微生物知识与洁净区污染控制培训教案.ppt

1、1,微生物知识初学者2014年01月11日,2,目的,微生物知识学习 药品生产中微生物控制,3,微生物基本知识（第一部分）,一、什么是微生物 二、微生物的特征 三、微生物的生物多样性 四、微生物的发现 五、微生物的主要家族 六、微生物生命活动的基础和营养类型 七、微生物的生长规律,4,一、什么是微生物？,定义：微生物是一类肉眼不能直接看见，必须借助光学显微镜或电子显微镜放大几百倍、几千倍甚至几万倍才能观察到的微小生物的总称。,5,它们是一些个体微小，构造简单的低等生物。大多为单细胞，少数为多细胞，还包括一些没有细胞结构的生物。 属于原核生物类的细菌、放线菌、蓝细菌、支原体、立克次氏体； 属于真

2、核生物类的真菌、原生动物和显微藻类。 而属于非细胞生物类的病毒、类病毒和朊病毒（又称朊粒）等则需借助电子显微镜才能看到。,6,二、微生物的特征,微生物一般指体形在0.1毫米以下的小生物，个体微小的特性使微生物获得了高等生物无法具备的五大特征： 体积小面积大； 吸收多转化快； 生长旺繁殖快； 适应强变异频； 分布广种类多。,7,1、体积小，面积大,微生物的个体极其微小，必须借助显微镜放大几倍、几百倍、上千倍，乃至数万倍才能看清。 杆菌的宽度是0.5微米，因此80个杆菌“肩并肩”地排列成横队，也只有一根头发丝的宽度。杆菌的长度约2微米，故1500个杆菌头尾衔接起来仅有一颗芝麻长。 物体的表面积和体

3、积之比称为比表面积。大肠杆菌的比表面积是人的30万倍。,8,2、吸收多，转化快,微生物的食谱非常广泛，凡是动植物能利用的营养，微生物都能利用，大量的动植物不能利用的物质，甚至剧毒的物质，微生物照样可以视为美味佳肴。 如大肠杆菌在合适条件下，每小时可以消耗相当于自身重量2000倍的糖，而人体则需要40年之久。,9,3、生长旺，繁殖快,微生物以惊人的速度“生儿育女”。 例如大肠杆菌在合适的生长条件下，12.520分钟便可繁殖一代，每小时可分裂3次，由1个变成8个。每昼夜可繁殖72代，由1个细菌变成重约4722吨，细菌数量的翻番只能维持几个小时，不可能无限制地繁殖。因而在培养液中繁殖细菌，它们的数量

4、一般仅能达到每毫升1-10亿个，最多达到100亿。尽管如此，它的繁殖速度仍比高等动植物高出千万倍。微生物的这一特性在发酵工业上具有重要意义，可以提高生产效率，缩短发酵周期。,10,4、适应强，变异频,多数细菌能耐0196的低温； 在海洋深处的某些硫细菌可在250300的高温条件下正常生长； 一些嗜盐细菌甚至能在饱和盐水中正常生活； 产芽孢细菌和真菌孢子在干燥条件下能保藏几十年、几百年。 由于微生物繁殖快，也可在短时间内产生大量变异的后代。正是由于这个特性，人们才能够按照自己的要求不断改良在生产上应用的微生物，如青霉素生产菌的发酵水平由每毫升20单位上升到近10万单位，利用变异和育种得到如此大幅

5、度的产量提高。,11,5、分布广，种类多,微生物在地球上几乎无处不有，无孔不入，人的皮肤上，口腔，肠道里都有许多微生物。 微生物聚集最多的地方是土壤，土壤是各种微生物生长繁殖的大本营，约占微生物总量的70-90%，任意取一把土或一粒土，就是一个微生物世界，不论数量或种类均最多。在肥沃的土壤中，每克土含有20亿个微生物，即使是贫瘠的土壤，每克土中也含有35亿个微生物。 空气里悬浮着无数细小的尘埃和水滴，它们是微生物在空气中的藏身之地。哪里的尘埃多，哪里的微生物就多。 迄今为止，我们知道的微生物约有10万种，目前已知的种类只占地球上实际存在的微生物总数的20%，人类生产和生活中仅开发利用了已发现微

