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文档简介
1、课题1 大肠杆菌的培养与分离,北京市怀柔区第一中学 曹文竹,第一部分 微生物的利用,课题背景,如何保持培养物纯净呢?,?,资料: 19世纪中期,关系到法国经济命脉的酿造业曾一度遭受毁灭性的打击。在生产过程中,出现了葡萄酒变酸、变味的怪事。经过一番研究,法国科学家巴斯德发现,导致生产失败的根源在于发酵物中混入了杂菌。由此人们认识到保持培养物纯净的重要性。,资料卡,无菌技术:,1.消毒与杀菌 消毒:消除表面或内部的部分微生物 杀菌:杀死内外所有微生物,包括芽孢和孢子,2.常用方法 巴氏消毒法:牛奶 化学药剂:双手、水源 灼烧灭菌:接种环等(金属) 干热灭菌:160-170 1-2h (玻璃器皿、金
2、属) 高压蒸汽灭菌:121 100KPa 15-30min(培养基) 紫外线消毒法:30min(空气中的微生物) 酒精灯火焰附近操作;超净工作台上操作。,温故知新,回忆有关细胞的元素组成、分子组成的知识,想一想微生物应该生活在什么环境中呢?,维生素 0.1ml 与生长有关,大肠杆菌的分离纯化,新课探讨,阅读教材P16-17,回答问题: (1)你能归纳培养基的配制流程吗? (2)配置培养基是应该注意什么?,结晶紫中性红胆盐琼脂,配制培养基的过程:,计算, 称量, 溶化(溶解),灭菌,倒平板,注意: 1.培养基冷却至50左右倒平板 2.倒平板时应在酒精灯附近操作,资料卡,培养基的分类:,1.物理性
3、质 液体培养基:菌种培养或工业生产 半固体培养基:观察微生物运动 固体培养基:微生物的分离、鉴定、计数 2.组成成分 合成培养基:分离、鉴定微生物 天然培养基:生产 3.用途: 选择培养基:缺某种物质或多加某种物质 鉴别培养基:加指示剂或化学药品,资料卡,资料卡,配置培养基:,溶化(溶解) 分装,资料卡,倒平板:,资料卡,倒平板:,资料卡,接种:,接种针灼烧灭菌 平板划线,资料卡,大肠杆菌的纯化方法:,稀释涂布平板法 平板划线法,大肠杆菌的分离纯化,学生活动,1.平板划线法或稀释涂布平板法纯化大肠杆菌 要求: (1)每四人一组,每组均需完成两种方法; (2)组内成员可任选一种分离方法。 2.培养 将培养皿倒置放在培养箱内,于36培养24h。,结晶紫中性红胆盐琼脂,课题1 大肠杆菌的培养与分离,作业布置,思考: 1.为什么培养皿在培养箱内要倒置呢? 2.菌落是种群吗? 作业: 1.对比实验,说出自己操作过程中的不足
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