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文档简介

CCS

30

DB36 36/T

1869—2023香菇菌种生产技术规程Technical

regulation

for

spawn

of

Lentinula

edodes 江西省市场监督管理局发

18692023

II

DB36/T

1869

1.1-2020

的规定起II

18692023

edodes)菌种的术语和定义、菌种生产要求、母种生产、原种与栽

GB

9688

GB

GH/T

NY/T

528 NY/T

NY/T

NY/T

NY/T

3.1

茸(本)(Basidiomycota

1013-20153.13.2

3.3

DB36/T

1869

19170-2003,3.1,有改动]3.4

28)cm(0.004~0.005)cm聚丙烯塑料袋为容器,也称为二级种。3.5

3.6

3.7

4.1

4.2

4.3

18692023

5.1

5.2

试管一般选用18

mm180

mm200

mm。5.3

配方一:PDA培养基(马铃薯葡萄糖琼脂培养基):马铃薯200

g,琼脂20

1000

g,琼脂20

mL。5.4

5.5

~124(0.11

5.6

~65

5.7

抽取3%~5%冷却的试管,在28

5.8

先用75%酒精棉球将超净工作台以及接种工具表面擦拭消毒,再打开紫外灯照射30

挑选生长长势良好、形状规则、未开伞、无虫蛀的香菇子实体作为种菇,用75%的酒精棉球对种菇在菌盖与菌柄交界处切取10

mm

mm“目”字形组织小块为接种材料。用接种针挑取一小块组织片,试管放入25

d~3

5×DB36/T

1869

选取斜面上菌丝茁壮、长势优良的试管,用接种工具挑取(3~5)mm(3~5)

mm的菌块,按无菌操作要求,转接到新的试管培养基中,置于25℃的培养箱中培养15

接种48

h后应做首次检查,挑拣出未萌发或污染母种。母种菌落长至直径2

cm左右时,进行第二次

6.1

6.2

78%、麦麸

1%;

cm

cm

所有原料应符合NY/T

原种采用850

28)cm栽培种采用同原种要求的玻璃瓶子,或(15~17)cm(33~35)cm(0.004~0.005)cm的聚丙

cm~1.5

cm~12

cm,每袋(瓶)装培养基500

g~600

h内进行灭菌。高压灭菌:培养基在121~124(0.11

MPa~0.14

MPa)

h之内使灭菌温度达到100

10

先用75%酒精棉球将接种袋(瓶)以及接种工具表面擦拭消毒,放入接种箱或接种室内,再对接种

~2650

DB36/T

1869

原种及栽培种在培养期间,按照NY/T

6.2.10

6.3

1)配方一:葡萄糖20

g,蛋白胨5

g,酵母膏3

g,磷酸二氢钾3g,硫酸镁1.5

加水至1000

mL,pH

2)配方二:玉米粉20

g,葡萄糖20

g,酵母膏5

g,牛肉膏4

g,磷酸二氢钾2

g,硫酸镁1

g,维生素B1

mg,加水至1000

mL,pH

18692023将分装好的摇瓶放入灭菌锅内,锅内留有一定的空隙。灭菌蒸汽压力升至0.1

MPa~0.12

mm

(3~5)mm的母种块迅速转接于待接种摇瓶培养基内。将接种后的三角瓶置于摇床上振荡培养,

MPa、温度126,维持40

a)配方1:玉米粉20

g,葡萄糖20

g,酵母膏5

g,牛肉膏4

g,磷酸二氢钾2

g,维生素B1

g,加水至1000

mL,PH

b)配方2:马铃薯100

,葡萄糖10

g,磷酸二氢钾2

g,消泡剂0.3

mL,pH

c)配方3:玉米粉20

g(煮汁),葡萄糖20

g,蛋白胨5

g,磷酸二氢钾2

g,硫酸镁1

g,加水至1000

mL,pH

%,加入0.03

%消泡剂,通入空气搅拌1

min~2

发酵罐加热层通入冷水,水位低于排水口20

cm,关闭进、排水阀门加热。待加热层蒸汽压力达到0.05

MPa时,缓慢打开排气阀降压至0

MPa,关闭排气阀,再次升压至0.11

MPa,待发罐培养层蒸汽压力达到0.05

MPa时,缓慢打开排气阀降压至0

MPa,关闭排气阀,再次升压至0.11

MPa,同时打开空气过滤器灭菌,微开排气阀,维持50

min~60

灭菌结束,关闭空气过滤器灭菌阀与排气阀,缓慢打开空气过滤器排水阀降压至0

入冷水降温;同时缓慢打开发酵罐培养层排气阀降压,待压力接近0

MPa时向培养层内通入无菌空气,调整排气阀,维持罐压0.04

接入摇瓶菌种,接种量为2

%~4%。将摇瓶接种管和发罐接种口用75

%酒精消毒,用95

%酒精的火焰圈套在接种口上,轻微打开呼吸器阀门,使发酵罐压力为0

MPa。点燃

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