6、生物种数的1%。,12,三、微生物的生物多样性,微生物的多样性包括所有微生物的生命形式、生态系统和生态过程以及有关微生物在遗传、分类和生态系统水平上的各个方面。 微生物有着许多独特的代谢方式，如自养细菌的化能合成作用、厌氧生活、不释放氧的光合作用、生物固氮作用、对复杂有机物的生物转化能力、分解氰、酚、多氯联苯等有毒物质的能力，抵抗热、冷、酸、碱、高渗、高压、高辐射剂量等极端环境的能力，以及病毒的以非细胞形态生存的能力等。微生物与生物环境间的相互关系也表现出多样性，主要有互生、共生、寄生、拮抗和捕食等关系。,13,四、微生物的发现,1、微生物学的开山祖列文虎克：1673年荷兰人列文虎克用自己制造

7、的显微镜观察发现了杆菌、球菌和原生动物。还第一次描绘了细菌的运动。 2、微生物学的奠基人巴斯德：法国科学家巴斯德解决了葡萄酒变酸问题、发明了巴斯德灭菌法、医治了蚕病、炭疽病和疯狗病而成为伟大的微生物奠基人。 3、微生物方法学和医学微生物学的奠基人科赫：德国科学家科赫发现了炭疽杆菌、结核杆菌、霍乱弧菌、鼠疫杆菌，并第一次用科学的方法证明某种特定的微生物是某种特定疾病的病原。并体外成功地培结核养了细菌。于1905年，获得了诺贝尔医学和生理学奖，主要是为了表彰他在肺结核研究方面的贡献。,14,五、微生物的主要家族,（一）原核微生物： 原核生物的细胞中没有细胞核结构，只有明显核区，外面无核膜包围。包括

8、：细菌、放线菌、蓝细菌、支原体、立克次氏体、衣原体和螺旋体等。 以下以细菌为例和大家一起学习。,15,细菌,（1）细菌的形态和大小： 细菌是单细胞生物，即一个细胞就是一个个体。细菌的基本形态有三种：球状、杆状和螺旋状，分别被称为球菌、杆菌和螺旋菌。,16,细菌的各种形态,17,（2）细菌细胞的构造：,细菌细胞的基本结构是一般细菌共有的结构，包括细胞壁、细胞质膜、拟核、细胞质。 细胞壁是位于细胞最外面的一层坚韧而略具弹性的结构层，主要由肽聚糖构成，有固定外形和保护细胞等多种功能。 用革兰氏染色的方法，可将细菌分为革兰氏阳性菌（G菌）和革兰氏阴性菌（G菌）两大类。,18,细菌的细胞示意图,19,（

9、 3）细菌的繁殖：,二分分裂繁殖是细菌最普遍、最主要的繁殖方式。,20,（4）细菌的菌落：,单个或少数细菌细胞生长繁殖后，会形成以母细胞为中心的一堆肉眼可见、有一定形态构造的子细胞集团，这就是菌落。 细菌菌落常表现为湿润、粘稠、光滑、较透明、易挑取、质地均匀以及菌落正反面或边缘与中央部位颜色一致等。细菌的菌落特征因种类而异。 依据各种细菌在一定条件下形成的菌落特征具有一定的稳定性和专一性，这是衡量菌种纯度，辨认和鉴定菌种的重要。,21,细菌的菌落特征示意图,22,（二）真核微生物：,真核微生物是一大类具有真正细胞核，具有核膜与核仁分化的较高等微生物，细胞内有线粒体等较复杂的细胞结构。 这类微生

