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文档简介

低温对植物的损害试验原理植物在患病低温损害后,植物原生质膜,选择性丧失,对物质的透性发生转变,使得一些盐类,或有机物从细胞中渗出,进入四周溶液中,通过电导度的测量和糖的显色反响,即可见到外界溶液中电介质和糖类的增加。材料、仪器与试剂:仪器:电导率仪、火焰光度计、冰箱、小烧杯、钻孔器、大试管、水浴锅、移液管。2 试剂:蒽酮、浓HSO 2 方法与步骤:取植物叶片置于冰箱内,放置2、4、6小时或更长时间,取出用直径约1cm403遍,以除去切口汁液,置于盛有20ml蒸馏水的小烧杯中。另取未经低温处理的叶片,,同样钻取40个圆片,洗涤后,置于另一盛有20ml蒸馏水的小烧杯种,置于室温中让其浸泡数小时〔两小时以上〕。1mlHSO2 4

10分钟,如有糖存在,可产生绿色,绿色深浅,即表示糖分的多少。的电导度,电导度越大则溶液中的电解质含量越高。将渗出液用火焰光度计测渗出液中的K+或其它离子浓度。比较含量的差异。思考题:渗出液离子含量有何不同? 还有那些其它方法可以测量植物患病低温损害的程度?有何实践意义?呼吸速率的测定—广口瓶法试验目的呼吸速率是植物生命活动强弱的重要指标之一,常用于植物生理争论及农业生产实践等方面。测定呼吸速率的方法虽然很多,但不外乎测定二氧化碳的释放量和氧气的吸取量两类方法。本试验用广口瓶法测定植物的呼吸速率,并比较小麦吸胀的种子与幼苗的呼吸速率。试验原理密闭容器中参加肯定量碱液〔一般用氢氧化钡〕,并悬挂植物材料,则植物材料呼吸放出的二氧化碳可为容器中氢氧化钡所吸取,然后用草酸滴定剩余的氢氧化钡,从空白和样品二者消耗的草酸溶液之差,可计算出呼吸释放的二氧化碳量,其反响式如下:Ba(OH)

+CO

→BaCO

↓+HO2Ba(OH)+H

2CO→BaC

3 2O↓+2HO2

2 4

器24 剂2植物材料:吸胀小麦种、芽长0.5cm左右的小麦种子仪器:广口瓶装置〔见图2〕、台秤、酸式滴定管、滴定管架一套试剂:1/44mol/L草酸溶液:准确称取重结晶HCO2 2 4

