毕业论文-铁离子和钙离子对杏鲍菇菌丝生长的影响研究(终稿).doc

届 别 2011 学 号 200714250126 毕业设计（论文）铁离子和钙离子对杏鲍菇菌丝生长的影响研究 目 录摘 要IABSTRACTII1 引言11.1 杏鲍菇11.2 金属元素11.2.1 铁元素在生物体中的作用21.2.2 钙元素在生物体中的作用21.3 选题的意义22 实验部分22.1 主要仪器与试剂32.1.1 主要仪器32.1.2 基本试剂和药品32.1.3 主要的玻璃仪器及其他实验用具32.1.4 菌种32.2 实验方法32.2.1 菌种的纯化32.2.2 菌种的活化42.2.3 铁元素对杏鲍菇菌丝生长的影响42.2.3 钙元素对杏鲍菇菌丝生长的影响63. 实验结果与分析93.1不同浓度铁元素对杏鲍菇菌丝生长的影响93.2不同浓度钙元素对元素杏鲍菇菌丝生长的影响93.3 讨论10参考文献12致谢13摘 要通过配制一系列不同Fe，Ca离子浓度的固体培养基培养杏鲍菇菌丝，观察其生长情况，得出微量元素对杏鲍菇菌丝生长的最适浓度。结果表明：当铁离子的浓度在1150ug/ml时，杏鲍菇的菌丝菌落的直径最大；当钙离子的浓度350ug/ml时，杏鲍菇的菌丝菌落的直径最大。通过研究Fe、Ca两种金属元素对杏鲍菇菌丝生长的影响，为进一步优化杏鲍菇菌丝培养基的研究提供可靠的实验数据。关键词：铁离子;钙离子；PDA培养基，杏鲍菇IABSTRACTThrough the preparation of a series of different Fe, Ca medium of elements in Pleurotus solid culture medium to observe the growth, derived trace elements on growth of Pleurotus optimal concentration. The results showed that: when the concentration of iron ions 1150ug/ml, the mushroom mycelium fastest increasing trend in the diameter of colony; when the concentration of calcium ions 350ug/ml, the mushroom mycelium fastest increasing trend in the diameter of colony. Through the research Fe, Ca two metal elements of Pleurotus, the influence of hypha growth for further optimization Pleurotus hyphae medium research provides reliable experimental data.Key words: Iron ion, Calcium ions, PDA medium，PleurotuseryngiiII1 引言171.1 杏鲍菇1.1.1杏鲍菇的生物学特性及研究动态杏鲍菇(Pleurotus eryngii) 是欧洲南部、非洲北部以及中亚地区高山、沙漠地带的一种品质优良的大型肉质伞菌, 属于伞形花科、刺芹属、刺芹枯死的植株上，所以又称为刺芹侧耳。该菌隶属于真菌门、真担子菌纲、伞菌目、侧耳属。杏鲍菇子实体单生或群生，菌盖初球形、半球形，后渐平展，浅黄白色。菌褶延生，密集，乳白色。菌柄偏生至侧生，中实，棒状到球茎状，表面平滑，浅黄白色，无菌环，孢子椭圆至纺锤形法国、意大利、印度都先后进行过杏鲍菇的栽培研究。Kalmar (1958) 第一次进行栽培实验1.2.3; Henda (1970) 在印巴交界的克什米尔高山上发现杏鲍菇, 并首次在段木上进行栽培;V essey (1971) 分离到杏鲍菇的菌株; Cailleux (1974) 用菌褶分离到杏鲍菇的菌株, 并试验栽培成功; Ferri (1977) 首先进行商业化栽培, 但只得到有限的成功。长期以来, 杏鲍菇在全世界鲜有商业化栽培。近年, 泰国、美国、日本、我国的台湾省采用调温、调湿的自动化生产工艺进行试验性栽培, 取得成功3。1.1.2杏鲍菇的营养价值与药用价值 杏鲍菇的肉质肥厚, 质地脆嫩, 特别是菌柄色泽雪白, 粗长, 组织极其致密, 结实, 脆感强, 其口感独具一格, 是味道最好的菇类之一, 被称为“平菇王”、“干贝菇”。前苏联的瓦西尔柯夫(1955) 称它为“草原的美味牛肝菌”, 可见味道鲜美之极,目前在国际市场上是人工栽培的食用菌中数量稀少, 价格最高的菇类。