芳胺类药物的分析

1、.,第七章 芳香胺类药物的分析,第一节 芳胺类药物的分析,第二节 苯乙胺类药物分析,基本要求,练习与思考,.,基本要求,一、掌握芳胺类、苯乙胺类药物的鉴别和含量测定的基本原理与方法。,.,第一节 芳 胺类药物的分析,芳胺类药物分为两类,芳伯氨基未被取代,芳伯氨基被酰化,一、对氨基苯甲酸酯类药物的基本结构与主要化学性质,（一）基本结构与典型药物,.,苯佐卡因,盐酸普鲁卡因,.,盐酸丁卡因,盐酸普鲁卡因胺,.,1.芳伯氨基特性：重氮化偶合反应；芳醛缩合成Schiff碱；易 氧化变色等。盐酸丁卡因无此特性。,（二）主要理化性质,水解特性：分子结构中的酯键或酰胺键易水解，除盐酸 丁卡因外水产物为对丁基

2、氨基苯甲酸外，上述均 为对氨基苯甲酸。,弱碱性：除苯佐卡因外，其余均含有叔胺氮的侧链，故具 有弱碱性。,4. 其它特性：因结构中有 芳伯氨基或同时具有脂烃胺侧链，其 游离碱多为碱型油状液体或低熔点固体，难溶于 水，可溶于有机溶剂。其盐酸盐则易溶于水。,.,二、酰胺类药物的基本结构与主要化学性质 （一）基本结构与典型药物,.,对乙酰氨基酚（扑热息痛）,.,盐酸布比卡因,盐酸利多卡因,.,1.水解后显芳伯氨基特性：分子结构中含有芳酰氨基，酸 水解后显芳伯氨基的特性反应。 注意空间位阻的影响。 2.水解产物易酯化：对乙酰氨基酚，酸水解生成 醋酸，在硫酸中与乙醇反应，发出醋 酸乙酯香味。,（二）主要化

3、学性质,.,3.酚羟基特性：对乙酰基酚有游离酚羟基，可与FeCl3 发生显色反应。 4.弱碱性：利多卡因和布比卡因烃胺侧链有叔胺氮，显 碱性，可与生物碱沉淀剂发生沉淀反应，可 相互区别。 5.与金属离子发生沉淀反应：利多卡因和布比卡因酰氨 基上氮可与Cu2+,Co2+生成 有色配位化合物沉淀。,.,三、鉴别试验,（一）重氮化-偶合反应 分子结构中含有芳伯氨基或潜在芳伯 氨基的药物，均可发生此反应。,Ar-NH2,HCl,NaNO2,重氮盐,OH-,-萘酚,橙黄猩红色,.,直接反应：苯佐卡因、盐酸普鲁卡因、 盐酸普 鲁卡因胺,间接反应：对乙酰氨基酚,利多卡因和布比卡因由于空间位阻很难发生此反应。

4、,丁卡因虽无芳伯氨基，但可与NaNO2反应生成N亚硝基化合物的乳白色沉淀。,.,.,.,（二）与三氯化铁反应,对乙酰氨基酚 + FeCl3,蓝紫色化合物,.,1. 与铜和钴离子反应： 利多卡因与硫酸铜生成蓝紫色配位化合物； 与氯化钴生成亮绿色沉淀。,（三）与金属离子反应,.,.,2. 羟肟酸铁盐反应 基于普鲁卡因胺分子中的 芳酰胺结构。,.,3. 与汞离子反应,盐酸利多卡因 + H2NO3 + Hg(NO3)2,黄色,对氨基苯甲酸酯 H2NO3 + Hg(NO3)2,红色或橙黄色,.,1. 盐酸普鲁卡因的鉴别,(四) 水解产物反应,.,.,2. 苯佐卡因的鉴别,苯佐卡因 + NaOH,乙醇,乙

5、醇 + I2 + NaOH,CHI3（碘仿臭气，黄色沉淀）,.,(五) 紫外特征吸收光谱法,1. 在max 处测定供试液的百分吸收系数。 例如：对乙酰基酚在0.4%NaOH中于max =240nm;E1%1cm = 715 在HCl(0.1nol/L)-甲醇于max =249nm; E1%1cm = 880,2. 在规定的浓度测定max 例如：盐酸普鲁卡因胺5g/ml; max = 280nm,(六)红外吸收光谱法（略）,.,（一）对乙酰氨基酚中的特殊杂质检查 1.乙醇溶液的澄清度与颜色：因其生产工艺用铁粉作还原剂，可 能带入，致使乙醇溶液产生混浊，中间体对氨基酚易氧化产生 有色化物，在乙醇溶

