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文档简介

选修1——生物技术实践

专题一传统发酵技术生物选修1一专题复习课题1果酒和果醋制作

复习目标:

说明果酒和果醋制作的原理设计制作果酒和果醋的装置完成果酒和果醋的制作生物选修1一专题复习一、基础知识(一)、果酒制作1、发酵菌种:

(1)分类地位:单细胞

生物(真菌)(2)代谢类型:

.

(3)发酵条件:

①温度:是酵母菌

的重要条件。酵母菌生长繁殖的最适温度为

左右,酒精发酵时将温度严格控制在

。②氧气:前期需O2,后期

。(理由是

)③PH:呈

。(5.0~6.0)真核异养兼性厌氧型生长发酵20℃18℃~25℃不需O2酸性先有氧呼吸大量繁殖,后无氧条件酒精发酵生物选修1一专题复习在

的发酵液中,酵母菌能大量生长繁殖,而绝大多数其他微生物都因无法适应这一环境而受到抑制。故在利用酵母菌自制葡萄酒的过程中,不需要进行灭菌。2、制作原理:(用反应式表示)(1)

;(2)

.缺氧呈酸性C6H12O6

+6O26CO2

+6H2OC6H12O62C2H5OH+2CO2

生物选修1一专题复习例:有酿制葡萄酒的两个简易装置,请分析回答(1)果酒的制作离不开酵母菌,酵母菌在有氧无氧条件下都能生存,所以,它属于________微生物。(2)在葡萄酒的自然发酵过程中,酵母菌的来源是

。(3)制作果酒,需将温度严格控制在_____℃。制作果酒后制果醋,应将温度控制在_______。(4)葡萄汁装入发酵瓶时,要留有大约1/3的空间,这是因为_________。既为酵母菌大量繁殖提供适量的氧气,又防止发酵旺盛时汁液溢出兼性厌氧型附着在葡萄皮上的野生型酵母菌

18-2530—35℃生物选修1一专题复习(5)甲装置中,A液体是_____,NaHCO3溶液的作用是

;葡萄汁若用乙装置,在发酵过程中,必须进行的操作是

。与乙装置相比,甲装置的优点是

。(6)果汁发酵后是否有酒精产生,可用

来检验。在酸性条件下,该试剂与酒精反应呈现

。在果酒酿造过程中,如果果汁灭菌不严格,含有醋酸杆菌,在酒精发酵旺盛时,醋酸杆菌能否将果汁中的糖发酵为醋酸?

。灰绿色不能吸收酵母菌酒精发酵产生的CO2每隔12小时左右(一定的时间)将瓶盖拧松一次既能及时吸收(发酵产生的)CO2,又能减少被杂菌污染的机会重铬酸钾生物选修1一专题复习(二)、果醋制作1、菌种:

(1)分类地位:单细胞

生物(2)代谢类型:

.

(3)发酵条件:①温度:醋酸菌的最适生长温度为

,醋酸发酵时将温度严格控制在此范围内。②氧气:醋酸菌是好氧细菌,要供应充足,要

不断通入氧气。③PH:呈

。原核异养需氧型30℃~35℃酸性生物选修1一专题复习2、原理:(用反应式表示)(1)氧气、糖源都

:醋酸菌将葡萄汁中的

分解成

。(糖制醋)(2)氧气充足、糖源不足:醋酸菌将

→乙醛→

。(酒变醋)果酒制作果醋的反应式为:

。充足糖醋酸乙醇醋酸C2H5OH+O2

CH3COOH+H2O生物选修1一专题复习(三)、菌种来源

1、酵母菌菌种的来源葡萄酒自然发酵的酵母菌主要是附着在

的酵母菌,放久的葡萄有酒味就是这个道理;为提高果酒品质,可以直接在果汁中加入人工培养的酵母菌或适当接种食品发酵的酵母菌。葡萄皮上生物选修1一专题复习2、醋酸菌菌种的来源通入的空气中会有一些醋酸菌,带到发酵液中,大量繁殖,而其他的菌因不适应这种条件而不能繁殖;也可以直接在果酒中加入醋酸菌。(可以先买一瓶醋,打开盖暴露于空气中,一段时间后在醋的表面有一层薄膜(实际是醋酸菌),可以用这层薄膜进行接种,这样可以明显缩短制作醋的时间。)生物选修1一专题复习二、实验设计(一)制作流程挑选葡萄果酒果醋酵母菌醋酸菌

冲洗榨汁酒精发酵醋酸发酵生物选修1一专题复习(二)发酵装置甲1、装置甲(带盖的瓶子)制葡萄酒,在发酵制酒过程中,每隔12h左右将瓶盖拧松一次,但又不打开,这样做的目的是

。当发酵产生酒精后,再将瓶盖打开,盖上一层纱布,进行制果醋的发酵。(如图)用带一层纱布的瓶子制醋纱布拧松是为了及时放出CO2气体,防止爆裂;不打开是为了防止杂菌污染生物选修1一专题复习出料口充气口排气口乙

2、装置乙的充气口在

时关闭,在

时连接充气泵不断向内

;排气口主要是排出

;排气口要通过一个长而弯曲的胶管与瓶身相连,这样做的目的是

;出料口的作用是

。酒精发酵醋酸发酵充入空气CO2防止杂菌污染对发酵情况进行及时的监测生物选修1一专题复习三、操作提示

(一)材料的

:选择

的葡萄,榨汁前先将葡萄进行

,除去

。1、冲洗的主要目的是

;冲洗应注意不能

,以防止

。2、先冲洗后除去枝梗的理由是

。选择和处理新鲜冲洗枝梗除去污物反复冲洗菌种流失避免除去枝梗时使葡萄破损,增加被杂菌污染的机会生物选修1一专题复习(二)防止

.