杏鲍菇的营养十分丰富, 植物蛋白含量高达25% , 含18 种氨基酸和具有提高人体免疫力、防癌抗癌的多糖。同时,它含有大量的寡糖, 是灰树花的15倍、金针菇的315倍、真姬菇的2倍, 它与胃肠中的双岐菌一起作用, 具有很好的促进消化、吸收功能.是一种口感好又具有药用功能的珍稀食用菌品种4。杏鲍菇营养丰富，每100g杏鲍菇干物质中含粗蛋白21.9g，含粗脂肪3.5g，符合高蛋白低脂肪的营养食品要求。杏鲍菇子实体的氨基酸已知含有17种，其中人体必需的8种氨基酸占氨基酸总量的42.0。矿物元素也很丰富，人体必需的微量元素钙和镁的含量特别高。此外，还含有铜、锌、锰、铁、钾、磷等元素，膳食中多食用杏鲍菇可提高人体免疫功能，有抗癌、降血脂、润肠胃、美容等功效，亦可促进人体对脂类物质的消化吸收和胆固醇的溶解，是老年人和心血管疾病下肥胖症患者理想的营养保健品5。1.2 金属元素1.2.1 铁元素在生物体中的作用铁氧化还原蛋白属于稳定的铁- 硫蛋白,存在于叶绿体中,是光合电子传递链中第一个稳定氧化还原化合物,是最初的电子受体。铁氧化还原蛋白具有很高的负氧化还原电位,能还原多种物质,如NADP+、O2，亚硝酸、硫酸盐和血红蛋白6。铁是卟啉分子的结构组分,诸如细胞色素、铁血红素、羟高铁血红素和豆血红蛋白均参与叶绿体中光合作用和线粒体中呼吸作用两个代谢过程中的氧化还原反应。呼吸作用中铁化合物将氧还原为水6。植物中大部分铁是以铁磷蛋白的形式储存,称为植物铁蛋白。细胞中约75 %的铁与叶绿体结合,叶片中高达90 %的铁与叶绿体和线粒体膜的脂蛋白结合。叶子中植物铁蛋白储存作为形成质体用,是进行光合作用所必需的6。铁是钼2铁蛋白和铁蛋白的组分,固氮酶缺铁就没有固氮活性。固氮酶在固氮微生物中处于N2固定过程中心，在大豆中,铁也能部分取代钼作硝酸还原酶的金属辅助因子6。1.2.2 钙元素在生物体中的作用钙是植物结构组分元素。主要构成果胶酸钙、钙调素蛋白、肌醇六磷酸钙镁等, 在液泡中有大量的有机酸钙, 如草酸钙、柠檬酸钙、苹果酸钙等7。钙是细胞伸长所必需。钙离子能降低原生胶体的分散度, 调节原生质的胶体状态, 使细胞充水度、粘滞性、弹性以及渗透性等适合于正常作物生长。钙与环状多肽结合而成的化学物质钙调素, 在控制植物细胞膜的功能和酶的活性方面起重要作用。钙是一些重要酶类的活化剂7。钙可促进硝态氮吸收, 与氮代谢有关, 它有助于减少植物中的硝酸盐, 中和植物中的有机酸, 对代谢过程中产生的有机酸有解毒作用。如钙可与产生的草酸形成草酸钙结晶, 避免草酸过多的不良影响7。钙对植株挺立和茎杆硬度起作用, 也影响籽粒形成, 许多种子中有肌醇六磷酸钙镁。固氮细菌大量需要钙8.1.3 选题的意义杏鲍菇是一种珍稀食用菌, 虽然人工栽培已获得成功, 但其菌丝生长缓慢, 生物转化率偏低9。国内外对杏鲍菇的研究虽有很多，但金属离子对杏鲍菇菌丝生长及产量的影响尚未见文献报道10。通过研究Fe、Ca两种金属元素对杏鲍菇菌丝生长的影响，得到最适合杏鲍菇菌丝生长的含Fe、Ca金属元素浓度的培养基对提高杏鲍菇的产量具有重要意义，另外将为进一步优化杏鲍菇菌丝培养基的研究提供可靠的实验数据。 2 实验部分 2.1 主要仪器与试剂2.1.1 主要仪器 立式压力蒸汽灭菌器 上海博迅实业有限公司医疗设备厂 0.22Mp,220V 无菌操作工作台 上海亚荣生化仪器厂电子万用炉 北京市永光明医疗仪器厂 DL-1型,1000W,220V电子分析天平 中国轻工业机器总公司常熟衡天 DF110型干燥箱 上海市实验仪器总厂 202-2型,3.2KW,220V,300 恒温生化培养箱 上海绿宇生物科技有限公司 RXZ-300D型 220V 0502.1.2 基本试剂和药品 氯化铁 分析纯,含量大于99% 北京化学试剂公司 无水氯化钙 分析纯，含量大于99% 北京化工厂 葡萄糖 分析纯 ，含量大于99.9% 天津市永大化学试剂开发中心琼脂 上海化学试剂站分装厂 马铃薯 郴州市场购买 2.1.3 主要的玻璃仪器及其他实验用具 烧杯,试管,玻璃棒,容量瓶（1000ml，100ml）,锥形瓶,移液管（100ml，10ml）,漏斗,纱布,接种针,酒精灯,标签纸,培养皿,棉花塞,牛皮纸，直径为0.5cm的打孔器。2.1.4 菌种 杏鲍菇母种 湘南学院化学与生命科学系微生物实验室提供2.2 实验方法2.2.1 菌种的纯化 斜面培养基制作配制PDA培养基：马铃薯（去皮）200g加水1000ml煮沸1520min后，用4层纱布过滤将滤液煮沸加入琼脂20g，葡萄糖20g，补足无菌水至1000ml，调节PH至55.5，趁热分装至试管中，每管10ml，进行加塞包扎。高压蒸汽灭菌：首先将内层锅取出,再向外层锅内加入适量的水,使水面与三角搁架相平为宜。放回内层锅,并装入待灭菌物品，旋紧灭菌锅上的螺栓,使螺栓松紧一致,勿使漏气。