肝移植术后早期细胞免疫功能定量评估模型的建立

肝移植术后早期细胞免疫功能定量评估模型的建立第二军医大学附属上海长征医院器官移植科李瑞东基金项目：上海市科委科研计划项目课题（08410701100）课题负责人：王正昕教授研究背景合适维持受者最合适的免疫状态，避免抑制过度增加机会性感染、药物毒性和肿瘤发生的风险或抑制不足造成排斥反应的发生，仍然是移植术后所面临的主要挑战。保持合理的血药浓度只是免疫抑制治疗的手段，维持合适的免疫状态才是目的定量免疫抑制药物的血药浓度与免疫抑制效力之间没有线性关系，很难单纯依靠监测血药浓度调整免疫治疗方案。量化评估肝移植受者的免疫功能是指导个体化免疫抑制方案应用的基础，目前缺乏有效的参考。可比同一受者的不同免疫指标的动态变化可能并不一致，如何判断免疫功能总体的变化?不同受者的不同免疫指标间的高低可能并不一致，如何比较不同受者间免疫功能总体的高低？研究依据ImmuKnowATP2002年以来，美国FDA批准体外检测CD4+T细胞活化后细胞内ATP浓度的方法——ImmuKnowTM，被用于移植后量化评估CD4+T细胞免疫功能。CD4+TcellcountCD4+T细胞的数量是发挥细胞免疫功能的基础，其计数与ImmuKnowATP值并无明显线性相关性。CD4+/CD8+ratio

异常升高预示免疫功能亢进而降低则预示免疫功能低下。研究目的ImmuKnowATPCD4/CD8ratioCD4+Tcellcount通过分析肝移植早期感染或排斥反应的发生与上述3个指标的相关性，建立综合量化评估肝移植术后早期细胞免疫功能的数学模型研究对象选择2009年至2010年的无心跳供体肝移植病例，排除有以下情况的病例（1）移植术前做过脾切除；（2）术前已存在感染；（3）有严重手术并发症(血管栓塞或狭窄、胆瘘或胆道狭窄)；（4）原发性供肝无功；（5）不愿参与检测的受者。共有194例肝移植受者纳入研究。术后第3、7、14天检测CD4+T淋巴细胞计数及CD4+/CD8+比值和ImmuKnowATP值。临床措施免疫抑制方案术中免疫诱导采用静脉滴注甲强龙（10mg/kg），或联合巴利昔单抗（术中20mg，第4天20mg），术后采用口服他克莫司为主的免疫抑制方案。感染的预防和监测定期做微生物学监测，常规联合替考拉宁和头孢吡肟预防细菌感染5~7天，对于检测到真菌定植的病例，给予棘白菌素类或唑类药物预防真菌感染。对于检测到CMVDNA的受者，给予更昔洛韦预防病毒感染。排斥反应的诊断当移植后受者肝功能异常变化，即行肝穿刺组织病理学检查，标本经HE染色镜检，根据肝小叶结构、肝细胞水肿、小胆管炎性损伤、内皮细胞肿胀、中央静脉淤血以及汇管区炎细胞浸润程度，判断Banff排斥活动指数(RAI)研究方法发生感染或排异的移植受者取发生前最近一次的检测值作为异常样本组纳入统计分析。未发生临床不良事件的移植受者，取第14天的检测结果作为免疫稳定组纳入统计分析。分组感染组（50）稳定组（111）排异组（33）样本选择研究方法统计学分析与处理单变量分析：方差分析，LSD-t检验，Spearman等级相关分析多变量分析：采用判别分析（Discriminantanalysis）建立定量模型：将三判别函数方程进行数学转