1、

要清洗干净,并晾干。2、

要清洗干净,用体积分数为70%的

消毒。3、装入葡萄汁后,

。发酵液被污染榨汁机发酵瓶酒精封闭充气口生物选修1一专题复习(三)控制好

.

1、葡萄汁装入发酵瓶时,要留有大约

的空间。

2、制葡萄酒的过程中,将温度严格控制在

,时间控制在

左右,可通过出料口

3、制葡萄醋的过程中,将温度严格控制在

,时间控制在

左右,并注意适时通过

。发酵的条件1/318℃~25℃10~12d对发酵情况进行及时监测30℃~35℃7~8d充气口充气生物选修1一专题复习四、结果分析、检验与评价

1、在果酒发酵中,生产出的葡萄酒呈深红色的原因是

。2、果汁发酵产物的检验:(1)检验有无酒精产生:用

(在

条件下),反应呈现

。(2)检验有无醋酸产生:可通过观察菌膜、嗅味和品尝、

检测等。红葡萄皮的色素进入发酵液重铬酸钾酸性灰绿色PH试纸生物选修1一专题复习[试题精选]1.(2008年南通市四县市高三联合试卷)下列关于果醋制作的说法正确的是()A.醋酸菌是好氧菌,在制作过程中要一直打开发酵瓶B.在制作葡萄醋的过程中,温度应严格控制在18~25℃C.当糖源不足时,醋酸菌先将酒精转变成乙醛,再将乙醛变为醋酸D.醋酸菌在糖源和氧气充足时,能将葡萄糖分解成醋酸和二氧化碳C生物选修1一专题复习2.(2008届五市三区调研卷)一位学生将葡萄糖和酵母菌溶液放入一个保温瓶中,并用带有两个孔的塞子封口,酵母—葡萄糖溶液的温度随时间慢慢地升高,指示剂的颜色也开始改变(该指示剂遇酸变红)。下列判断正确的是()(多选题)A.保温瓶内的温度将一直保持稳定不变B.保温瓶中氧气的含量对酵母菌呼吸作用的类型有重要的影响C.实验可用来测定酵母菌呼吸作用释放热量的变化D.指示剂变色的情况与保温瓶中空气的量无关,与葡萄糖的量有关BC生物选修1一专题复习

3.回答下列有关果酒和果醋制作的小题:(1)果酒和果醋制作时,用到菌种的代谢类型分别是

。(2)在果酒制作中,生产出的葡萄酒呈深红色,这种有色物质来源于

。在利用酵母菌自制葡萄酒的过程中,不需要进行灭菌,因为发酵液中的

能抑制绝大多数其他微生物的繁殖。异养兼性厌氧型异养需氧型红葡萄皮缺氧、酸性条件生物选修1一专题复习(3)可通过

证明醋酸的产生。为进一步确定酵母菌无氧呼吸的产物,可以再用

检测发酵瓶中有无酒精产生,正确的操作步骤是:先在试管中加入2mL

,然后加入3mol/L的

,振荡混匀后滴加

,若实验组反应呈现

,对照组试管中溶液无颜色变化,则可确定被鉴定物为酒精。重铬酸钾PH试纸发酵液H2SO4

重铬酸钾灰绿色生物选修1一专题复习(4)在果酒制作中,若酵母菌有氧呼吸和无氧呼吸消耗了等量的葡萄糖,则它们放出的CO2之和与它们消耗的O2之和比为()

A.1:1B.3:0C.6:0D.4:3(5)若酒精发酵中,经检测发酵装置活菌数量适宜但却不产生酒精,可能的原因是

。D装置密封性差,空气进入装置生物选修1一专题复习4.(08南京零模)下图是两位同学制果酒和果醋的装置。同学甲用A(带盖的瓶子)装置制葡萄酒,在瓶中加入适量葡萄汁,温度控制在18~25℃,每隔12h左右将瓶盖拧松一次(注意不是打开瓶盖)。当发酵产生酒精后,再将瓶盖打开,盖上一层纱布,温度控制在30~35℃,进行果醋发酵。同学乙用B装置,温度控制与甲相同,不同的是除制果酒时充气口用夹子夹紧外,排气的橡胶管也用夹子夹住,并且每隔12h左右松一松夹子

