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前列腺炎动物模型研究进展 摘要前列腺炎动物模型有两大类即细菌性和非细菌性。 前者主要用大肠杆菌注入实验动物前 列腺器官中制得；后者主要用化学制剂或生物制剂诱 导而成。其中，生物制剂诱导的前列腺炎动 物模型具有较高的特异性，是较为理想的模型，它的 造模方法主要有雌激素诱导法和大鼠前列腺 蛋白结合免疫佐剂法两种。这些模型为前列腺炎相关 的探索性研究和开发应用性研究打下了必不 可少的坚实基础。 关键词前列腺炎；细菌性；非细菌性；动物模型 【中图分类号】Q9533 【文献标识码】A 【文章编 号】10048448(XX)03021 1-04 前列腺炎是男性的常见病和多发病，国外研 究表明：其发生率约为 4-l1，且多发生于青 壮年，可严重影响患者的家庭生活和精神生活。 由于研究方法、选择的研究对象不同，前列腺炎 概念的内涵各异。另外，前列腺炎的流行病学研 究也有待于深入。 1995 年，美国国立卫生研究院 fNIH)对前列腺 炎进行了重新分型，即 I 型：急性细菌性前列腺 炎；II 型：慢性细菌性前列腺炎； 型：慢性 非细菌性前列腺炎慢性骨盆疼痛综合征；型： 无症状的炎症性前列腺炎。四型前列腺炎中，只 有 I 型的病因是较明确的，临床治疗效果也确切， 占前列腺炎病人的 23，其他三型的前列腺炎 发病原因都不清楚。其中，I 型前列腺炎占临床 发病率的 9O 以上，是前列腺炎中最常见的类型， 又可进一步分为A 型和B 型。因此前列腺炎疾 病的发生机制具有深入探讨的必要性。 为了给探索性研究和开发应用性研究打下必不 可少的坚实基础，众多学者研究制作了各种前列腺 (收稿日期】XX-0117 【作者简介】李冬梅(1 970 一)，女，硕士研究生，从 事前列腺炎药 理毒理学研究 【通讯作者】孙祖越，Email：sunzy64 1 63corn 炎的动物模型，归纳起来主要分两大类川：一类为 细菌性前列腺炎模型，另一类为非细菌性前列腺炎 模型。现将这两大类前列腺炎动物模型制作的研究 进展综述如下。 细菌性前列腺炎模型 临床上细菌性前列腺炎约占所有前列腺炎病人 的 5 以下，主要致病菌为革兰阴性细菌，急性期感 染的细菌对抗生素敏感者，易被治愈。但大部分患 者前列腺液细菌培养阳性，且对抗生素不敏感，疾病 迁延难愈，临床上诊断为慢性细菌性前列腺炎。 11 急性细菌性模型 吴金虎等【2】用 SD 大鼠造模，具体的造模方法： 取体重 250“300 g SD 大鼠，腹腔麻醉，腹部去 毛消毒后，沿腹壁中线切开皮肤和肌肉，打开腹 腔，暴露前列腺，从前列腺背叶进针，注入 005 m1 人 肠杆菌(ATCC25922)5 210mcfuL，然后缝合腹 壁肌肉和皮肤。分别在造模后第 1、3、5 和 7 天 解剖大鼠，观察大鼠前列腺大小、硬度和色泽、 是否有粘连等，并做病理切片，显微镜下观察组 织细胞的改变，然后对造模的结果进行统计学分析 和评价。发现造模 3 d 后炎症反应非常严重，建议 改用低浓度的大肠杆菌液。Elkahwaji 等【3】用小鼠 造 212 实验动物与比较医学 Laboratory Animal and Comparative Medicine 模，每只小鼠从前列腺背叶注入 2106 或 210s 浓度的大肠杆菌 2O ul，5 d 后造模成功。该模型 的优点是简便易掌握，缺点是不同品系小鼠的炎症 表现程度不同，模型成功率有差异。 12 慢性细菌性前列腺炎的动物模型 此种模型还不成熟， 目前相关报道很少。山 长武等【 1 用表皮葡萄球菌、丙酸杆菌和 O2 琼 脂 混合，02 m1 注入 3 月龄的 Wistar 大鼠前列腺，手 术 7 d 后，造模成功。孙一呜 s1 用 1O，ml 的火肠 杆菌注入 Wistar 火鼠前列腺背侧叶，每只 O2 ml， 1 个月后造模成功。YongHyun Cho 等【6】用火肠杆 菌滴注在大鼠前列腺尿道部，4 周后，大鼠表现为 慢性细菌性前列腺炎。 也有学者认为，许多慢性非细菌性前列腺炎 其实存在细菌感染， 由于传统的细菌培养阴性， 故而被临床诊断为非细菌性的前列腺炎。赵岩等【1 建立基于 16SrRNA 基因的 PCR-Dot blot 细菌学检测 方法，结果 58 例病例中，传统的前列腺液细菌培 养结果只有 4 例阳性，而 PCR 法有 27 例阳性，其 中包括细菌学检测出来的阳性 4 例。 