微生物遗传-2-复制

3染色体及其复制3.1DNA分子的复制3.2原核生物的染色体及其复制3.3真核生物的染色体及其复制3.1DNA分子复制的特点半保留复制子代DNA分子=模板母链+新合成互补链具有复制起点和复制方向起点：Originofreplication(ori)，原核1个，真核多个，E.coli,245bp。方向：双向或单向，5’→3’半不连续复制复制方向

5’→3’半不连续复制先导链：连续随从链：不连续冈崎片段：DNA在复制时，由随从链所形成的一些子代DNA短链。冈崎片段大小原核:1000～2000bp，真核:约100bp。

3.2原核生物染色体及其复制原核微生物：细菌、放线菌和蓝细菌3.2.1组成DNA是主要组分，占80%以上，其余为蛋白质和RNA大多为一条共价闭合的环状DNA分子，少数多个环或线状。大肠杆菌（E.coli）：4.7Mb；枯草芽孢杆菌：4.2Mb；根癌土壤杆菌：2个环状DNA，3.0Mb和2.1Mb；3.2.2细菌染色体的复制相关酶类：DNA聚合酶、引物酶、连接酶和其它蛋白质过程：起始（oriC,

包含有11个GATC序列

）、延伸和终止（terminationsite:tecA）DNA聚合酶（DNAPolymerase）PolI、polIIPolIII：DNA链延长的主要聚合酶。ATCGCGATAGCGTAGCTGCGACCTAGC5’3’TAGCGCTATCGCATCGACGCTGGATCG3’5’解旋酶解链酶复制的起始：解旋、解链作用是解开、理顺DNA链，维持DNA在一段时间内处于单链状态；此过程消耗能量，2ATP/bp。DnaA辨认起始点、DnaC协助DnaB结合在起始点并打开双链；SSB，单链结合蛋白。拓扑异构酶（DNA旋转酶）ATCGCGATAGCGTAGCTGCGACCTAGC5’3’TAGCGCTATCGCATCGACGCTGGATCG3’5’GGAUCG5‘AUCGCG5‘引物酶引物酶RNA引物RNA引物DNA复制的起始：合成引物引物酶primase：催化引物合成的酶，属于RNA聚合酶又不同于转录酶。引发体primosome：DnaA、DnaB、DnaC及其它复制因子形成复合体，再结合引物酶形成较大的聚合体再结合到模板DNA上，构成引发体ATCGCGATAGCGTAGCTGCGACCTAGCCTAGC5’3’TAGCGCTATCGCATCGACGCTGGATCG3’5’GGAUCG5‘AUCGCG5‘TAGCGCTATCGCATCGACGCTGGATC3’ATAGCGTAGCTGCGAGGATCG3’DNA聚合酶DNA聚合酶DNA复制的起始：子链的延伸

DNA聚合酶Ⅰ：校正聚合过程中碱基的错配，保证DNA复制的高度精确性。

DNA聚合酶Ⅲ：负责大肠杆菌染色体DNA复制的酶。细胞内分子个数比例：DNApolⅠ：Ⅱ：Ⅲ=400：40：20，但是polIII的比活性超过polI的10倍DNA聚合酶Ⅲ全酶全酶是由10种不同亚基组成的不对称二聚体。核心酶起主要作用同时完成前导链和后随链的合成原核染色体复制的终止ter序列(terminationsite)22bp，与终止蛋白（Tus蛋白）结合，使复制叉停止移动terE,terD,terA和terF,terB,terC复制方式：滚环复制；θ复制；D环复制3.3真核生物的染色体及其复制3.3.1组成和结构染色质：线性DNA分子和组蛋白组成核小体：由DNA和组蛋白组成的颗粒染色质纤丝：螺旋管结构，染色质的二级结构染色体：由纤丝进一步折叠形成的超螺旋环附着在邮费组蛋白组成的中央骨架，形成染色体。3.2真核染色体的复制3.2.1生活周期G1期、S期、G2期和M期，DNA复制只发生在S期。复制的调控：起始许可因子酵母DNA复制起始的许可因子（licensingfactor）为MCM2,3,5蛋白，在有丝分裂期间进入细胞核。许可因子在复制周期开始以后被灭活3.2.2复制特点有起始点，无终止点，双向复制子相对较小复制速度较慢生长速度不同，启动的复制起始点的数量也不同。3.3.1真核生