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文档简介
CCS
30
DB36 36/T
1869—2023香菇菌种生产技术规程Technical
regulation
for
spawn
of
Lentinula
edodes 江西省市场监督管理局发
布
18692023
II
DB36/T
1869
1.1-2020
的规定起II
18692023
edodes)菌种的术语和定义、菌种生产要求、母种生产、原种与栽
GB
9688
GB
GH/T
NY/T
528 NY/T
NY/T
NY/T
NY/T
3.1
茸(本)(Basidiomycota
1013-20153.13.2
3.3
DB36/T
1869
19170-2003,3.1,有改动]3.4
28)cm(0.004~0.005)cm聚丙烯塑料袋为容器,也称为二级种。3.5
3.6
3.7
4.1
4.2
4.3
18692023
5.1
5.2
试管一般选用18
mm180
mm200
mm。5.3
配方一:PDA培养基(马铃薯葡萄糖琼脂培养基):马铃薯200
g,琼脂20
1000
g,琼脂20
mL。5.4
5.5
~124(0.11
5.6
~65
5.7
抽取3%~5%冷却的试管,在28
5.8
先用75%酒精棉球将超净工作台以及接种工具表面擦拭消毒,再打开紫外灯照射30
挑选生长长势良好、形状规则、未开伞、无虫蛀的香菇子实体作为种菇,用75%的酒精棉球对种菇在菌盖与菌柄交界处切取10
mm
mm“目”字形组织小块为接种材料。用接种针挑取一小块组织片,试管放入25
d~3
5×DB36/T
1869
选取斜面上菌丝茁壮、长势优良的试管,用接种工具挑取(3~5)mm(3~5)
mm的菌块,按无菌操作要求,转接到新的试管培养基中,置于25℃的培养箱中培养15
接种48
h后应做首次检查,挑拣出未萌发或污染母种。母种菌落长至直径2
cm左右时,进行第二次
6.1
6.2
78%、麦麸
1%;
cm
cm
所有原料应符合NY/T
原种采用850
28)cm栽培种采用同原种要求的玻璃瓶子,或(15~17)cm(33~35)cm(0.004~0.005)cm的聚丙
cm~1.5
cm~12
cm,每袋(瓶)装培养基500
g~600
h内进行灭菌。高压灭菌:培养基在121~124(0.11
MPa~0.14
MPa)
h之内使灭菌温度达到100
10
先用75%酒精棉球将接种袋(瓶)以及接种工具表面擦拭消毒,放入接种箱或接种室内,再对接种
~2650
DB36/T
1869
原种及栽培种在培养期间,按照NY/T
6.2.10
6.3
1)配方一:葡萄糖20
g,蛋白胨5
g,酵母膏3
g,磷酸二氢钾3g,硫酸镁1.5
加水至1000
mL,pH
2)配方二:玉米粉20
g,葡萄糖20
g,酵母膏5
g,牛肉膏4
g,磷酸二氢钾2
g,硫酸镁1
g,维生素B1
mg,加水至1000
mL,pH
18692023将分装好的摇瓶放入灭菌锅内,锅内留有一定的空隙。灭菌蒸汽压力升至0.1
MPa~0.12
mm
(3~5)mm的母种块迅速转接于待接种摇瓶培养基内。将接种后的三角瓶置于摇床上振荡培养,
MPa、温度126,维持40
a)配方1:玉米粉20
g,葡萄糖20
g,酵母膏5
g,牛肉膏4
g,磷酸二氢钾2
g,维生素B1
g,加水至1000
mL,PH
b)配方2:马铃薯100
,葡萄糖10
g,磷酸二氢钾2
g,消泡剂0.3
mL,pH
c)配方3:玉米粉20
g(煮汁),葡萄糖20
g,蛋白胨5
g,磷酸二氢钾2
g,硫酸镁1
g,加水至1000
mL,pH
%,加入0.03
%消泡剂,通入空气搅拌1
min~2
发酵罐加热层通入冷水,水位低于排水口20
cm,关闭进、排水阀门加热。待加热层蒸汽压力达到0.05
MPa时,缓慢打开排气阀降压至0
MPa,关闭排气阀,再次升压至0.11
MPa,待发罐培养层蒸汽压力达到0.05
MPa时,缓慢打开排气阀降压至0
MPa,关闭排气阀,再次升压至0.11
MPa,同时打开空气过滤器灭菌,微开排气阀,维持50
min~60
灭菌结束,关闭空气过滤器灭菌阀与排气阀,缓慢打开空气过滤器排水阀降压至0
入冷水降温;同时缓慢打开发酵罐培养层排气阀降压,待压力接近0
MPa时向培养层内通入无菌空气,调整排气阀,维持罐压0.04
接入摇瓶菌种,接种量为2
%~4%。将摇瓶接种管和发罐接种口用75
%酒精消毒,用95
%酒精的火焰圈套在接种口上,轻微打开呼吸器阀门,使发酵罐压力为0
MPa。点燃
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