DB32T3863-2020甘薯茎线虫病抗性鉴定技术规程

ICS65.020.01

B23

DB32

江苏省地方标准

DB32/T3863—2020

甘薯抗茎线虫病鉴定技术规程

Technicalregulationforevaluationonsweetpotatoresistance

tostemnematodedisease

2020-10-13发布2020-11-13实施

江苏省市场监督管理局发布

DB32/T3863-2020

甘薯抗茎线虫病鉴定技术规程

1范围

本标准规定了甘薯品种（系）对茎线虫病抗性鉴定的鉴定方法、抗性评价标准和鉴定记载表格。

本标准适用于甘薯品种（系）对茎线虫病抗病性的田间自然诱发鉴定和室内接种鉴定。

2规范性引用标准

下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。

凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB4406种薯

GB7413甘薯种苗产地检疫规程

3术语和定义

下列术语和定义适用于本文件。

3.1

感病对照品种susceptiblecontrolvariety

为检验试验的可靠性，在品种抗病性鉴定时附加的已知抗性为感病的品种，本标准中感病对照品种

为栗子香。

3.2

人工接种鉴定evaluationofartificialinoculation

用人工繁殖或收集病原线虫，按一定量接种，创造发病条件，根据茎线虫病发病程度确定品种抗病

性。

3.3

高温愈合heattreatedtowoundhealing

在甘薯入窖初期，采用人工加温方法促进伤口迅速愈合的一种措施。

3.4

相对病情指数

将供试品种（系）的病情指数与高感对照病情指数进行比较，经过公式计算而换算出的病情指数。

3.5

体积比

1

DB32/T3863-2020

人工接种鉴定时茎线虫侵染的体积与薯块体积的比值。

4鉴定方法

4.1自然诱发鉴定

4.1.1病圃选择

选择排灌方便，肥力中等，甘薯茎线虫病发生较重且均匀的田块作为鉴定圃。

4.1.2薯苗准备

将符合GB4406要求的种薯在无病苗床排种育苗，将待鉴定品种薯苗离苗床土层3cm～5cm剪下，

长度20cm～25cm。外寄鉴定材料应按照GB7413要求进行检疫。每品种剪取三组薯苗，每组6株～8株，

按名单编号分别挂上名称、编号、试验重复的牌子，备用。

4.1.3栽种及管理

5月上中旬起垄栽种，垄宽75cm～85cm，每垄划分成不同的小区，小区之间留隔离部分50cm。采

用“Z”字形方式栽种，试验设3次重复，随机区组排列，每重复供试品种（系）6株～8株，株距23cm～

25cm，选用栗子香为高感对照品种，每隔10个鉴定品种（系）栽种栗子香一垄，栽种后正常管理。

4.1.4病情调查与分级

10月中旬进行调查薯块发病情况。人工将薯块刨出，用刀将薯块横切两刀，目测线虫侵染的面积，

根据侵染横截面积进行分级，每个薯块均需调查，记载发病情况。分级标准如下：

——0级：无病；

——1级：0%＜为害面积占薯块横切面积比率≤25%；

——3级：25%＜为害面积占薯块横切面积比率≤50%；

——5级：50%＜为害面积占薯块横切面积比率≤75%；

——7级：75%＜为害面积占薯块横切面积比率≤100%。

4.1.5病情指数及防治效果计算

依据病情调查情况，按式（1）计算病情指数。

式中：

DI------病情指数；

Ni------第i病害级别的薯块数；

i------为害级别值；

M------调查的总薯块数。

依据病情指数结果，按式（2）计算相对病情指数。

相对病情指数精确至0.1，对照品种病情指数为鉴定圃中所有对照的平均病情指数。

4.1.6鉴定有效性判断

田间鉴定对照品种的平均病情指数大于60，鉴定结果判定有效。

4.2室内接种鉴定

2

DB32/T3863-2020

4.2.1病原线虫分离及消毒

人工采集病薯块，采用贝曼漏斗法分离线虫。将分离好的线虫用400目筛网过滤，筛网内收集线虫，

用灭菌水冲洗3次，放入0.1%青霉素+0.1%链霉素的消毒液中，4℃环境放置12h，用400目筛网过滤，

灭菌水冲洗3次，灭菌水配成200条/ml的线虫悬浮液备用。

4.2.2鉴定材料准备

选用大小300g～400g薯块作为鉴定用薯块，每个供试品种（系）选3块，洗净晾干后编号备用。选

用栗子香为高感对照品种。鉴定薯块随机或顺序排列在80cm×40cm的塑料筐内，每筐放置对照品种薯

