蛋鸡场4种疫病净化技术

摘要：蛋鸡产业是我国畜牧业的支柱产业，在转型升级过程中面临疫病防控压力。其中以高致病性禽流感、新城疫、禽白血病、鸡白痢等4种禽病对蛋鸡群威胁较大，实施净化有利于降低损失，提高蛋鸡产业质量。文章对上述4种疫病的净化要求、净化步骤、样品采集、检测方法、效果评价等方面进行综述，为蛋鸡场疾病防治与净化提供借鉴。我国蛋鸡产业是畜牧业的支柱产业，2021年在产蛋鸡约10.5亿只，鸡蛋年产量超过2600万t，自1985年以来一直居世界第一。近年来，蛋鸡产业逐步进入转型升级关键期，已基本实现良种化、规模化，但仍面临疫病防控严峻挑战。我国禽类H5N1、H5N2、H5N6、H5N8和H7N9亚型高致病性禽流感疫情时有发生，低致病性禽流感流行广泛，某些省份H9N2亚型检出率达到17.14%。ClassⅠ类和ClassⅡ类的新城疫强弱毒株交织流行，其中基因Ⅶ型新城疫强毒株正在引起世界新城疫第4次大流行。禽白血病在产蛋前期发病率较高，A、B、J亚群禽白血病在鸡群中常见，某些地方特色蛋鸡配套系亲本群存在A、B、J亚群禽白血病混合感染。禽白血病还可以垂直传播，部分黄羽种公鸡群血浆和精液J亚群病毒分离阳性率分别高达8.12%和5.17%。食源性人畜共患沙门氏菌通过输卵管污染鸡蛋已成为引起人食物中毒导致死亡的重要病原，一些蛋鸡场存在肠炎、鼠伤寒、鸡白痢等3种沙门氏菌不同程度的感染。高致病性禽流感、新城疫、禽白血病、鸡白痢等四种禽病对蛋鸡危害巨大，实施净化非常重要。该文对以上4种禽病的净化技术进行综述，为蛋鸡产业疫病防治与净化提供参考。1净化要求2021年5月1日实施的新版《动物防疫法》提出将动物疫病净化消灭列入动物防疫的方针，明确了动物疫病净化的法律地位。2021年10月，农业农村部出台《关于推进动物疫病净化工作的意见》，明确在全国范围内优先深入推进高致病性禽流感、禽白血病、禽沙门氏菌等家禽疫病净化工作。广西早于2020年就印发《广西壮族自治区养殖场动物疫病净化技术规程》，将高致病性禽流感、新城疫、禽白血病、鸡白痢列为净化病种，并细化了创建种禽场星级无规定动物疫病养殖场的技术方法，为蛋鸡场主要疫病净化提供可借鉴的参考依据。2净化程序2.1净化步骤按照本地调查、综合控制、监测净化等3个步骤实施净化，具体为：2.1.1本地调查按一定比例分区随机抽取鸡群咽喉/泄殖腔拭子、血清、血浆、公鸡精液、母鸡蛋清、泄殖腔拭子、雏鸡胎粪，样品覆盖不同栋舍，按照表1进行检测。2.1.2综合控制对禽流感、新城疫实施免疫，对禽白血病、鸡白痢不免疫，采取免疫/非免疫、监测、淘汰以及综合性的生物安全防控措施。净化工作是一个系统工程，必须建立生物安全体系，贯彻落实消毒、孵化、饲养管理等一系列制度，从切断传播途径、剔除传染源、保护易感动物等3个环节执行生物安全措施。2.1.3禽流感、新城疫监测净化每季度对蛋鸡群监测1次，血清样品按照不同栋舍实存种禽数的0.5%抽样，咽喉/泄殖腔拭子样品按照0.1%抽样，样品覆盖全部栋舍，血清与拭子样品一一对应。禽流感、新城疫免疫抗体不合格者及时进行补免，病原学阳性的按国家有关规范处置。2.1.4禽白血病、鸡白痢监测净化按批次、生产阶段进行多世代监测，对核心群每批次的全群种公鸡、1日龄预选雏鸡、育雏后期、开产初期、留种蛋鸡进行100%监测，阳性个体适时淘汰。种蛋标号与母鸡对应，选留筛查和收集阴性种蛋，下一世代循环净化。2.2样品采集2.2.1咽喉/泄殖腔拭子以前我们着重探究网络通信区域的探究，但是随着社会的发展，互联网开设了两个新多媒体大数据在如今的电子信息时代，物联网成为了标志词。物联网作为以互联网为背景的网络信息的交融不断扩大，将来会与电子通信，计算，互联网技术一并作为时代发展不可小觑的技术改革。