2H

O2.8651g,2溶于蒸馏水中,定容至1000ml,每ml相当于1mgCO。20.05mol/L氢氧化钡溶液:Ba(OH)2

8.6g或Ba(OH)2

8H2

O15.78g溶于1000ml蒸馏水中。如有浑浊待溶液澄清后使用。酚酞指示剂:称取1g酚酞,溶于100ml95%乙醇中贮于滴瓶中。试验步骤 取500ml广口瓶两只,装置如下图。瓶口加一三孔橡皮塞:一孔插入装有碱,定用,试验时插一小橡皮塞,塞下悬挂一尼龙纱小筐供装植物材料用。 20ml,再塞进登记草酸溶液用量〔ml〕,即为空白滴定值。净广口瓶,重加20ml100粒同时称出重量装入小筐中,快速挂于橡皮塞下,塞好塞子。另一瓶取100粒芽长0.5cm左右的小麦种子,同时称出重量装入小筐中,操作同前。开头记录时间,其间轻轻摇30拔出小橡皮塞,参加三滴酚酞,用草酸滴定同前,记录草酸溶液用量,即为材料滴定值。计算呼吸速率:水势的测定试验目的70%~90%况对植物生理的生理活动具有重要影响。植物水势是植物的水分状况的重要指标,对于植物水分生理的科学争论以及农业生产实践具有重要指导意义。水势是指偏摩尔体积水的化学势,规定纯水的水势为零,水分总是从水势高处流向水势低处,依据这一原理,可以用小液流法、露点微伏压计法等测定植物组织的水势。小液流法试验原理将植物材料切成小块,浸泡在不同浓度的蔗糖溶液中,由于植物材料与蔗糖溶液间水势梯度的存在,导致蔗糖溶液从植物材料中吸水、失水或保持动态平衡,从而使蔗糖溶液变稀、变浓或保持浓度不变;由此可以找到与植物材料水势相当的蔗糖溶液浓度。算出植物组织的水势。试验材料与试剂中试管;青霉素小瓶;弯头毛细吸管;单面刀片;打孔器;解剖针;移液管;镊子;蔗糖;甲基兰试验步骤配制一系列不同浓度的蔗糖溶液,浓度分别为0.10.20.30.40.50.6M。取6只中试管编号,分别参加10ml不同浓度的蔗糖溶液;同时取6个青霉素小瓶,编号后分别参加1ml不同浓度的蔗糖溶液。取植物材料,用打孔器打成直径0.7cm左右的小条,用单面刀片切成2~3mm厚的小圆周片,分别参加装有不同浓度蔗糖溶液的青霉素小瓶中,每个小瓶中放5片(依植物材料的不同可做不同处理),加塞,放置30min,其间摇动数次以加速溶液与植物组织间的水分交换。溶液呈蓝色。观看记录小液流的方向。试验结果结果分析假设小液流上升,说明组织水势高于蔗糖溶液水势,组织排水,蔗糖浓度变低;假设小液流下降,说明组织水势低于蔗糖溶液水势,组织吸水,蔗糖浓度变大;假设小液流不动,说明组织水势与蔗糖溶液水势一样,二者间无水分量的交换。表:蔗糖溶液浓度与其渗透势留意影响结果。弯头毛细吸管要各个浓度专用叶绿素a与叶绿素b含量的测定试验目的和意义叶绿素a与叶绿素b是高等植物叶绿体色素的重要组分,约占到叶绿体色素总量的75%左右。叶绿素在光合作用中起到吸取光能、传递光能植物的光合速率亲热相关,在肯定范围内,光合速率随叶绿素含量的增加而上升。另外,叶绿素的含量是植物生长状态的一个反映,一些环境因素如干旱、盐渍、低温、大气污染、元素缺乏都可以影响叶绿素的含量与组成,并因之影响植物的光合速率。因此叶绿素含量a与叶绿素b含量的测定对植物的光合生理与逆境生理具有重要意义。试验原理叶绿素提取液中同时含有叶绿素a和叶绿素b,二者的吸取光谱虽有不同,但又存在着明显的重叠,在不分别叶绿素a和叶绿素b的状况下同时测定叶绿素a和叶绿素b的浓度,可分别测定在663nm和645nm〔分ab在红光区的吸取峰〕的光吸取,然后依据Lambert-Beer定律,计算出提取液中叶绿素a和叶绿素b的浓度。A663=82.04Ca+9.27Cb 〔1〕A645=16.75Ca+45.60Cb 〔2〕公式中Ca为叶绿素a的浓度,Cb为叶绿素b浓〔单位为g/L〕,82.04和9.27 分别是叶绿素a和叶绿素b在663nm下的比吸取系数〔浓度为1g/L,光路宽度为1cm时的吸光度值〕;16.75和45.60分别是叶绿素a和叶绿素b在645nm下的比吸取系数。即混合液在某一波长下的光吸取等于各组分在此波长下的光吸取之和。将上式整理,可以得到下式:Ca=0.0127A663-0.00269A645 〔3〕Cb=0.0229A