6、液中显橙红色或棕色。,四、特殊杂质检查,.,检查方法：配制0.1g/ml本品乙醇溶液，溶液应澄清，无色； 如显混浊，与1号浊度标 准液比较，不得更浓； 如显色，与棕红色2号或橙红色2号 标准液比较， 不得更深。,2. 有关物质检查：Ch.P是以对氯苯乙酰胺为对照品， 采用TLC 法中的杂质对照品法。,3. 对氨基酚检查：利用对氨基酚在碱性条件下可与 亚硝基铁氰化钠生成蓝色配位化 合物，采用比色法。,1.乙醇溶液的澄清度与颜色：,.,(二)盐酸普鲁卡因注射液中对氨基苯甲酸的检查,为什么要检查？,怎样检查？,原中国药典采用TLC法中的杂质对照品法进行检查。（现行中国药典采用HPLC法检查）,.,（

7、一）亚硝酸钠滴定法 Ar-NH2; Ar-NHCOR; Ar-NO2均可采用此法 Ch.P中的苯佐卡因；盐酸普鲁卡因和盐酸普鲁卡 因胺及其制剂可直接采用本法。,五、含量测定,.,.,1. 原理：,Ar-NHCOR + H2O,Ar-NH2 + RCOOH,H +,Ar-NH2 + NaNO2 + 2HCl,Ar-N2+Cl- + NaCl + 2H2O,.,测定主要条件：,(1) 加KBr增加反应速度,重氮化的反应历程为：,NaNO2 + HCl,HNO2 + NaCl,HNO2 + HCl,NOCl + H2O,KHCl,.,.,KBr + HCl,HBr + KCl,HNO2 + HBr,

8、NOBr + H2O,KHBr, KHBr 比KHCl大300倍,生成NOBr量大得多 加快反应速度,.,(2) 加过量HCl加速反应： 重氮化速度加快； 重氮盐在酸性介质中稳定； 防止生成氨基偶氮化合物。 Ar-N2+Cl- + H2N-Ar Ar-N=N-NH-Ar + HCl 一般摩尔比为Ar-NH2 : HCl = 1 : 2.56 。,.,(3) 室温条件下滴定: 温度高反应速度快；每升高10加快2.5倍,太高,可使Ar-N2+Cl- + H2O,Ar-OH + N2 + HCl,(4) 滴定管尖端插入液面下滴定,.,3. 指示终点的方法 (1) 永停滴定法 溶液 检流计 终点前：

9、无过量 无电流 HNO2 终点时：有过量 有电流（使指针偏离零 HNO2 永停在某一位置） (2) 外指示剂法 用KI-淀粉指示剂 指示终点的原理： 2NaNO2 + 2KI + 4HCl 2NO + I2 + 2KCl + 2NaCl + 2H2O,.,(二）非水溶液滴定法(略),.,1. 对乙酰基酚原料的含量测定 在0.4%NaOH介质中；257nm D%E1%1cm样 E1%1cm标100 ；E1%1cm715 2. 对乙酰基酚片溶出度测定 （测定条件同上） 1片稀HCl 24ml + H2O 1000ml 精密量 取5ml + 0.4%NaOH10ml + H2O 100ml 257n

10、m测定A。 W110005100100C （g/100ml) W(g) = 200 C; C = A/715 溶出度W标示量10080为合格,（三）分光光度法,.,此法主要用于盐酸普鲁卡因注射液的测定。因该注射液中 常含有降解产物对氨基苯甲酸；可以苯甲酸为内标同时测定两 者的含量，该法简单准确。 色谱条件：色谱柱为BondapakC18 300mm4mm 流动相为甲醇1HAc(40:60); UV检测器250nm.,（四）HPLC法,.,第二节 苯乙胺类药物的分析,一、苯乙胺类药物的基本结构与主要化学性质 （一）基本结构与典型药物,*,.,常见的苯乙胺类药物,.,.,.,.,（二）主要化学性质

