皮肤刺激试验测定_第1页
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皮肤刺激试验测定1目的检测消毒剂对实验动物皮肤的刺激/腐蚀作用和强度。2实验动物每次试验至少需3只皮肤完好的健康家兔或豚鼠。3操作程序3.1一次完整皮肤刺激试验(1)在试验前24h，用脱毛剂将家兔或豚鼠背部脊柱两侧的毛去掉，不得损伤皮肤。去毛范围，左、右各约3cm×3cm。(2)次日将受试物(浓度一般为皮肤消毒应用液的5倍或原液0.5ml（g）直接滴于面积为2.5cm×2.5cm的一侧去毛完整皮肤上，或滴于同样大小的2层~4层纱布上并敷贴在一侧去毛皮肤表面，然后用一层无刺激塑料膜或油纸覆盖，再用无刺激胶布固定。另一侧去毛皮肤作为空白对照(或溶剂对照)。敷贴时间为4h。试验结束后，用温水或无刺激性溶剂除去残留受试物。(3)3.2一次破损皮肤刺激试验（1）涂受试物前，在2.5cm×2.5cm的去毛皮肤上，用75％酒精清洁、消毒暴露皮肤，待酒精挥发后，用灭菌刀片或注射针头在皮区内划一个“井”形的破损伤口，并在该破损皮区内染毒。注意皮肤破损仅达表皮，不要伤及真皮。（2）手术前的皮肤准备，手术后受试物涂抹和局部皮肤反应的观察，评分方法同3.1。注意鉴别感染和原发性刺激反应的区别，若有感染可疑，应进行重复测试。3.3多次完整皮肤刺激试验（1）试验前动物皮肤准备同3.1（1）。（2）次日将受试物[浓度同3.1(2)]0.5ml（g）涂在一侧皮肤上，另一侧涂溶剂作为对照，在涂抹后4h，用水或无刺激的适宜溶剂清洗，除去残留物。每天涂抹一次，连续涂抹14d。在每次涂抹后24h观察结果，按表2-11评分。为了便于受试物的涂抹和结果观察，必要时应剪毛。对照区的处理方法同试验区。4评价规定4.1一次皮肤刺激试验在各个观察时间点，按照表2-11对动物的皮肤红斑与水肿形成情况进行评分，并分别按时间点将3只动物的评分相加，除以动物数，获得不同时间点的皮肤刺激反应积分均值(刺激指数)。取其中最高皮肤刺激指数，按表2-12评定该受试物对动物皮肤刺激强度的级别。4.2多次皮肤刺激试验按下列公式计算每天每只动物平均积分（刺激指数），并以表2-12判定皮肤刺激强度。∑（每只动物14d的红斑和水肿总积分）每天每只动物平均积分=受试动物数×14表2-11皮肤刺激反应的评分标准皮肤刺激反应皮肤刺激反应评分红斑形成：无 0勉强可见 1明显 2严重 3紫红色红斑，并有焦痂 4水肿形成:无 0勉强可见 1皮肤隆起，轮廓清楚 2水肿隆起约1mm 3水肿隆起超过1mm 4表2-12皮肤刺激强度分级皮肤刺激指数刺激强度级别0～＜0.5 无刺激性0.5～＜2.0 轻

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