对网络的成长研究也是将来电子信息科技专业的重大课题。使用无菌棉签，采集喉头拭子、泄殖腔拭子各1支，同时装于含有1mL保存液的离心管中。2.2.2血清翅下静脉采集1.5mL全血，装于无抗凝剂的干净2mL离心管中，待凝固析出血清。2.2.3血浆翅下静脉采集1.5mL，装于含肝素钠抗凝剂的2mL离心管中，摇匀并离心后，取上清血浆接种细胞悬液。2.2.4公鸡精液2.2.5母鸡蛋清开产时、留种前，每只母鸡连续收集2枚种蛋，每枚种蛋取1mL蛋清到离心管中。2.2.6雏鸡胎粪将同一母鸡产下的种鸡蛋按家系编号，孵育出雏后用含有0.5mL稀释液的2mL离心管收集胎粪，并编写家系号。换手套或清洗双手后，采集下一个家系。所有采集的样品均需进行编号、记录，保证溯源到个体和家系。2.3检测方法参考《高致病性禽流感诊断技术》（GB/T18936-2020）、《新城疫诊断技术》（GB/T16550-2020）、《禽白血病病毒p27抗原酶联免疫吸附试验方法》（NY/T680-2003）、《禽白血病诊断技术》（GB/T26436-2010）、《原种鸡群禽白血病净化检测规程》（GB/T36873-2018）、《鸡伤寒和鸡白痢诊断技术》（NY/T536-2017）等国家标准和农业行业标准，采用实时荧光PCR方法检测鸡咽喉/泄殖腔拭子H5亚型、H7亚型禽流感病毒和新城疫病毒核酸，采用HI和ELISA方法检测鸡血清H5亚型、H7亚型禽流感、新城疫和A/B、J亚群ALV及鸡白痢抗体，采用ELISA方法检测公鸡精液、母鸡蛋清、泄殖腔拭子、雏鸡胎粪禽白血病p27抗原，采用病毒分离方法分离公鸡和母鸡血浆禽白血病病毒并检测培养液中禽白血病病毒p27抗原（见表1）。表1蛋鸡场疫病净化项目及检测方法2.4效果评价参考《种禽场重要疫病净化技术规程》（DB45/T2576-2022）、《广西壮族自治区养殖场动物疫病净化技术规程》，结合蛋鸡场特点对净化效果评价，具体如下：2.4.1高致病性禽流感、新城疫按照《广西壮族自治区星级无规定动物疫病养殖场评估细则》要求进行抽样，抽检H5、H7亚型禽流感（新城疫）免疫抗体合格率达到90%以上，H5和H7亚型禽流感（新城疫）病原抽检阴性，场内连续2年以上无高致病性禽流感（新城疫）临床病例，视为达到高致病性禽流感（新城疫）免疫无疫标准。2.4.2禽白血病、鸡白痢核心群抽检禽白血病抗原阳性率≤10%、鸡白痢抗体阳性率≤8%，核心群连续2年无禽白血病（鸡白痢）临床病例，视为达到禽白血病（鸡白痢）净化标准。生产条件允许的，进一步参考《原种鸡群禽白血病净化检测规程》（GB/T36873-2018）、《蛋种鸡场禽白血病的净化技术规程》（DB13/T2442-2017）、《种鸡场鸡白痢净化技术规程》（DB32/T3624-2019）、《种鸡场禽白血病、鸡白痢净化要求》（T/CVMA49-2020）不断实施世代循环净化，使禽白血病抗原（鸡白痢抗体）阳性率在1%以内。3讨论国内家禽疫病净化主要集中在种禽场，蛋禽场的净化报道较少。H5和H7亚型高致病性禽流感、新城疫是所有禽场共同面临的问题，采用的免疫净化技术已比较成熟，可以实现零感染净化目标。但是，经精液和种蛋传播的垂直性传播疾病（禽白血病）以及经蛋污染传播的人畜共患病（鸡白痢）是蛋鸡场疫病净化的难点和痛点，实现禽白血病和鸡白痢感染率在1%以内的净化目标已经比较理想。禽白血病和鸡白痢难以完全净化的主要原因是禽白血病病毒和鸡白痢沙门氏菌污染面广、感染率高、世代传播链长，且没有良好的疫苗免疫阻断，群间群内通过垂直、水平方式不断循环传播。因此，完整、全面采集各种类型样品监测，并长期坚持世代剔除净化措施，是蛋鸡场成功实现净化目标的