫剂对昆虫的毒力回归线统计问题 建议使用对大家所公认的统计软件，这样可以大大提高计算速度，减少出 错的机会。基本具有快速、简便、准确的特点。常用的统计软件有 POLOPC，SAS，BA，DPS 等多种。 1. 使用国际通用的统计软件 POLOPC LeOra Software POLO-PC, Berkeley, Calif Russel R, Robertson J L, Savin N E. POLO: a new computer program for probit analysis. Bull Entomol Soc Am. 1977;2323:202213. 目前我们一直使用其它单位给的软件，其中有一些参数不能得到，我们正在连续一些国际有人，争 取尽快由正规渠道购买正版软件。 例 1 =F1 *deltamethrin 0 130 3 0.02 60 60 0.01 60 51 0.005 120 90 0.01125 60 60 0.0075 60 59 0.003 60 42 0.002 60 18 0.0056 30 19 0.00375 30 14 0.0025 30 11 0.0017 30 4 0.001 30 1 Index of significance for potency estimation: g(.90)=.08179 g(.95)=.12361 g(.99)=.25008 Effective Doses dose limits 0.90 0.95 0.99 LD10 deltamet .00122 lower .00073 .00061 .00034 upper .00166 .00175 .00196 LD50 deltamet .00309 lower .00248 .00232 .00191 upper .00367 .00382 .00417 LD90 deltamet .00782 lower .00632 .00607 .00557 upper .01088 .01213 .01701 16 F1 deltamet subjects 630 controls 130 log(L)=-282.4 slope=3.178+-.250 nat.resp.=.021+-.012 heterogeneity=4.01 g=.124 LD10=.001 limits: .001 to .002 LD50=.003 limits: .002 to .004 LD90=.008 limits: .006 to .012 2. 使用具有我国知识产权的 DPS 数据处理系统 统计结果和 POLO 的结果相近，经过我们对试验数据核实没有显著差异，即 计算的 LC50 及其 95置信限基本重叠。 例 2 唐启义，冯明光著。实用统计分析及其 PDS 数据处理系统。科学出版社， 2002。 17 附录 10 关于敏感基线的现状和设想 1 1 建立敏感性基线的重要性建立敏感性基线的重要性 基线是衡量抗药性强弱的尺度，基线不统一就不能在全国范围内进行比较、 分析。根据现有文献，很难找到一个统一的标准。以淡色库蚊对溴氰菊酯的使 用的敏感基线为例： 程璟侠等使用淡色库蚊德敏感品系其 LC50 为 0.24 g/mL（程璟侠等， 1998） ；本实验室长期保存的敏感品系 LC50 为 0.987g/mL，天津卫生防疫站 使用的淡色库蚊德敏感品系其 LC50 为 2.7g/mL；中国科学院上海昆虫所淡色 库蚊敏感品系的 LC50 值为 0.1g/mL。南京医科大学朱昌亮实验室，引入中国 科学院上海昆虫研究所后已在室内传 70 余代，检测对溴氰菊酯的半数致死浓度 (LC50)为 0.8g/L。 问题：1、溶剂对试验结果的影响。2、温度、湿度、光周期对试验结果的 影响。3、试虫龄期不同。 敏感基线是相对的，如何建立一系列有代表性的敏感基线，将是我们急待 解决的问题。研究目的不同可以基线的表现不同。如抗药性机制研究中使用的 敏感基线，一般使用未选育的相同种群的毒力回归线为基线，再使用一个大家 公认的敏感基线，尽量使其遗传背景一致。为了进行质量控制，全国性的抗药 性监测，敏感基线要有统一标准。 2 2 昆虫产生敏感性差异的原因昆虫产生敏感性差异的原因 抗药性的主要特点是分布上的区域性、抗性机制和及其遗传机制的多样性。 其主要原因有： （1）抗药性遗传多样性丰富。即使在没有接触任何药剂的情况下，也会对 同种杀虫剂表现出约十倍抗药性差异。 （例 1） 。 （2）药剂使用历史和交互抗性的影响。 由于用药背景不同，各地蚊虫对淡色库蚊表现出不同的敏感性水平，如河 北省冀州市对溴氰菊酯的敏感性资源保留较好，白淑萍等 1999 年发表的文章显 示，其敏感性比实验室的敏感品系还要敏感，其 LC50 为 0.02g/mL。 药剂的使用背景可以影响一个种群对杀虫剂的抗药性水平。如 DDT 与拟除 18 虫菊酯类杀虫剂有交互抗性，二十实际 80 年代出的测定表明，在很多没有使用 过拟除虫菊酯的地区也有抗药性发生。 （3）杀虫剂的作用机制多样，昆虫对药剂的敏感性程度由其行为习性、生 理生化和遗传物质的不同所综合决定的。即使是核酸水平的差异不大，还有细 胞质水平的差异（例 2） 。 3 3 如何建立敏感基线如何建立敏感基线 理论上，敏感基线是没有使用某种杀虫剂，或未使用具有类似作用机制杀 虫剂的前提下，采集靶标生物进行敏感性测定的结果。除了对新开发的药物以 外，尽量寻找受药剂污染少的区域，获得敏感品系。在我国的不同区域，包括 各实验室种群和野外种群，用统一的方法测定，获得敏感品系。 利用已经报道的相对敏感的毒力回归线为基线，但是到 1998 年以前 WHO 推荐使用区分计量法来测定抗性的强弱，由于该方法是单剂量处理试虫，试验 结果不稳定，适用于抗性发生的早期。随着拟除虫菊酯的大量广泛推广应用， 浓度对数与死亡率几率值回归方程毒力回归线法是国内外的首选方法。 例 1 ：Geographic Variation in Susceptibility of Chilo suppressalis (Lepidoptera: Pyralidae) to Bacillus thuringiensis Toxins in China FENGXIA MENG1, 2, KONGMING WU 1, 3, XIWU GAO2, YUFA PENG1, AND YUYUAN GUO1 Table 1. Sampling dates, host crops and development stages of C. suppressalis Collection locationsSite Map ref. Collection date Host plant Development stage Fuzhou, Fujian265N, 11919E1Aug. 2002Rice6th instar larvae Cangnan, Zhejiang2724N, 12023 E2Jul. 2002Rice3rd instar larvae Changsha, Hunan28N, 11315 E3Aug. 2002Rice6th instar larvae Wenzhou, Zhejiang2801N, 12040 E4Jul. 2001Rice4th instar larvae Chengdu, Sichuan30N, 10420 E5Aug. 2002Rice6th instar larvae Susong, Anhui3010N, 1168 E6Jul. 2002RiceEggs Hangzhou, Zhejiang3018N, 12010 E7Jul. 2002RiceAdults Jurong, Jiangsu3157N, 11910 E8Jun. 2002RiceEggs Xiangfan, Hubei32N, 1129 E9Jul. 2002R