接通电源加热,同时打开排气阀,几分钟后排气阀内有冷空气排出,待冷空气完全排尽后, 关闭排气阀，让锅内的温度随蒸汽压力增加而逐渐上升。当锅内压力升到0.1MPa时, 约为121,控制热源,维持压力25min. 切断电源使温度自然下降,当压力表的压力降至0时,打开排气阀,排气完毕后,旋松螺栓,打开盖子,取出灭菌物品。搁置斜面：当培养基冷却至50左右,将试管带绵塞的一端搁在一根木棒上.搁置的长度要适合,使培养基形成的斜面的长度不超过试管总长的一半,冷却待用。（斜面培养基最好提前几天制作，防止水蒸气过重影响菌丝生长）无菌接种及培养无菌条件下，在超净工作台上从斜面母种中取黄豆粒大小的菌种块（带原培养基），在酒精灯下接种于用PDA培养基制作的斜面培养基中，置25恒温培养箱中，避光静置培养，培养2天后菌丝萌发，约15天后试管内长满菌丝，检查有无杂菌11。选择生长良好，生物特征明显，无杂菌的菌种用于接下来的实验12。2.2.2 菌种的活化活化菌种培养皿的制作配制PDA培养基：马铃薯（去皮）200g加水1000ml煮沸1520min后，用4层纱布过滤将滤液煮沸加入琼脂20g，葡萄糖20g，补足无菌水至1000ml，调节PH至55.5，趁热分装至试管中，每管15ml，进行加塞包扎,高压蒸汽灭菌。将用于培养用的培养皿用报纸包好，干热灭菌。在无菌操作下，在超净工作台内将灭好菌的试管冷却至5060时倒入冷却后的培养皿内（实验所用平板采用直径9cm的培养皿，装量15ml/皿），冷却静置待用。 接种及培养在超净工作台中，从纯化后的斜面菌种中，无菌操作，取黄豆粒大小的菌种块，无菌操作，接于活化菌种所用平板中，置25恒温培养箱中，避光倒置培养10天，作为实验菌种。2.2.3 铁元素对杏鲍菇菌丝生长的影响配制铁元素母液：精确称量氯化铁1g，用热水溶解，然后倒入1000ml容量瓶中，定容至1000ml为1mg/ml的铁元素母液；不同浓度铁元素溶液的的配制：用移液管从1mg/ml的氯化铁水溶液中分别取11ml,11.5ml,12ml,12.5ml,13ml于贴好标签的100ml的容量瓶中，分别定容至100ml，得到1100ug/ml ，1150ug/ml，1200ug/ml，1250ug/ml，1300ug/ml13 5个浓度的铁元素溶液。配制PDA培养基：马铃薯（去皮）200g加水1000ml煮沸1520min后，用4层纱布过滤将滤液煮沸加入琼脂20g，葡萄糖20g，补足无菌水至1000ml。不同浓度铁元素培养基的制作：分别用移液管取1ml各浓度的氯化铁溶液和蒸馏水于贴好标签的烧杯中，加培养基至50ml,调pH值55.5。然后趁热分装入试管，每管大约15ml，每个浓度装3支试管。试管分别贴好标签，高压蒸汽灭菌。在无菌操作下，在超净工作台内将灭好菌的试管冷却至5060时倒入干热灭菌冷却后的培养皿内，贴好标签，冷却静置待用。接种：在超净工作台内，无菌操作，将活化好的实验菌种用直径为0.5cm的打孔器沿同心圆打块14，用接种铲定量接种于实验所用培养基平板中央。将接种后的平板置25恒温培养箱中，避光静置培养10天。观察记录， 定时观测菌丝体的生长情况，记录菌落直径累计长度，并填写下列表格，同时观察菌丝浓密和菌落形态。培养20天后，结束培养。由测得的数据可以分别求出每组培养皿在不同培养时期时的平均直径，并填入表内，可以看出：在一定范围内，不同浓度的铁离子加入PDA培养基内都可以使杏鲍菇菌丝菌落直径增大，当铁离子浓度为1150ug/ml时，这种作用效果最明显，当超过这个浓度时作用效果变弱。表组1 铁离子对杏鲍菇菌丝生长的影响A 对照组B 1100ug/ml培养皿编号菌落直径长度（cm）3d 6d 9d 12d 15d1 0.8 1.5 2.3 3.5 5.62 0.7 1.3 2.3 3.4 5.43 0.8 1.4 2.5 3.3 5.0平均 0.77 1.4 2.37 3.4 5.3 C 1150ug/ml 培养皿编号菌落直径长度（cm）3d 6d 9d 12d 15d4 0.9 1.6 2.7 3.8 6.05 0.8 1.6 2.6 3.6 5.96 0.9 1.5 2.6 3.7 6.1平均 0.86 1.56 2.63 3.7 6.0培养皿编号菌落直径长度（cm）3d 6d 9d 12d 15d7 1.0 1.6 2.8 3.9 6.28 1.0 1.7 2.7 3.8 6.19 0.9 1.6 2.6 3.8 6.0平均 0.96 1.63 2.7 3.83 6.1E 1250ug/mlD 1200ug/ml培养皿编号菌落直径长度（cm）3d 6d 9d 12d 15d10 0.9 1.5 2.6 3.7 6.111 1.0 1.6 2.7 3.7 5.812 0.9 1.5 2.6 3.8 