块2个～3个，每份鉴定材料重复3次，每重复2个薯块。接种前用75%酒精对薯块表面进行消毒处理。

4.2.3接种材料

接种时需要5mm螺纹打孔器，12cm玻璃培养皿若干套，手术刀、手术镊各1把，1ml移液枪一支

及枪头若干，酒精灯1只，电磁搅拌器1台。将打孔器、培养皿、烧杯、手术刀、手术镊灭菌后备用。

4.2.4接种方法

用打孔器垂直在薯块中部打孔，深度至薯块中下部，用移液枪将1ml配好的线虫悬浮液加入孔中，

将打出的薯条切除下方1.5cm，再用剩余薯条封住孔口，用融化的石蜡密封孔口缝隙，放入用75%酒精

消毒过的塑料筐内。接种后将筐置于26℃～28℃鉴定室内保湿培养。线虫悬浮液应处于搅拌状态，且

每打孔一个薯块后打孔器需用酒精灯消毒。

4.2.5病情调查

接种后45d调查薯块发病情况。先将薯块沿打孔部位横切，分别量取横切面薯块直径和线虫侵染直

径，再将薯块沿中心纵切，量取薯块纵切面的薯块长度和线虫侵染长度。

4.2.6发病体积比计算

依据病情调查结果，按式（3）计算茎线虫病发病体积比：

按式（4）计算相对比：

品种（系）体积比精确至0.1%。

5抗性评价标准

5.1自然诱发鉴定评价标准

根据相对病情指数评价甘薯茎线虫病抗侵入性，将甘薯品种（系）划分为免疫、高抗、中抗、高感，

4个类型，评定标准如下：

——免疫：相对病情指数为100；

——高抗：70≤相对病情指数＜100；

——中抗：30≤相对病情指数＜70；

——高感：0≤相对病情指数＜30。

5.2室内接种鉴定评价标准

3

DB32/T3863-2020

根据品种（系）侵染比评价甘薯茎线虫病抗扩展性，将甘薯品种（系）划分为免疫、高抗、中抗、

高感，4个类型，评定标准如下：

——免疫：相对体积比100%

——高抗：70%≤相对体积比＜100%；

——中抗：30%≤相对体积比＜70%；

——高感：0≤相对体积比＜30%。

6鉴定记载表格

甘薯抗茎线虫病鉴定记载表格见表1和表2。

表1甘薯抗茎线虫病鉴定记载表（自然诱发鉴定）

品种（系病情级别病情相对病平均相抗性

编号重复

名称）指数情指数对病指评价

01357

Ⅰ

Ⅱ

Ⅲ

……

栽种日期：调查日期：

鉴定人（签字）：

表2甘薯抗茎线虫病鉴定记载表（室内接种鉴定）

发病情况（cm）

品种（系相对体平均相对

编号重复体积比抗性评价

名称）薯块病斑薯块病斑积比体积比

直径直径长度长度

Ⅰ

Ⅱ

Ⅲ

……

接种日期：调查日期：

鉴定人（签字）：

___________________________

4

DB32/T3863-2020

前  言

本标准按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。

本标准由江苏徐州甘薯研究中心提出。

本标准有江苏省农作物标准化技术委员会归口。

本标准起草单位：江苏徐州甘薯研究中心。

本标准起草人：孙厚俊、谢逸萍、张成玲、杨冬静、徐振、赵永强、马居奎、谢睿寰、唐伟、孙井

康。

I

DB32/T3863-2020

甘薯抗茎线虫病鉴定技术规程

1范围

本标准规定了甘薯品种（系）对茎线虫病抗性鉴定的鉴定方法、抗性评价标准和鉴定记载表格。

本标准适用于甘薯品种（系）对茎线虫病抗病性的田间自然诱发鉴定和室内接种鉴定。

2规范性引用标准

下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。

凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB4406种薯

GB7413甘薯种苗产地检疫规程

3术语和定义

下列术语和定义适用于本文件。

3.1

感病对照品种susceptiblecontrolvariety

为检验试验的可靠性，在品种抗病性鉴定时附加的已知抗性为感病的品种，本标准中感病对照品种

为栗子香。

3.2

人工接种鉴定evaluationofartificialinoculation

用人工繁殖或收集病原线虫，按一定量接种，创造发病条件，根据茎线虫病发病程度确定品种抗病

性。

3.3

高温愈合heattreatedtowoundhealing

在甘薯入窖初期，采用人工加温方法促进伤口迅速愈合的一种措施。

3.4

相对病情指数

将供试品种（系）的病情指数与高感对照病情指数进行比较，经过公式计算而换算出的病情指数。

3.5

体积比

1

DB32/T3863-2020

人工接种鉴定时茎线虫侵染的体积与薯块体积的比值。