10、物包括酵母菌、霉菌、微细藻类、原生动物和大型真菌等。,23,1、酵母菌：,是一类单细胞的真核微生物的通俗名称。 其繁殖方式包括无性繁殖和有性繁殖。无性繁殖方式有芽殖和裂殖，芽殖是酵母菌最普遍的繁殖方式。 酵母菌是人类实践中应用较早的一类微生物，如酿酒，发酵等。 酵母菌的细胞里含有丰富的蛋白质和维生素。 酵母菌在自然界中分布很广，喜欢在偏酸性且含糖较多的环境中生长。,24,2、丝状真菌-霉菌：,真菌是微生物中的一大类群，属于真核微生物。 霉菌是丝状真菌的俗称，意为“发霉的真菌”，它们往往能形成分枝繁茂的菌丝体。 喜欢生活在潮湿温暖的地方，呈肉眼可见的绒毛状、絮状或蛛网状菌落。 霉菌主要经过菌丝断

11、裂、形成各种无性孢子的无性繁殖和有性繁殖。,25,（三）微生物按需氧状况分类：,分为专性好氧、兼性好氧、微需氧和专性厌氧菌微生物。,26,六、微生物生命活动的基础和营养类型,1、微生物生命活动的基础是营养，需要的营养素可分为六大类：碳源、氮源、能源、无机盐、生长因子和水。 2、微生物的营养类型：可以分成光能自养、光能异养、化能自养和化能异养4种。,27,七、微生物的生长规律,微生物整个生长过程可以分为4个阶段 延滞期：细胞不分裂，细胞变大，细胞内RNA含量增高，原生质呈碱性，合成代谢活跃，易合成新的诱导酶，对外界环境变化敏感。接种物中死细胞较多或培养基不丰富时延滞期较长。 对数期：细胞分裂最快

12、，细胞平衡生长，酶系活跃，代谢旺盛。生长速率由营养成分和培养条件决定。,28,稳定期：新繁殖的细胞与死亡细胞数目相等，菌体产量达到最高，细胞开始储藏糖原、脂肪等储藏物，产芽孢的开始形成芽孢，开始合成次生代谢产物。可能由于营养物的消耗或抑制生长的代谢产物积累，细胞停止增殖，但仍存活。 衰亡期：死亡细胞数目超过新生细胞，细胞形态多样，细胞开始自溶，开始释放次生代谢产物。,29,药品生产中微生物控制（第二部分）,为什么要对药品生产进行微生物控制？ 微生物可以致病。特别是注射剂的危害。 如果细菌得到了必要的养料、一定量的水份和合适的温度，它们就能迅速繁殖，它们繁殖的速度快得惊人。通常一个细菌在仅仅24

13、小时后可产生出281兆(百万)个的细菌。,30,主要的微生物污染源,空气 水 设备 原辅料 人员,31,微生物的污染途径,自身污染：由于患者和员工自身携带微生 物而污染。 接触污染：由于和非无菌的用具、器械或 人的接触而污染。 空气污染：由于空气中所含微生物的沉降、 附着或被吸入而污染。 其他污染：由于其他因素（如昆虫）而污染。,32,控制微生物的污染途径,有效地阻止室外的污染侵入室内。 迅速有效地排除室内已发生的污染。 控制污染源，减少污染发生量。,33,控制微生物污染途径,污染途径及解决措施 人、机、料、法、环,34,控制微生物污染途径,一、人 在洁净室中人体是主要菌源之一，不仅皮肤带有细

14、菌(其中约l为病原性的)，人通过呼吸、讲话、操作也会散布细菌。,35,人员不良行为所产生的污染:,当有如下行为时将相应增加微粒的产生量: - 吸烟者的呼吸 500% 喷嚏 2000% 搓手 200% 行走 200% 跺脚 5000%,36,控制微生物污染途径,法规相关规定： 洁净生产区人员不能化妆和佩戴饰物。 生产区、仓储区应当禁止吸烟和饮食，禁止存放食品、饮料、香烟和个人用药品等非生产用物品。 企业应当采取适当措施，避免体表有伤口、患有传染病或其他可能污染药品疾病的人员从事直接接触药品的生产。 操作人员应当避免裸手直接接触药品、与药品直接接触的包装材料和设备表面。,37,控制微生物污染途径,