5.9平均 0.93 1.53 2.63 3.73 5.93E 1250ug/ml培养皿编号菌落直径长度（cm）3d 6d 9d 12d 15d13 0.8 1.6 2.6 3.7 6.014 0.9 1.5 2.7 3.6 5.815 0.8 1.5 2.5 3.5 5.7平均 0.83 1.53 2.6 3.6 5.83F 1300ug/ml培养皿编号菌落直径长度（cm）3d 6d 9d 12d 15d15 0.8 1.6 2.5 3.5 5.817 0.9 1.5 2.4 3.4 5.718 0.7 1.4 2.4 3.6 5.6平均 0.8 1.5 2.43 3.5 5.7 2.2.3 钙元素对杏鲍菇菌丝生长的影响配制钙元素母液：精确称量氯化钙1g，用热水溶解，然后倒入1000ml容量瓶中，定容至1000ml为1mg/ml的钙元素母液；不同浓度钙元素溶液的的配制：用移液管从1mg/ml的氯化钙水溶液中分别取3ml,3.5ml,4ml,4.5ml,5ml于贴好标签的100ml的容量瓶中，分别定容至100ml，得到300ug/ml ，350ug/ml，400ug/ml，450ug/ml，500ug/ml15 5个浓度的钙元素溶液。配制PDA培养基：马铃薯（去皮）200g加水1000ml煮沸1520min后，用4层纱布过滤将滤液煮沸加入琼脂20g，葡萄糖20g，补足无菌水至1000ml。不同浓度钙元素培养基的制作：分别用移液管取1ml各浓度的氯化钙溶液和蒸馏水于贴好标签的烧杯中，加培养基至50ml,调pH值55.5。然后趁热分装入试管，每管大约15ml，每个浓度装3支试管。试管分别贴好标签，高压蒸汽灭菌。在无菌操作下，在超净工作台内将灭好菌的试管冷却至5060时倒入干热灭菌冷却后的培养皿内，贴好标签，冷却静置待用。接种：在超净工作台内，无菌操作，将活化好的实验菌种用直径为0.5cm的打孔器沿同心圆打块，用接种铲定量接种于实验所用培养基平板中央。将接种后的平板置25恒温培养箱中，避光静置培养10天。观察记录， 定时观测菌丝体的生长情况，记录菌落直径累计长度，并填写下列表格，同时观察菌丝浓密和菌落形态。培养20天后，结束培养。由测得的数据可以分别求出每组培养皿在不同培养时期时的平均直径，并填入表内，可以得出：在一定范围内，不同浓度的钙离子加入PDA培养基内都可以使杏鲍菇菌丝菌落直径增大，当铁离子浓度为350ug/ml时，这种作用效果最明显，当超过这个浓度时作用效果变弱。表组2钙离子对杏鲍菇菌丝生长的影响 对照组 300ug/ml培养皿编号菌落直径长度（cm）3d 6d 9d 12d 15d1 0.6 1.4 2.4 3.3 5.4 2 0.7 1.4 2.5 3.3 5.23 0.8 1.5 2.5 3.2 5.4平均 0.7 1.43 2.47 3.26 5.33 培养皿编号菌落直径长度（cm）3d 6d 9d 12d 15d4 0.9 1.7 2.9 4.0 5.95 1.0 1.8 3.0 4.1 6.26 1.2 2.0 3.1 4.0 6.2平均 1.03 1.83 3 4.03 6.1 350ug/ml培养皿编号菌落直径长度（cm）3d 6d 9d 12d 15d7 1.0 1.9 3.0 4.2 6.38 1.2 2.1 3.2 4.3 6.49 1.1 2.2 3.1 4.0 6.2平均 1.1 2.07 3.1 4.17 6.3 400ug/ml 450ug/ml培养皿编号菌落直径长度（cm）3d 6d 9d 12d 15d10 1.0 1.8 2.8 3.9 6.011 1.1 1.9 2.9 4.0 6.012 1.0 2.0 3.2 4.2 6.1平均 1.03 1.9 2.97 4.03 6.03培养皿编号菌落直径长度（cm）3d 6d 9d 12d 15d13 0.9 1.6 2.8 3.7 6.014 0.8 1.7 2.8 3.9 5.815 0.9 1.7 2.9 3.9 6.1 平均 0.87 1.67 2.83 3.83 5.96 500ug/ml 培养皿编号菌落直径长度（cm）3d 6d 9d 12d 15d16 0.8 1.5 2.5 3.4 5.517 0.9 1.6 2.6 3.5 5.618 0.8 1.6 2.7 3.6 5.6平均 0.83 1.57 2.6 3.5 5.573. 实验结果与分析3.1不同浓度铁离子对杏鲍菇菌丝生长的影响 不同浓度铁离子对杏鲍菇菌丝的生长速度和长势有不同的影响。杏鲍菇在不同浓度铁离子培养基上的生长速度和长势见下表1和图一.