-0.00468A645

663

〔4〕将叶绿素的浓度改为mg/L,则上式变为:Ca=12.7A

-2.69A663

645

〔5〕Cb=22.9A

-4.68A

〔6〕CT=Ca+Cb=8.02A

645+20.21A663

645

663〔7〕CT为叶绿素的总浓度试验仪器及材料试验材料:菠菜或其它绿色植物:UV-1700分光光度计;天平;剪刀;打孔器;研钵;移液CaCO;3试验步骤提取叶绿素选取有代表性的菠菜叶片数张,于天平上称取0.5g〔也可用打孔器打取肯定数量的叶圆片,计算总的叶面积,剪碎后置于研体中,参加5ml80%少许CaCO3和石英砂。认真研磨成匀浆,用滤斗过滤到10ml量筒中,留意在研钵中参加少量80%丙酮将研钵洗净,一并转入研钵中过滤到量筒内,并定容至10ml。将量筒内的提取液混匀,用移液管留神抽取5ml转入25ml量筒中再参加80丙酮定容至25l 最终植物材料与提取液的比例为W:=0.5:5=1:10,叶色深的植物材料比例要稀释到:20。测量光吸取利用722分光光度计或UV1700645nm663nm下的吸光度。结果分析将测得的数值代入到公式〔5〕〔6〕〔7〕a、叶绿素b绿素的含量:叶绿素a 含量(mg/g 鲜重)=Ca×50ml〔总体积数〕×1ml/1000ml/L÷0.5g=0.1Ca叶绿素b含量(mg/g鲜重)=0.1Cb争论:叶绿素在兰光区的吸取峰高于红光区的吸取峰,为何不用兰光区的光吸取来测定叶绿素的含量。计算叶绿素a与叶绿素b含量的比值,可以得到什么结论?比较阳生植物和阴生植物的叶绿素a和叶绿素b的含量以及比例,可以得到什么结论?叶绿体色素的提取、分别及理化性质的鉴定试验原理叶绿体色素是植物吸取太阳光能进展光合作用的重要物质,主要有叶绿素a、叶绿素b、胡萝卜素和叶黄素组成。从植物叶片中提取和分别叶绿体色素是对其生疏和了解的前提。利用叶绿体色素能溶于有机溶剂的特性,可用95%乙醇提取。分别色素的方法有多种,如纸层析、柱层析等。纸层析是其中最简洁的一种。当溶剂不断地从层析滤纸上流过时,由于混合色素中各种成分在两相(即流淌相和固定相)间具有不同的安排系数,它们的移动速度不同,使样品中的各种成分得到分别。材料、器材与试剂植物材料依据季节从市场上购置颖的菠菜,芹菜或油菜,选取其中之一颖绿叶作为试验材料。也可以从校园内采集其他植物颖绿叶。器材大试管〔20*20杯、华滤纸、小试管假设干、分光计、酒精灯、吸耳球、移液管、电吹风、毛细管试剂95%乙醇、碳酸钙、石英砂、汽油、苯、KOH、甲醇、醋酸铜、盐酸试验步骤叶绿体色素的提取与分别①称取颖去大叶脉的菠菜叶片〔或其他植物叶〕2g,剪碎放入研钵中,参加乙醇5ml、少许CaCO3(中和细胞中的酸防止Mg2+从叶绿素中心释放)和石英砂,研磨成匀浆,再参加适量的乙醇〔5-10m,然后用漏斗过滤,即得叶绿体色素液。②取预备好的滤纸条〔2*20cm〕,将其一端剪去两侧,中间留一长约1.5cm,宽约0.5cm的窄条。③用毛细管吸取叶绿体色素提取液点于滤纸的下端窄条的上方中心,留意下一次所1-2次。5-10ml(:丙酮:20:2:1的混合溶液可作层析液)〔色素点要略高于液面,滤纸条边缘不行遇到试管壁〕,盖紧软木塞,直立于阴暗处〔或试管外套一黑纸套。⑤经0.5-1h后,观看分别后色素带的分布。最上端橙黄色的是胡萝卜素,其次为叶ab.叶绿体色素的理化性质①叶绿素的荧光现象:1支试管中,用反射光和透射光观看的荧光颜色。②光对叶绿素的破坏作用:取叶绿体色素提取液少许,分装两支试管中,一支放在黑暗处〔或用黑纸套包裹,另一支放在强光下〔阳光下,经过2-3h试管中溶液的颜色有何不同?③黄色素〔胡萝卜素和叶黄素〕与绿色素〔叶绿素〕的分别:取叶绿体色素提取液5ml,加到盛有2mlKOH甲醇溶液的分液漏斗中,摇动分液漏斗,参加1mlDW,再参加5ml苯,轻轻摇动分液漏斗,静置片刻,溶液即分为两层。上层是黄色素,下层是绿色素,分别保存于试管中。④观看色素溶液的吸取光谱:调整分光计,观看日光的光谱。观看下层绿色局部的吸取光谱观看上层黄色局部的吸取光谱。植物光合速率的测定目的意义光合作用是植物体内最为重要的同化过程,光合速率的测量是争论植物的光合性能、诊断植物光合机构的运转、争论环境因素对光合作用的影响的重要方法。测定方法依据光合作用的方程式:HO+CO2 2