15、洁净服穿戴基本要求,1、将袖口套入手套 2、领口不准敞开 3、口罩必须遮挡住鼻孔 4、内帽必须遮挡住头发，不许外露。 5、外帽带在保持舒适的前提下，尽量系紧。,38,口罩的用途,1、防止人体分泌物及病菌污染洁净空气 2、防止药物粉尘进入人体 3、防止过敏体质人员因鼻腔受刺激打喷嚏，将大量致病菌喷出（一次喷嚏平均含有30万个细菌） 4、必须将口罩罩住鼻孔,39,更衣和四勤,40,更衣消毒的目的：,微生物想混进去，没门！,41,控制微生物污染途径,相关文献摘录 洁净室内人员的流动所带入的粒子不受空气过滤系统的影响，行为是不规则的、随机的，不符合空气中粒径分布的统计学规则。这些粒子主要是来自皮肤和头

16、发碎屑产生的微粒，皮肤表面散发的微粒，呼吸道呼出的微粒，沉积在体表的微粒，或者由于人员在洁净区移动的速度超过洁净空气的流速而把微粒带入洁净区。洁净室内的发尘量， 90%左右来自人员。为此，必须采取隔离人体污染源的卫生措施。,42,洁净区行为要控制，要缓慢移动，保持 好的身体姿势，轻声谈话，减少交谈频 率等。 人的行为是维持洁净区平衡不可或缺的,洁净室人员操作幅度和谈话,43,个人卫生（洗手消毒）,44,手的卫生,每只手可携带40万个细菌；刚洗过的手，每平方厘米也可检验出3200个细菌 。 110万个细菌/1cm2 皮肤表面!,45,洗手的重要性:,用流水（如自来水）洗手，能使手上的致病微生物减

17、少80%； 用皂液充分洗手，再用自来水冲洗能使致病微生物减少95%。 洗手后正确使用消毒剂能使致病微生物减少到99%。,46,使用75%乙醇溶液消毒的原因,手部消毒：使用75%乙醇溶液进行喷洒消毒，消毒时必须保证手部经清洁且干燥。通过搓洗，保证无死角。 酒精消毒原理：酒精之所以能消毒是因为酒精能够吸收细菌蛋白的水分，使其脱水变性凝固，从而达到杀灭细菌的目的。如果使用高浓度酒精，对细菌蛋白脱水过于迅速，使细菌表面蛋白质首先变性凝固，形成了一层坚固的包膜，酒精反而不能很好地渗入细菌内部，以致影响其杀菌能力。75%的酒精与细菌的渗透压相近，可以在细菌表面蛋白未变性前逐渐不断地向菌体内部渗入，使细菌所

18、有蛋白脱水、变性凝固，最终杀死细菌，酒精浓度低于75%时，由于渗透性降低，也会影响杀菌能力。,47,洗手的正确方法,48,手的细菌对照实验,49,未洗的手,50,漂洗的手(只用清水),51,洗净的手(用皂液),52,洗净的手(用消毒剂),53,正确洗手的步骤：,1. 手心搓手心； 2. 手心搓手背； 3. 手指交叉； 4. 手心搓拇指； 5. 手心搓手腕。,54,其它 净化工作服处理运送方式、无菌手套的处理及穿戴、消毒剂更换配制、维修人员操作（包括净化）。,55,控制微生物污染途径,二、环 洁净度测定包括： 悬浮粒子 微生物 - 浮游菌 - 沉降菌,56,控制微生物污染途径,环需要注意或控制的部分 A、粒子指标的控制。 B、微生物指标的控制。,57,控制微生物污染途径,三