表1：不同浓度铁离子对杏鲍菇菌丝菌落的影响铁离子浓度(ug/ml)菌落平均直径长度（cm）3d 6d 9d 12d 15d对照组 0.77 1.4 2.37 3.4 5.4 1100 0.86 1.56 2.63 3.7 6.0 1150 0.96 1.63 2.7 3.83 6.1 1200 0.93 1.53 2.63 3.73 5.931250 0.83 1.53 2.6 3.6 5.831300 0.8 1.5 2.43 3.5 5.7图一： 铁离子浓度对杏鲍菇菌丝生长影响由图1和表1可以看出用PDA培养基时，供试的5种不同浓度的铁离子浓度对菌丝的生长有影响，当铁离子浓度为1150ug/ml时，促进作用最明显。 3.2 不同浓度钙离子对杏鲍菇菌丝生长的影响不同浓度钙离子对杏鲍菇菌丝的生长速度和长势有不同的影响。杏鲍菇在不同浓度钙离子培养基上的生长速度和长势见表2和图二. 表2：不同浓度钙离子对杏鲍菇菌丝菌落的影响钙离子浓度(ug/ml)菌落平均直径长度（cm）3d 6d 9d 12d 15d对照组 0.7 1.43 2.47 3.26 5.33300 1.03 1.83 3 4.03 6.1350 1.1 2.07 3.1 4.17 6.3400 1.03 1.9 2.97 4.03 6.03450 0.87 1.67 2.83 3.83 5.96500 0.83 1.57 2.6 3.5 5.57 图二： 钙离子浓度对杏鲍菇菌丝生长的影响由图2和表2可知用PDA培养基时，供试的5种不同浓度的钙离子对杏鲍菇菌丝有影响，当钙离子浓度为350mg/ml时对杏鲍菇菌丝的生长促进作用最明显 3.3 讨论在一定浓度范围内，PDA培养基中添加铁离子均能促进杏鲍菇菌丝生长，当铁离子浓度为1150ug/ml时，和当钙离子浓度为350ug/ml时，杏鲍菇菌丝的生长速度比对照的基础培养基有显著增加，这为杏鲍菇菌丝的培养提供可靠的数据。但是本文还有以下问题值得更进一步深入研究。首先，本次实验，只做了单因素影响的实验，也就是说只研究了单一金属离子对杏鲍菇菌丝在PDA培养基中生长的影响，当两种金属离子同时加入PDA培养基时，其作用效果如何，还有待进一步研究。其次，本文只是在PDA培养基中研究不同浓度的金属离子对杏鲍菇菌丝的生长影响，而对于袋装工业化子实体生长过程中添加铁，钙离子是否有相同的影响，也有待于更深一步实验。最后，当人类食用了经过添加铁，钙离子的培养基培养出来的杏鲍菇后，是否会产生不良影响，这也是人们最关注的问题。所以更值得我们进一步研究。总之，本文的最终结果提供了在进一步优化杏鲍菇菌丝培养时的可靠数据，为今后的杏鲍菇培养做出了贡献。参考文献1宫志远, 于淑芳, 曲玲. 碳、氮营养对杏鲍菇菌丝生长的影响J. 中国食用菌 , 2002,(03)，24-252兰益.不同子实体组织部位分离及培养条件对影响杏鲍菇菌丝体生长试验N.广西轻工业，食品与生物.2007-09,106(9),20-213宫志远, 于淑芳, 曲玲. 营养和环境条件对杏鲍菇菌丝生长的影响J. 食用菌学报 , 2002,(03),13-174郭美英. 珍稀食用菌杏鲍菇生物学特性的研究J. 福建农业学报 , 1998,(03)，44-49 5李小平, 李鸣雷, 呼有贤等. 杏鲍菇生物学特性及栽培技术J. 陕西农业科学 , 2000,(07),35-366 曹恭, 梁鸣早. 铁平衡栽培体系中植物必需的微量元素J. 土壤肥料 , 2003,(04),46-47 7曹恭, 梁鸣早. 钙平衡栽培体系中植物必需的中量元素J. 土壤肥料 , 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your employer dismisses you and you think that you have been dismissed unfairly.For more information about dismissal and unfair dismissal, seeDismissal.You can make a claim to an employment tribunal, even if you haventappealedagainst the disciplinary action your employer has taken against you. However, if you win your case, the tribunal may reduce any compensation awarded to you as a result of your failure to appeal.Remember that in most cases you must make an application to an employment tribunal within three months of the date