4鉴定方法

4.1自然诱发鉴定

4.1.1病圃选择

选择排灌方便，肥力中等，甘薯茎线虫病发生较重且均匀的田块作为鉴定圃。

4.1.2薯苗准备

将符合GB4406要求的种薯在无病苗床排种育苗，将待鉴定品种薯苗离苗床土层3cm～5cm剪下，

长度20cm～25cm。外寄鉴定材料应按照GB7413要求进行检疫。每品种剪取三组薯苗，每组6株～8株，

按名单编号分别挂上名称、编号、试验重复的牌子，备用。

4.1.3栽种及管理

5月上中旬起垄栽种，垄宽75cm～85cm，每垄划分成不同的小区，小区之间留隔离部分50cm。采

用“Z”字形方式栽种，试验设3次重复，随机区组排列，每重复供试品种（系）6株～8株，株距23cm～

25cm，选用栗子香为高感对照品种，每隔10个鉴定品种（系）栽种栗子香一垄，栽种后正常管理。

4.1.4病情调查与分级

10月中旬进行调查薯块发病情况。人工将薯块刨出，用刀将薯块横切两刀，目测线虫侵染的面积，

根据侵染横截面积进行分级，每个薯块均需调查，记载发病情况。分级标准如下：

——0级：无病；

——1级：0%＜为害面积占薯块横切面积比率≤25%；

——3级：25%＜为害面积占薯块横切面积比率≤50%；

——5级：50%＜为害面积占薯块横切面积比率≤75%；

——7级：75%＜为害面积占薯块横切面积比率≤100%。

4.1.5病情指数及防治效果计算

依据病情调查情况，按式（1）计算病情指数。

式中：

DI------病情指数；

Ni------第i病害级别的薯块数；

i------为害级别值；

M------调查的总薯块数。

依据病情指数结果，按式（2）计算相对病情指数。

相对病情指数精确至0.1，对照品种病情指数为鉴定圃中所有对照的平均病情指数。

4.1.6鉴定有效性判断

田间鉴定对照品种的平均病情指数大于60，鉴定结果判定有效。

4.2室内接种鉴定

2

DB32/T3863-2020

4.2.1病原线虫分离及消毒

人工采集病薯块，采用贝曼漏斗法分离线虫。将分离好的线虫用400目筛网过滤，筛网内收集线虫，

用灭菌水冲洗3次，放入0.1%青霉素+0.1%链霉素的消毒液中，4℃环境放置12h，用400目筛网过滤，

灭菌水冲洗3次，灭菌水配成200条/ml的线虫悬浮液备用。

4.2.2鉴定材料准备

选用大小300g～400g薯块作为鉴定用薯块，每个供试品种（系）选3块，洗净晾干后编号备用。选

用栗子香为高感对照品种。鉴定薯块随机或顺序排列在80cm×40cm的塑料筐内，每筐放置对照品种薯

块2个～3个，每份鉴定材料重复3次，每重复2个薯块。接种前用75%酒精对薯块表面进行消毒处理。

4.2.3接种材料

接种时需要5mm螺纹打孔器，12cm玻璃培养皿若干套，手术刀、手术镊各1把，1ml移液枪一支

及枪头若干，酒精灯1只，电磁搅拌器1台。将打孔器、培养皿、烧杯、手术刀、手术镊灭菌后备用。

4.2.4接种方法

用打孔器垂直在薯块中部打孔，深度至薯块中下部，用移液枪将1ml配好的线虫悬浮液加入孔中，

将打出的薯条切除下方1.5cm，再用剩余薯条封住孔口，用融化的石蜡密封孔口缝隙，放入用75%酒精

消毒过的塑料筐内。接种后将筐置于26℃～28℃鉴定室内保湿培养。线虫悬浮液应处于搅拌状态，且

每打孔一个薯块后打孔器需用酒精灯消毒。

4.2.5病情调查

接种后45d调查薯块发病情况。先将薯块沿打孔部位横切，分别量取横切面薯块直径和线虫侵染直

径，再将薯块沿中心纵切，量取薯块纵切面的薯块长度和线虫侵染长度。

4.2.6发病体积比计算

依据病情调查结果，按式（3）计算茎线虫病发病体积比：

按式（4）计算相对比：

品种（系）体积比精确至0.1%。

5抗性评价标准

5.1自然诱发鉴定评价标准

根据相对病情指数评价甘薯茎线虫病抗侵入性，将甘薯品种（系）划分为免疫、高抗、中抗、高感，

4个类型，评定标准如下：

——免疫：相对病情指数为100；

——高抗：70≤相对病情指数＜100；

——中抗：30≤相对病情指数＜70；

——高感：0≤相对病情指数＜30。

5.2室内接种鉴定评价标准

3

DB32/T3863-2020

根据品种（系）侵染比评价甘薯茎线虫病抗扩展性，将甘薯品种（系）划分为免疫、高抗、中抗、

高感，4个类型，评定标准如下：

——免疫：相对体积比100%

——高抗：70%≤相对体积比＜100%；

——中抗：30%≤相对体积比＜70%；

——高感：0≤相对体积比＜30%。

6鉴定记载表格

甘薯抗茎线虫病鉴定记载表格见表1和表2。