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文档简介
1、茶叶中咖啡碱含量的测定 紫外分光光度法,制作人:汪小钢,实验目的,咖啡碱是茶汤中苦味的重要物质基础,它具有兴奋神经中枢和利尿等药理功能,对茶叶品质有非常重要的影响。因此,测定其含量是化学评价茶叶品质的需要。 老人、儿童以及一些不适应咖啡碱人群需要饮用低(或无)咖啡碱茶叶及其制品,对它们进行咖啡碱含量测定也是必需的。 茶叶深加工和综合利用的需要。,实验原理,咖啡碱易溶于水,在274nm左右有强烈的吸收。由于茶叶中儿茶素、没食子酸等多酚类物质在同一波长范围内也有很强的吸收,因此需要用碱式醋酸铅等先除去茶汤中多酚等干扰物质,然后再用紫外可见分光光度计在274nm测定咖啡碱的吸光度值,根据咖啡碱的标准
2、曲线求得茶汤中咖啡碱的浓度,以此计算茶叶或相关制品中咖啡碱的含量。,试剂,碱式乙酸铅溶液:称取碱式醋酸铅50 克 溶于100 毫升水中,静置过夜,倾出上清液过滤备用。 0.01M盐酸溶液:取盐酸0.9 毫升,加水稀释至1升 ,摇匀。 4.5M硫酸溶液:取硫酸250毫升 ,用水稀释至1 升 ,摇匀。 咖啡碱标准溶液:称取咖啡碱(纯度不低于99%)100 毫克,溶于1000 毫升水中,此溶液咖啡碱浓度为 100 ug/ml。,主要仪器,紫外分光光度计 分析天平。,测定方法(I)标准曲线的制作,分别吸取0、1、2、5、10、12 ml 咖啡碱标准溶液于一组100 ml 容量瓶中,各加入0.01M盐酸
3、4.0 ml,加水定容,混匀。 用10 mm 石英比色皿,于波长274 nm 处,以试剂空白溶液作参比,测定吸光度。 以浓度为横坐标,吸光度为纵坐标,绘制标准曲线,并求出回归方程。,测定方法(II),茶汤制备:称取磨碎茶样3 g 于500 ml 锥形瓶内,加沸水450 ml,于沸水浴中加热45 min,每隔10 min摇瓶一次。抽滤,并用热水洗涤23次,滤液移入500 ml容量瓶中,冷却后加水定容。 测定:准确吸取茶汤25 ml 于250 ml 容量瓶中,加0.01M盐酸溶液10 ml、碱式醋酸铅2 ml,加水定容,混匀,静置过滤。吸取滤液50 ml 于100 ml 容量瓶中,加4.5M 硫酸溶液0.2 ml,加水定容,摇匀,过滤。用 10 mm 比色皿,于波长274 nm 处,以试剂空白溶液作参比,测定吸光度。将所测吸光度值代入回归方程计算出茶汤中咖啡碱的浓度。,结果计算,测试效果,此方法是我国现行标准方法
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