高中生物新人教版选择性必修3动物细胞融合技术与单克隆抗体（37张）课件

生物第2章细胞工程第2节动物细胞工程二动物细胞融合技术与单克隆抗体01教材自主导读02核心知识突破03随堂达标检测课程标准素养要求1.阐明动物细胞融合是指通过物理、化学或生物学等手段，使两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程。2．概述细胞融合技术是单克隆抗体制备的重要技术。1.科学思维：通过学习单克隆抗体的制备过程，养成独立思考和独立学习的习惯，培养自学能力。2．社会责任：认同单克隆抗体技术在实际生产与生活中的应用。一、动物细胞融合技术两个或多个动物细胞细胞膜的流动性杂交遗传信息PEG灭活病毒诱导法有性杂交远缘杂交细胞遗传细胞免疫单克隆抗体二、单克隆抗体及其应用1．传统抗体的获得(1)方法：向动物体内反复注射某种抗原，使动物产生______，从动物______中分离所需抗体。(2)缺点：产量低、纯度低、____________。抗体血清特异性差2．单克隆抗体的制备(1)制备原理①B淋巴细胞的特点：一个B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体。②骨髓瘤细胞的特点：能在体外大量______。③B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合得到的融合细胞，既能____________又能产生足够数量的____________。增殖大量增殖特定抗体(2)制备过程骨髓瘤能分泌所需抗体[提醒]在进行免疫处理时,一般要每间隔一段时间重复注射相同抗原，以获得更多的B淋巴细胞。3．单克隆抗体的优点及应用抗原抗原同位素或荧光标记运载药物肿瘤治疗疾病抗原(1)动物细胞融合过程中既有细胞膜融合也有细胞核的融合。(

)(2)与植物原生质体融合相比,动物细胞融合特有的诱导因素有聚乙二醇、灭活的病毒。(

)(3)动物体细胞融合后的杂交细胞仍然是二倍体细胞。(

)(4)单克隆抗体制备过程中两次筛选的目的相同。(

)(5)杂交瘤细胞的培养可以采取体内培养和体外培养两种方式。(

)(6)抗体—药物偶联物(ADC)通常由抗体和药物组成，对肿瘤细胞能选择性杀伤。(

)×√××√×知识点一动物细胞融合技术

1．生物工程技术产生后代个体的遗传物质或基因来源(1)杂种植株：遗传物质来自融合的两个亲本细胞。(2)经细胞培养获得的动物细胞：遗传物质只来自一个亲本。(3)动物细胞融合形成的杂交细胞：遗传物质来自融合的两个亲本细胞。2．植物体细胞杂交和动物细胞融合的比较项目植物体细胞杂交动物细胞融合原理细胞膜的流动性和植物细胞的全能性细胞膜的流动性步骤用酶解法去掉细胞壁后，诱导原生质体融合，形成杂种体细胞，再经过植物组织培养形成杂种植株分散成单个细胞后诱导细胞融合项目植物体细胞杂交动物细胞融合诱导方法物理方法、化学方法物理方法、化学方法、灭活病毒结果形成杂种植株形成杂种细胞[温馨提示]

病毒在生物技术中的应用(1)灭活的病毒能作为诱导剂，未灭活的病毒不能作为诱导剂。(2)病毒在不同过程或操作中的“身份不同”。在免疫调节中病毒属于抗原，在基因工程中可作为载体，在细胞工程中可作为诱导剂。1．(2021·山东菏泽期中改编)下列关于动物细胞融合的叙述，正确的是(

)A．动物细胞融合与植物原生质体融合的原理不同B．动物细胞融合后形成的杂交细胞一般为双核细胞C．常用的诱导动物细胞融合的因素或方法有PEG融合法、灭活病毒诱导法、电融合法、紫外线照射等D．细胞融合技术突破了有性杂交的局限，使远缘杂交成为可能√解析：动物细胞融合与植物原生质体融合的原理相同，都为细胞膜的流动性，A错误；动物细胞融合后形成的具有两个或多个动物细胞遗传信息的单核细胞，称为杂交细胞，B错误；紫外线照射常用来进行人工诱变，它不是诱导动物细胞融合的方法，诱导动物细胞融合的物理法有电融合法等，C错误；细胞融合技术突破了有性杂交的局限，使远缘杂交成为可能，D正确。2．下图为细胞融合的示意图，下列叙述正确的是(

)

A．若a细胞和b细胞是植物细胞，需先去分化再诱导融合B．a细胞和b细胞之间的融合需要促融处理后才能实现C．c细胞的形成与a、b细胞细胞膜的流动性无关D．c细胞将同时表达a细胞和b细胞中的所有基因√解析：a、b细胞如果为植物细胞，则需要去细胞壁，但不需要去分化，A项错误；两细胞融合需要用物理或化学等方法促融，其融合过程体现了细胞膜具有一定的流动性，B项正确，C项错误；融合后的杂交细胞中的基因仍是选择性表达的，不会表达全部的基因，D项错误。