11、,1.弱碱性 本类药物结构中有烃氨基侧链，为仲胺氮 显弱碱性。 2.酚羟基特性 本类药物结构中有酚羟基，可与 FeCl3;发生氧化。 3.光学活性 多数药物结构中有手性碳原子，具有旋 光性。,.,二、鉴别试验,(一)与三氯化铁反应,Ar-OHFeCl3,络合显色 碱液,紫红色,.,。 (二）甲醛硫酸反应 在此试剂中形成醌式结构而显色。 药 物 三氯化铁 甲醛硫酸 肾上腺素 0.1mol/LHCl显绿色,甲氨试液显红紫红 红色 重酒石酸去甲肾上腺素 绿色,加NaCO3试液显紫色红色 淡红色 盐酸去氧肾上腺素 紫色 玫瑰红橙红棕红 盐酸异丙肾上腺素 深绿色,加5NaCO3试液显蓝紫色红色 棕色暗紫

12、色,.,(三）氧化反应,本类药物具有Ar-OH，易被氧化剂I2, H2O2, K3Fe(CN)6氧化而显色， 例如：肾上腺素在中性或酸性条件下，被I2, H2O2 氧化后，生成肾上腺素红； 盐酸异丙肾上腺素在酸性条件下，被I2氧化， 生成异丙肾上腺素红。,.,(四）紫外特征吸收与红外吸收光谱,例如： 盐酸异丙肾上腺素 0.05mg/ml max = 280nm A =0.50,这一类药物均可采用红外吸收光谱进行鉴别,.,(一) 酮体检查 本类药物在生产过程中多采用酮体氢化制得，若氢 化不完全，易引入酮体杂质。 采用UV法检查： 利用酮体在310nm有吸收，本类药物无吸收。 例如：肾上腺素本项检

13、查 配2.0mg/ml =310nm A0.05 盐酸去氧肾上腺素 配2.0mg/ml =310nm A0.02 盐酸异丙肾上腺素 配2.0mg/ml =310nm A0.15,三、特殊杂质检查,.,220 260 300 nm,肾上腺酮及肾上腺素的紫外吸收曲线,max310nm,.,(二) 有关物质的检查 采用TLC法（或HPLC）中的高低浓度对比法进行检查。,(三) 盐酸苯乙双胍中有关双胍的检查 采用PC法中的杂质对照法进行检查。,.,(一) 非水溶液滴定法 本类药物的原料药多采用此法。本法重点将在第八章讨论。 1. 重酒石酸去甲肾上腺素的测定 相当于B的有机酸盐可直接滴定。 2.盐酸克仑

14、特罗的测定 相当于B的HX酸盐不能直接滴定，需加Hg(Ac)2处理后滴定。 3.硫酸沙丁醇的测定 相当于B的H2SO4盐可直接滴定, 也可处理后滴定。,四、含量测定,.,(二) 溴量法 本类药物重酒石酸间羟胺、盐酸去氧肾上腺素及 其注射液用此法。,基本原理：,.,(三) 比色法 利用药物分子结构中的Ar-OH与Fe3络合显色，进行比色 测定； 也可利用药物分子结构中的Ar-NH2重氮化偶合显色，进行 比色。,.,例如：盐酸克伦特罗栓的含量测定,.,(四) HPLC法 例一、重酒石酸去甲肾上腺素注射液的测定 采用RPIP-HPLC-UV法；用外标一点法进行定量测 定。 例二、血浆中儿茶酚胺类（肾

15、上腺素类）药物的测定 采用RPIP-HPLC-EChD 法；用标准曲线法进行定量 测定。,.,练习与思考,A型题,1盐酸普鲁卡因注射液中检查的特殊杂质是 A.水杨醛 B. 间氨基酚 C.水杨酸 D.对氨基苯甲酸 E. 氨基酚 2对乙酰氨基酚中检查的特殊杂质是 A.水杨醛 B. 间氨基酚 C. 对氨基酚 D.苯甲酸 E.苯酚 3肾上腺素和盐酸去氧肾上腺素中检查的特殊杂质是 A.水杨醛 B. 间氨基酚 C. 对氨基酚 D.酮体 E. 苯甲酸,.,B型题,A。硫酸铜反应 B.氧化反应 C. 还原反应 D.水解后重氮化-偶合反应 E. 重氮化-偶合反应 1. 盐酸利多卡因 2. 肾上腺素 3. 盐酸普鲁卡因 4对乙酰氨基酚,A,B,E,D,.,A。溴量法 B. 紫