2 非细菌性前列腺炎模型 由于无菌性前列腺炎的病因尚未阐明，导致 此类前列腺炎动物模型研究种类繁多，包括自发性 的、年龄相关的、具有遗传倾向的以及自身免疫 性的前列腺炎等等。主要分为两大类： 21 化学制剂诱导模型 前列腺的黏膜层可以保护其下面的组织，免 于接触到可能反流到前列腺内的尿液中有害物质所 引起的损害，而反复的前列腺内尿液反流可以削弱 局部黏膜的屏障作用，导致非特异的化学性或免疫 性炎症，容易诱发局部的病原体感染。黏膜屏障 功能不完整可能是潜在的有害因素，例如反流的尿 液或其他有害因素接触到前列腺导管处下层的上皮 细胞， 导致细胞损伤和炎症。因此，前列腺黏膜 完整性的改变可能在前列腺炎的发病机制中起着重 要作用。这种损害作用可能是物理的或化学的因 素，甚至可能来源于自身的免疫性刺激，使炎症 持续存在。 根据上述原理，Lang 等【8使用化学刺激物 (乙醇和二硝基苯磺酸)来去除前列腺黏膜内表面 的屏障作用，并诱导了火鼠的急性无菌性前列腺 炎。戴苏林 ，1 用 1角叉菜胶生理盐水制作火鼠 急性非细菌性间质性前列腺炎模型。张 强等【l0】 注射生理盐水加消痔灵制作大鼠前列腺纤维增生性 炎症的病理模型。 无论导致急性炎症的因素或试剂是什么，前 列腺管道的黏膜覆盖状态在启动前列腺炎中起关键 作用，前列腺的自身正常菌群可能在某些特定的条 件下，例如黏膜完整性遭到破坏时变成致病原。 但这种有理化冈素诱导的前列腺炎与临床上的前列 腺炎病理表现有很大差异，不是一种理想的前列腺 炎模型。 22 生物制剂诱导模型 221 雌激素诱导的大鼠模型许多慢性炎症性疾 病被认为是与内分泌和免疫系统相互作用有关，雌 激素在对炎症和自身免疫性疾病的易感性上起重要 作用。但是还不清楚激素水平的变化是如何影响炎症 性疾病的，雌二醇对不同种类组织细胞的作用也多种 多样。激素诱导的动物模型的炎症反应或许可以回 答这些问题。雌激素诱导的大鼠前列腺炎的组织病 理学改变与自发性非细菌性前列腺炎非常相似。雌 激素诱导的前列腺炎症提供了一个有用的动物模型 系统，可以用来研究内分泌激素水平的相互作用。 Harris 等】硅胶管埋植在将雄性 Wistar 火鼠 (200225 g)皮下，其中 2 cm 的硅胶管内放置固体 的双氢睾酮(DHT)，1 cm 的硅胶管内放置固体的雌 二醇(E：)，让大鼠慢性接触雌二醇(Ez)可以诱导前 列腺的lJlr-(Lp 的炎症。雌激素处理大鼠 24 周 后，前列腺的炎症首先出现于侧叶，然后是背侧 前列腺，炎症细胞首先在基质中出现，然后出现 在腺泡中。直至处理后 10 周，才在前列腺的腹侧 出现部分炎症。由于炎症前的基因转录水平上调与 诱导的前列腺炎的特异反应具有一致性的特点，表 明这些基因的转录水平可以用于监测激素诱导的前 列腺的炎症反应。为了进一步了解雌激素对前列腺 的重要作用，可以利用这个动物模型来研究雌激素 结合的靶细胞和触发的早期信号系统。 Wilson 等【I2在 90 日龄去势 Wistar 大鼠并皮下 埋植 1 cm 的硅胶管内植 17p 雌二醇(E：)】8 d，22 d 时给予双氢睾酮(DHT)或睾酮(T)，全部对照组和实 验组的大鼠都在 36d 后处死。结果，放 E：组的大 鼠前列腺侧叶管腔内出现大量的中性白细胞侵润， SepXX27(3) 实验动物与比较医学 Labomtory Animal and Comparative Medicine 213 间质有单核细胞渗出，表现出明显的炎症。基质 金属蛋白酶(MMP)活性显著增强，包括 MMP2 和 MMP 一 9 的活性形式和酶原形式。这些金属蛋白酶 的活性在给予 T 后显著减弱，炎症也减轻。而给 予 DHT 的大鼠金属蛋白酶活性只有轻度减弱，炎 症没有减轻。但在腹叶和背叶，E2 对 MMP 的活 性影响很小。所以，评价 MMP2，MMP7 和 MMP9 在前列腺炎侧叶的活性可以帮助我们判断上 皮萎缩利组织损伤的程度。 Kamijo 等【I31 采用比较简单的方法同时进行大鼠 去势和雌二醇诱导出慢性非细菌性前列腺炎的火鼠 模型。选择 10 月龄的 Wistar 大鼠常规饲养，在乙醚 麻醉下进行去势手术。手术后第 1 天开始给火鼠后 背部皮下注射 1713 雌二醇，剂量是 025 mg(2 mlkg)， 用芝麻油稀释，连续 30 d 注射诱导出大鼠前列腺 的炎症反应。 