发展素养

长句特训

与高考接轨1．(科学思维)动物细胞之间或动物与人细胞之间都可以进行融合，进行细胞融合后的细胞有多少种？_________________。(不考虑两个以上细胞之间的融合)答案：5种2．(科学思维)动物细胞融合与受精作用的区别：________________。答案：①受精作用是在同种生物之间进行的，精子和卵子不需要任何诱导剂，就可以融合形成受精卵。②动物细胞融合可在不同物种间进行，由于物种间存在生殖隔离，所以自然条件下不能融合成杂种细胞，必须诱导才能融合知识点二单克隆抗体及其应用

1．两种抗体的比较2．浆细胞、骨髓瘤细胞和杂交瘤细胞的比较3．两次筛选的比较4．植物体细胞杂交和单克隆抗体制备的比较比较项目植物体细胞杂交(番茄—马铃薯植株)单克隆抗体制备过程第1步原生质体的制备(酶解法)正常小鼠的处理(注射特定抗原)第2步原生质体的融合(物理法、化学法)动物细胞融合(物理法、化学法、生物法)第3步杂种细胞的筛选和培养杂交瘤细胞的筛选和培养第4步杂种植株鉴定提纯单克隆抗体比较项目植物体细胞杂交(番茄—马铃薯植株)单克隆抗体制备融合前处理用酶解法除去细胞壁：纤维素酶、果胶酶注射特定抗原，免疫处理正常小鼠意义和用途①打破生殖隔离，实现远缘杂交育种；②培育作物新品种①制备单克隆抗体；②有助于疾病的诊断、治疗、预防[温馨提示]

(1)给健康小鼠注射的是特定抗原。目的是刺激机体发生免疫应答，从而产生相应浆细胞或相应B淋巴细胞。(2)在用选择培养基筛选杂交瘤细胞的过程中，筛选淘汰了未融合的细胞和同种细胞融合后形成的细胞(“BB”细胞、“瘤瘤”细胞)都会被淘汰，只有融合的杂交瘤细胞被选择保留了下来。1．(不定项)对于下面制备单克隆抗体过程示意图的叙述，不正确的是(

)

A．图中有1处明显错误B．②中两两融合的细胞有5种，筛选保留了1种C．③杂交瘤细胞均能产生抗体D．⑤可以无限增殖并分泌相应抗体√√解析：图中的错误是用于提取B淋巴细胞的小鼠没有经过免疫，A正确；②中两两融合的细胞有3种，为第一次筛选，目的是筛选出杂交瘤细胞,B错误；③杂交瘤细胞是由B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合形成的,但由脾脏中提取的B淋巴细胞包括非免疫的B淋巴细胞和已免疫的浆细胞，因此,③杂交瘤细胞不一定都能产生抗体，C错误；⑤是经过两次筛选得到的杂交瘤细胞群，具有无限增殖和分泌相应抗体的特点，D正确。2．(2020·高考全国卷Ⅰ)为研制抗病毒A的单克隆抗体，某同学以小鼠甲为实验材料设计了以下实验流程。回答下列问题：(1)上述实验前必须给小鼠甲注射病毒A，该处理的目的是_________。(2)写出以小鼠甲的脾脏为材料制备单细胞悬液的主要实验步骤：___________________。(3)为了得到能产生抗病毒A的单克隆抗体的杂交瘤细胞,需要进行筛选。图中筛选1所采用的培养基属于____________，使用该培养基进行细胞培养的结果是________________________________________。图中筛选2含多次筛选，筛选所依据的基本原理是________________。(4)若要使能产生抗病毒A的单克隆抗体的杂交瘤细胞大量增殖，可采用的方法有______________________(答出2点即可)。解析：(1)实验前给小鼠甲注射病毒A，其目的是刺激机体发生免疫反应,从而产生能够分泌抗病毒A抗体的B淋巴细胞。(2)制备单细胞悬液的主要实验步骤：从健康动物体内取出组织块，剪碎，用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理一段时间，这样组织就会分散成单个细胞，然后用培养液将分散的细胞稀释制成单细胞悬液。(3)图中筛选1采用特定的选择培养基，在该培养基上，未融合的细胞和融合的具有同种核的细胞都会死亡，只有融合的杂种细胞(杂交瘤细胞)才能生存。图中筛选2含多次筛选，利用抗原与抗体特异性结合的原理,就可获得能分泌所需抗体的杂交瘤细胞。(4)要使能产生抗病毒A的单克隆抗体的杂交瘤细胞大量增殖，可将杂交瘤细胞在体外条件下大规模培养，或注射到小鼠腹腔内增殖。答案：(1)诱导小鼠甲产生能够分泌抗病毒A抗体的B淋巴细胞(2)取小鼠甲脾脏剪碎，用胰蛋白酶处理使其分散成单个细胞，加入培养液制成单细胞悬液(3)选择培养基只有杂交瘤细胞能够生存抗原与抗体的反应具有特异性(4)将杂交瘤细胞注射到小鼠腹腔内增殖；将杂交瘤细胞在体外培养核心知识小结[要点回眸]核心知识小结[答题必备]1.动物细胞融合是指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程。2.诱导动物细胞融合常用的方法有PEG融