CHO+O2 2测定方法可分为三大类测定干重的增加〔半叶法、改进半叶法〕测定氧的释放〔叶园片氧电极法〕测定CO2的吸取〔气流法〕在这三种方法中,方法〔1〕过于粗糙,误差轻大而牢靠性差,且过于耗时,仅可用于验证性试验;方法〔2〕通过测定液体中的含氧量的连续变化来测定光合物的光合速率,具有较高的灵敏度,适应于试验室中使用;方法〔3〕通过直接测定活体叶片的CO2交换,可以快速准确地测出光合速率,近年来便携式光合作2转变叶室的光强、CO浓度、湿度,还可以格外快速便利地测定植物的CO2补偿2CO2饱和点、光补偿点、光饱和点、植物的羧化效率、表观光合量子效率、蒸腾速率等指标。在争论逆境生理、生态生理中得到了广泛地利用。气流法设备:红外气体———IRGA〔infraredgasanalyzer〕原理:任何具非对称性的气体分子,都有红外吸取,如CO、2HO、NO、SO等,在肯定浓度内,其红外吸取与其浓度成2 2 2线性关系,由此可依据其红外吸取量测出其浓度。CIRAS-2 便携式光合作用系统系统主要组成调整叶面积主机:气路吸取管IRGA:4个,分别测定参比室与叶室的CO2与H2O的浓度,范围0~9999ppmCO2调整器:可供给稳定的CO2,范围0~2023ppm电池气路设计原理简易图测量参数可测量叶室、参比室的CO

、HO浓度、温度、湿度、气压、2 2光合速率、蒸腾速率、气孔导度、叶肉细胞间隙CO数十个指标。

浓度等2可由此测得植物的光合速率、蒸腾速率、呼吸速率、CO补2偿点、饱和点、光补偿点、饱和点、羧化效率、表观光合量子效率等多种参数试验前的预备:

简要使用说明主机电池充电、光源蓄电池充电、掌上电脑充电–CO吸附剂〔Ca(OH)、吸水剂〔CaCl〕的检查与更换–2 2 2试验材料玉米或其它植物,将玉米种子充分吸涨后播种于细砂中,出苗后浇以Hoagland培育液,长至5叶期时可用于做试验。试验步骤主机与叶室连接如需CO2调整器则安装CO2调整器如需人工光源则安装光源及光源蓄电池翻开光合仪主机电源翻开电脑,进入Ciras掌握功能Ciras登陆进入操作界面,进展系统设置,设定叶室参数,进展各项测定,记录结果。关闭系统关闭Ciras系统、Ciras电源、关闭光源、光源电源、关闭电脑结果输出:测定的结果储存于掌上电脑中,可以通过ActiveSync通讯软件将掌上电脑连到台式机中,将结果输出到台式机中,用Excel软件对结果进展分析,并可打印出来。结果分析留意事项25米以外,以防止CO浓度的波动。而在室内测定时,空气须来自室外,2或最好利用压缩气体钢瓶供给CO2

CO2

掌握器掌握CO2

浓度。在测定植物的光合速率前须对植物进展光适应,使其气孔处于开放状态。试验后须松开叶室,使叶室密封垫恢复正常状态。植物灰分元素的分析试验目的植物体内含有大量矿质元素,通过对植物体内矿质元素的分析,可以了解植物对矿质元素的吸取和利用,有助于制定合理施肥打算。本试验练习定性测定植物组织内的矿质元素。试验原理1:获得矿质元素颖材料 水分以气态跑掉2:分析矿质元素通常利用灰分元素与特别试剂的专一性反响,能够产生肯定外形的晶体和颜色,就可以在显微镜下作定性鉴定。设备与材料显微镜马伏炉玻璃棒载玻片盖玻片白磁板黑磁板烘箱台称1%盐酸1%硫酸1%氨水1%磷酸氢二钠1%硝酸锶1%黄血盐1%KCl植物叶片

试验步骤植物材料的灰化称取50g2100~105℃烘箱中约30~60min,然后放于坩埚中于550℃约6小时灰化至白色。灰分溶液的预备少量灰分溶解于1-2ml蒸馏水中,用于鉴定氯元素。少量灰分溶解于3-4ml10%HCl中,用于鉴定其它元素。灰分元素的鉴定氯取干净黑磁板,加上一滴灰分元素溶液,再参加一滴1%AgNO,看生成的AgNO