when the event you are complaining about happened. If your application is received after this time limit, the tribunal will not usually accept it.If you are worried about how the time limits apply to you, take advice from one of the organisations listed underFurther help.Employment tribunals are less formal than some other courts, but it is still a legal process and you will need to give evidence under an oath or affirmation.Most people find making a claim to an employment tribunal challenging. If you are thinking about making a claim to an employment tribunal, you should get help straight away from one of the organisations listed underFurther help.If you are being represented by a solicitor at the tribunal, they may ask you to sign an agreement where you pay their fee out of your compensation if you win the case. This is known as adamages-based agreement. In England and Wales, your solicitor cant charge you more than 35% of your compensation if you win the case.If you are thinking about signing up for a damages-based agreement, you should make sure youre clear about the terms of the agreement. It might be best to get advice from an experienced adviser, for example, at a Citizens Advice Bureau. To find your nearest CAB, including those that give advice by e-mail, click onnearest CAB.For more information about making a claim to an employment tribunal, seeEmployment tribunals.The (lack of) air up there Watch mCayman Islands-based Webb, the head of Fifas anti-racism taskforce, is in London for the Football Associations 150th anniversary celebrations and will attend Citys Premier League match at Chelsea on Sunday.I am going to be at the match tomorrow and I have asked to meet Yaya Toure, he told BBC Sport.For me its about how he felt and I would like to speak to him first to find out what his experience was.Uefa hasopened disciplinary proceedings against CSKAfor the racist behaviour of their fans duringCitys 2-1 win.Michel Platini, president of European footballs governing body, has also order