单克隆抗体药物的临床前研发

1、,单克隆抗体药物的临床前研发,背景知识,大分子药物生物制药,始于1982年用重组DNA技术进行生物合成的人胰岛素(rHI),www.51pp 51ppt模板网 搜集整理,举例 激素 (胰岛素，胰高血糖素，生长激素) 造血生长因子(Erythropoietin, colony stimulating factors) 干扰素 (Interferons-, -, -) 白介素 (Interleukin-2) 疫苗 (Hepatitis B surface antigen) 肿瘤坏死因子 治疗用酶 单克隆抗体,来源于细菌、酵母、昆虫、植物和哺乳动物细胞等各种表达体系,研发流程,靶点的发现与选择,单克

2、隆抗体的制备,药效筛选,药动评价,临床试验,靶点的发现和选择,集中在细胞死亡通路、血管生成、细胞周期调控信号转导等方面 例如： CD20 :表达于B细胞和成熟B细胞，调节B细胞增殖、分化；在95%以上的B细胞性淋巴瘤中表达 抗CD20单抗可用于治疗B细胞非霍奇金淋巴瘤 单抗药物工作机理： 抗体依赖性细胞介导的毒作用( antibody dependent cell-mediated cytotoxicity, ADCC) 补体依赖性细胞毒作用( complement dependent cytotoxicity, CDC) 中和细胞因子,单抗药物作用机理,经典靶点,单克隆抗体的制备,抗体的人源

3、化 嵌合抗体：应用DNA 重组技 术将小鼠抗体基因上的可变区与人抗体基因的恒定区重组, 再将重组后的基因导入骨髓瘤细胞中表达 CDR 移植抗体（改型抗体）：进一步用人的编码构架区( FR) 替代鼠FR, 形成更为完全的人源化抗体, 即除了3 个CDR 是鼠源的外, 其余全部是人源结构 完全人源化抗体：1、噬菌体抗体库技术；2、转基因小鼠技术,药效筛选,特异性与亲和力鉴定：ELISA, WB, FACS, IHC, IP 等,功能鉴定： ADCC, CDC, 中和细胞因子,by抗体生产部门,by药效部门,ADCCLDH release,药效筛选,CDC-CTG,药效筛选,cell prolife

4、ration and antibody neutralization,药效筛选,评估ADA是否会影响药效,药动评价,Pharmacokinetics, PK,Anti-drug antibodies, ADA,Neutralizing Anti-drug antibody, NAb,cell-based,non-cell-based,主要评估血清中药物水平，不被肾脏清除，半衰期长；单抗的主要代谢结果是降解为肽段和氨基酸，无需进行生物转化研究,评估免疫原性，是否产生ADA,间接法ELISA建立流程,优化案例,使用标准品建立实验时，假设二抗工作浓度已经确定，不同抗原浓度与一抗浓度正交实验,MSD旗下明星药物，旨在利用人体自身的免疫系统抵御癌症 热门靶点：免疫检查点（Immune Checkpoint）如 PD-1、PD-L1、CTLA-4、Tim3、LAG-3、VISTA等,KeytrudaFDA批准的第一个程序性死亡受体-1（PD-1)单抗,www.51pptmob 5