222 前列腺组织蛋白结合免疫佐剂法诱导的大、 小鼠免疫性模型随着现代组织化学和免疫学的进 展，许多专家学者越来越倾向于前列腺炎的发生与 自体免疫有关的学说，叶伟成等14l 采用纯化的 SD 大鼠前列腺组织蛋白结合免疫佐剂方法初步建立了 慢性非细菌性前列腺炎的小鼠模型，小鼠的胸腺、 颌下腺和脾脏没有类似于前列腺的病理改变，说明 模型具有较好的特异性，前列腺的病理改变较接近 于临床，基本上符合慢性前列腺炎的动物模型要 求。主要的方法步骤包括：1、抗原制备：取 240 260 g 的 SD 雄性大鼠，无菌获得前列腺组织，清洗， 匀浆，取上清液，蛋白定量：2、免疫佐剂：完全弗氏 佐剂和百白破疫苗：3、分组：68 周龄 C57BL6 小 鼠 32 只，随机分为 4 组，皮下或腹腔内注射；4、观 察：分别于造模后 6 周和 8 周解剖小鼠前列腺。结 果：造模 6 周的小鼠仅有高剂量组产生急性炎症表现； 造模 8 周的小鼠高剂量组产生不同程度的慢性炎症 和增生的病理表现。 周晓辉等I5】用大鼠前列腺蛋白提纯液辅以双重 免役佐剂造成实验性慢性非细菌性前列腺炎大鼠模 型。主要方法：l、取 240300 g 雄性 Wistar 大 鼠，脱颈椎处死，无菌获取前列腺组织，蛋白定 量，最后用 01 molL pH 72 的 PBS 稀释为 5、l0 和 15 mgml 浓度。2、取 3 月龄 Wistar 雄性大鼠， 0、30 d 腹腔注射百白破疫苗，并于皮内多点注射 5、l0 和 15 m II11 的大鼠前列腺蛋白提纯液及完全 弗氏佐剂(FCA)。结果：高剂量模型组大鼠的肿瘤 坏死因子(TNF仪)，白介素113(L1B)，L2，诱 导型一氧化氮合成酶(iNOS)等炎性基因表达产物明 显增高，光镜、电镜及原位杂交等检测结果表现 出明显的慢性炎症病理变化。故得出结论：皮内 注射浓度为 1 5 mgml 的大鼠前列腺蛋白提纯液与 FCA 乳剂(比例为 1：1)的混悬液 10 ml，辅以大 鼠腹腔注射百白破疫苗 05 删可造成免疫性慢性前 列腺炎大鼠模型。 3 小结 综上所述，前列腺炎的动物模型目前还不完 善。其中，用生物制剂诱导的前列腺炎模型，特 别是大鼠前列腺蛋白提取液结合免疫佐剂法造成的 免疫性慢性前列腺炎的动物模型， 比较符合临床 的实际病理情况，是一种有发展前途的造模方向。 【参考文献 【1郭应禄，李宏军 前列腺炎【MXX：人民军医出 版礼 XX80-99 【2吴金虎张晓燕肖雨清，等 大鼠前列腺炎模型的建 立【J_山 西医药杂志，XX，35(3)：l93 一 l94 【3 Elkahwaji JE，Ott CJ，Janda LM，et al Mouse model for acute bacterial prostatitis in genetically distinct inbred strainsJ UROLOGY，XX，66(4)：883 【4 山长武，曹卉，王旭，等 慢性前列腺炎动物模 型复制 【J_济宁医学院学报，XX，24(2)：13-14 【51 孙一呜，刘丽，李英林，等前列腺水丸对慢性 细菌性前 列腺炎大鼠血清 IL 一 6 和 TNF 一 0【水平的影响J 中国男科 学杂志，XX，l 2(5)：470-472 【6Yong-Hyun Cho，Seung-Ju Lee，Ji Youl Lee，et a1Antibacterial efect ofintraprostatic Zinc injection in a rat model ofchronic bacterial prostafitisJInternational Journal of Antimicrobial AgentXX，l 9：576-582 【7赵岩，鹿占鹏，沈 明，等、PCRDot blot 在慢 性前列腺 炎诊断中应用的研究 fJ】中国男科学杂志， XX，l9(1)：14 一 l7 【8 Lang MD，Nickel C，Olson ME，et a1Rat model of experimentally induced a bacterial prostatitisJProstate，XX， 45：201 【9】戴苏林，朱进，魏秀德，等前列腺康栓对大鼠 实验性非 细菌性前列腺炎的抗炎作用【J1中国中药杂志， l99l，l6 (9)：562564 f1O】张亚强中药前列腺汤对实验性前列腺炎病理学 模型的 214 实验动物与比较医学 Lab。 rat。ry Animal and ComparatjVe MeAicine Sep XX27(3