沉淀。3 3钾取灰分元素一滴参加干净载玻片上,再加上一滴钾试剂混合,盖上盖玻片,数分钟后,于显微镜下观看有无铅黑色的铅铜亚硝酸钾结晶,绘简图。钙取灰分元素一滴参加干净载玻片上,再加上一滴1%硫酸混合,盖上盖玻片,数分钟后,于显微镜下观看石膏的针状结晶簇,绘简图。镁11%1%磷酸氢二钠,生成磷酸镁氨盐,结晶有雪花、星星、箱子、屋顶等外形,绘简图。磷取灰分元素一滴参加干净载玻片上,再加上一滴1%磷钼酸铵结晶,且颜色渐渐变绿,绘简图硫取灰分元素一滴参加干净载玻片上,再加上一滴1%硝酸锶,生成硫酸锶结晶,绘简图。铁取灰分元素一滴参加干净白磁板上,再加上一滴黄血盐,生成兰色普鲁士兰。留意滴加灰分及试剂时滴管勿相互污染。加后放盖玻片由于结晶的形成需要时间,故须几分钟后观看。植物溶液培育与缺素症的观看试验目的争论植物矿质养分培育的方法,观看植物在缺乏N、P、K、Ca、Mg、Fe等矿质元素时的生理病症。试验原理当植物有某些必需的矿物质元素的适量供给时,才能正常的生长发育,如缺少某一元素,便表现出缺素症,把这些必需的矿物质元素用适当的无机盐配成养分液,即能使植物正常生长,这就是溶液培育。设备与材料仪器:⑴烧杯,250ml、500ml各一个;⑵刻度吸管,5ml10支、1ml1支⑶量筒,1000ml1个;(4〕黑色蜡光纸适量;(5)周密PH试纸〔PH5-6〕或广泛PH指示剂;(6)搪瓷盘〔带盖〕1个;石英砂适量;培育瓶〔陶质盆或塑料广口瓶〕8个;(9),500ml11个。试剂:⑴硝酸钾; ⑵硫酸镁; ⑶磷酸二氢钾;⑷硫酸钾; ⑸硫酸钠; ⑹磷酸二氢钠;⑺硝酸钠;⑻硝酸钙;⑼氯化钙; ⑽硫酸亚铁; ⑾硼酸;⑿氯化锰;⒀硫酸铜; ⒁硫酸锌; ⒂钼酸;⒃盐酸;⒄乙二胺四乙酸二钠〔EDTA-。培苗:

试验步骤用搪瓷盘装入肯定量的石英砂或干净的河沙,将已浸种一夜的玉米〔或番茄〕种子等均匀地排列在砂面上,再掩盖一层石英砂,保持潮湿,然后放置在温和处发芽。第一片真叶完全展开后,选择生长全都的幼苗,留神地移植出来待用,移植时注意勿损伤根系。配制贮备液微量元素贮备按以下配方配制:称取HBO 2.86g3 4MnCl·4HO 1.81g2 2CuSO·5HO 0.08g4 2ZnSO·7HO 0.22g4 2HMoO·HO 0.09g,2 4 2缺素培育液的配制取7个1000ml种缺素培育液1000mlpH6-7,贴上标签,写明日期。然后把各瓶用黑色蜡光纸或黑纸包起来〔黑面对里〕,或用报纸包三层,并用打孔器在瓶盖中间打三个圆孔,把选好的植株去掉胚乳,并用棉花缠裹住茎基部,留神的通过圆孔固定在瓶盖上,使整个根系浸入培育液中,每瓶放三株,装好后将〔20-25℃〕3-4周。 表现的病症及最先消灭病症的部位。培育液每周换一次,为使根部生长良好,最好应在盖与溶液之间保存肯定空隙,以利通气。在下表中记录结果:留意试验用容器须洗干净以防污染。配缺素培育液时先在容器中参加适量DW以防贮备液相互反响生成沉淀。污染。放幼苗时摘除胚乳。植物组织渗透势的测定试验目的渗透势是水势的组分之一,是指由于细胞内溶质颗粒的存在而使水势下降的数值,纯水的渗透势为零,溶液的渗透势为负值。植物细胞的渗透势是植物的一个重要生理指标,对于植物的水分代谢、生长及抗性都具有重要的意义。常用于测定植物细胞与组织水势的方法有质壁分别法、冰点降低法、蒸汽压降低法等。成熟植物细胞水势的组成:Ψ=Ψs+ΨpΨs溶质势/渗透势依据Van‘tHoffEquation计算:Ψs=-CiRTψp压力势〔如细胞壁〕对细胞的压力而使水势增大的值。一般状况下细胞质体使产生压力势。当发生质壁分别时,ψp=0,这时Ψ=Ψs质壁分别法试验原理而对于一些溶质如蔗糖的透性较低。因此当把植物组织放在肯定浓度的外液中,组织内外的水分便可通过原生质膜依据水势梯度的方向而发生水分的迁移,当外液浓度较高时〔高渗溶液低时〔低渗溶液生质壁分别时〔初始质壁分别,质壁分别仅在细胞角隅处发生〕,细胞的压力势等于零,细胞的渗透势等于细胞的水势,也就等于外液的渗透势。该溶液即称为细胞或组织的等渗溶液,其浓度称为等渗浓度。试验设备与材料显微镜;镊子;载玻片;盖玻片;刀片;培育皿;移液管;蔗糖;洋葱试验步骤配制一系列不同浓度的蔗糖溶液,浓度分别为0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6M。取6个培育皿,编号,分别吸取上述浓度的蔗糖溶液各10ml放于培育皿内。浸没。投入时先从高浓度开头,每隔5min向下一浓度放2~3片洋葱表皮。在洋葱表皮在各浓度的蔗糖溶液中平衡30min后,从高浓度开头依次取出放入显微镜下观看质壁分别的状况〔低倍镜即可〕,记录观看结果。试验结果结果分析50%的细胞发生初始质壁质壁分别,而在其后一个浓度的蔗糖溶液中不发生质壁分别,以这两个浓度的平均浓度作为等渗浓度,其对应的渗透势即为细胞的渗透势。表:蔗糖溶液浓度与其渗透势留意:观看时要在载玻片上滴一滴同浓度的蔗糖溶液。试验用洋葱以紫色的最易于观看质壁分别,其它材料如紫鸭趾草、红甘蓝也可代替。冰点下降法试验原理:依据VanHoffψs=-icRT,因此只要知道溶液的ic值即颗粒的总浓度即可算出溶液的渗透势。而依据物理化学溶液理论之一——〔Raoult〕假设其单位体积中所溶解的溶质颗粒〔分子和离子〕总数一样,则引起冰点下降的数值也一样。试验说明,1摩尔的任何非电解质〔6.02×1023分子颗粒数〕1000克水中,则使水的冰点由0度下降至-1.857度;1摩尔的电解质溶解于1000克水中,其冰点下降值为解离的离子与不解离的分子的总摩尔数同1.857的乘积,即冰点下降值与溶质的总颗粒数有关。因此,欲求某一溶液的溶质颗粒数目,可先测其冰点下降数值,然后再按下式算出结果:OS=(△t)/1.857式中:OS为1000克水中所溶解的溶质颗粒数目,即重量摩尔渗透浓度〔osmolarity颗粒浓度ic值;△t为冰点下降数值(度);1.857为水的摩尔冰点下降常数。点渗透压计的测量原理是以冰点下降值与溶液的摩尔浓度成比例关系为根底,承受高灵敏度的感温元件热敏电阻测量溶液的冰点,通过电量转换,冰点下降值直接转换为常用渗透势单位(mosm/KGHO2时将被测液体样品置于半导体致冷槽中进展冷却,使之温度下降至-10度左右,通过强掁使之结冰,测定其冰点。渗透压计的操作过程承受程序自动掌握。试验仪器及材料冰点渗透压计(美国产Fiske210型);液氮罐;注射器;eppendorf管;纱布;吸水纸。试验步骤取肯定量的植物材料,用潮湿纱布轻轻擦去外表灰尘;将材料包在干净的细胞液挤出,存于Eppendorf管内,如临时不能测,可放入冰箱冰室内保存。进展校正。20ul“COOL”键致冷,约70Sec后,测定管内发出强振声,同时数字显示器显示数字,待数字稳定不变后,即可登记读数。下一个样品。结果分析冰点渗透压计已经直接将冰点下降值换算成渗透浓度单位〔ic,且显示正数,所以再依据Ψs=-icRT公式〔R=0.0083143L.MPa.Mol-.K-液的渗透势。留意结果不准确。仪器长期不用后需校正后再用。种子活力的快速测定试验目的了解测定种子活力和发芽率的方法。溴麝香草酚兰法〔BTB法〕试验原理:O,放出CO,CO溶2 2 2于水成为HCO。HCO解离为H+和HCO_,使得种胚周2 3 2 3 3围环境的酸度增加。用溴麝香草酚兰〔BTB〕来测定酸度的转变BTBPH6.0—7.6,色〔变色点为H7.1。材料:小麦种子仪器:恒温箱、培育皿、天平、烧杯、镊子、漏斗、滤纸试剂:0.1%BTB溶液:称取BTB0.1g,溶解于煮沸过的自来水中〔因配置指示剂的应为微碱性,使溶液呈蓝色或蓝绿色,而蒸馏水为微酸性不宜用数滴稀氨水,使之变为蓝色或蓝绿色。此液可长时期贮存于棕色瓶中。1%BTB琼脂凝胶:取0.1%BTB溶液100ml至于烧瓶中,另将1g琼脂剪碎后参加,用小火加热并不断搅拌。待琼脂完全溶解后,趁热倒入数个干净的培育皿中,使成为一均匀的薄层冷却后备用。方法与步骤:1、浸种:为了增加种胚的呼吸强度,使BTB反响快速而鲜亮,必需预先充分浸种。取小麦种子50粒,在30—50oC条件下,浸种3—5小时,2的间距应大些,使各种子的胚部相互离开〔直径10厘米的培育皿不宜超过50粒〕。务必使种子的胚部都向下,腹沟向上,当凝胶温度降至40oC时,沿玻棒认真倒入各种子之间,成一均匀薄层〔0.2-0.4cm为宜〕,使种胚埋没与胶层之中。330—50oC条件下小麦1-2小时,就可对光观看,并初次计数。〔观看时要从透射光下看〕。在蓝色背景下,凡局限于种胚四周,消灭较深的黄晕色圈的是活种子,无黄晕色圈的可能是死种子。结果计数。4同上。5BTB计数后,可将小麦种子种胚翻转向上,数日后,测定其真实发芽率。原理:

红墨水染色法凡生活细胞的原生质膜具选择性吸取力量,而死的种子细胞原生质膜丧失这种力量,于是染料便进入死细胞而使胚着色。仪器、材料与试剂:培育皿、镊子、刀片、5%红墨水〔红墨水5ml+95ml自来水〕、玉米种子。方法与步骤:1、浸种:〔同BTB法〕2200粒,沿胚和中线切为两半,将一半置于培育皿中,参加5%红墨水〔以漂浮种子为度〕,5-10分钟,〔温度高时时间可短些〕。染色后,倒去红墨水液,用水冲洗屡次,至冲洗液为无色止。检查种子死活。结果凡种胚不着色或着色很浅的为活种子,凡种胚与胚乳着色程度一样的为死种子。可用沸水杀死的种子为比照观看。3、计数种胚不着色或着色浅的种子数,算出其发芽率。原理:

纸上荧光法凡有生活力的种子和已经死亡的种子,它们的种皮对物质的透性是不同的,而很多植物的种子中又都含有荧光物质。利用对荧光物质的不同透性来区分种子的死活,方法简洁,特别是对十字花科植物的种子,尤为适用。仪器、材料与试剂:紫外、培育皿、镊子、滤纸〔无荧光〕、油菜种子。方法与步骤:1〔油菜、白菜等十字花科植物的种子〕100粒,于25—30oC水中浸泡2-3小时。23-5mm间隔整齐的排列在培育皿中的潮湿滤纸上,滤纸上水分不能太多,以免荧光物质流散。培育皿可以不必加盖,放置1.5-2小时取出种子,将滤纸阴干。取出的种子仍按原来挨次排列在另一皿中〔以备验证〕3,效果更好。4是死种子,可将这些种子拣出来集中在一个培育皿中,而让不产生荧光的种子留在另一培育皿中。维持适宜温度,让其自然发芽。种子萌发过程中淀粉、脂肪、蛋白质的转化原理种子的贮存物质淀粉、脂肪、蛋白质在萌发过程中,在各种水解酶的作用下,分别转变成简洁的有机化合物,如葡萄糖、蔗糖、氨基酸等。这些物质是构成器官的材料,也是供给呼吸作用的原料。原理:

淀粉的转化种子萌发过程中,需要消耗很多有机物,

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