放出多余的气体。制果醋时打开夹子适时向充气口充气。经过20天左右;两位同学各自完成发酵制作据此回答有关问题:生物选修1一专题复习

(1)酵母菌与醋酸杆菌在结构上的最大区别是后者

。从制酒和制醋两阶段对装置的处理方式判断,酵母菌和醋酸杆菌的细胞呼吸类型依次是

。(2)同学甲在制酒阶段,每隔12h左右就要将瓶盖拧松一次;但又不打开,这样做的目的是

。(3)B装置中排气口要通过一个长而弯曲的胶管与瓶身相连,这样做的目的是

。(4)制葡萄酒时要将温度控制在18~25℃,而制葡萄醋时要将温度控制在30—35℃,原因是

。无成形的细胞核兼性厌氧型需氧型(有氧呼吸型)拧松是为了及时放出CO2气体,防止爆裂;不打开是为了防止杂菌污染防止杂菌污染18~25℃是酵母菌生长和发酵的适宜温度,30—35℃是醋酸菌生长和发酵的适宜温度生物选修1一专题复习5.某生物兴趣小组利用下图装置制作果酒和果醋,请分析回答下列问题。(1)制葡萄酒时,要将温度控制在

;制葡萄醋时,要将温度控制在

。(2)制作

时,应将2开关打开,以便

。制作果酒时,为保证发酵罐中有较多的菌体,必须先

,当达到一定数量后,应控制的培养条件是

,此时发酵作用的反应式是

。随着发酵程度的加深,液体密度会逐渐

。18℃~25℃30℃~35℃果醋充入空气(无菌)封闭充气口C6H12O62C2H5OH+2CO2

降低充入空气(无菌)生物选修1一专题复习(3)发酵过程应及时排气,这是因为

。(4)制作葡萄酒时,将时间控制在

d左右,可通过[]

对发酵情况进行

。制作葡萄醋时,将时间控制在

d左右,并注意适时通过[]

充气。(5)当果酒制作好之后,如果利用此装置继续制作果醋,为保证效果,应向发酵液中

。(6)在酿酒和酿醋的过程中都要涉及到各种微生物,在上述两过程中主要涉及到的生物在结构上本质区别是

。10~123出料口及时的监测7~82充气口发酵过程中产生大量CO2,及时排气是为了防止发酵瓶爆裂通入空气(无菌);加入醋酸菌前者有成形的细胞核,后者没有生物选修1一专题复习课题2腐乳的制作复习目标:说明腐乳制作过程的科学原理设计并完成腐乳的制作分析影响腐乳品质的条件生物选修1一专题复习一、基础知识1.发酵菌种(主要):

(还有

等)(1)分类地位:多细胞

生物(丝状真菌)(2)代谢类型:

.

(3)发酵条件:

①温度:温度控制在

。②氧气:

。③湿度:用保鲜膜控制湿度,并定期换气。

④豆腐的品质(含水量):

毛霉真核异养需氧型15℃~18℃需要70%青霉、酵母、曲霉、生物选修1一专题复习(4)分布:广泛,常见于

、水果、

、谷物上(5)特点:生长迅速,具有发达的白色

如下图。(实际上还有匍匐菌丝,可形成腐乳外面的“皮”)土壤蔬菜菌丝生物选修1一专题复习2、制作原理:毛霉等微生物产生的蛋白酶能将豆腐中的蛋白质分解成

;脂肪酶可将脂肪水解为

。在多种微生物的协同作用下,普通的豆腐转变成我们爱吃的腐乳。思考:腐乳味道鲜美,营养价值较高,原因主要有(1)

;(2)

。小分子的肽和氨基酸甘油和脂肪酸大分子分解成小分子,易吸收大分子分解成小分子,营养物质种类增加生物选修1一专题复习先创造条件让毛霉生长再加盐控制毛霉的生长

控制毛霉的生长,同时增加风味和口感前期发酵二、实验设计后期发酵让豆腐上长出毛霉加盐腌制加卤汤装瓶密封腌制生物选修1一专题复习相关资料1.毛霉的生长:温度控制在

,并保持湿度。约

后,开始生长,

后菌丝生长旺盛,

后布满菌丝。豆腐块上的毛霉来自

,现代的腐乳生产是在严格

的条件下,将

直接接种在豆腐上(可避免杂菌污染,保证质量)。2.加盐腌制:随着层数的加高而

,接近瓶口的盐要

。腌制约

天左右。加盐的作用:①使豆腐块析出水分变硬;②

;③调味15℃~18℃空气中的毛霉孢子优良毛霉菌种48h3d5d无菌增加盐量铺厚一些8抑制微生物生长,避免豆腐腐败变质生物选修1一专题复习3.配制卤汤:卤汤是由

配制而成。酒的含量一般控制在

左右。加酒可抑制

,同时能使腐乳具有独特的香味调味。香辛料种类多可

,也具有防腐杀菌的作用。酒香辛料12%微生物的生长调节腐乳的风味生物选修1一专题复习三、操作提示(一)控制好

的用量

1.用盐腌制时,注意控制盐的用量。盐的浓度过低,不足以

,可能导致

;盐的浓度过高,会影响

。豆腐块与盐的比列为。

2.卤汤中酒的含量应控制在

左右。酒精含量过高,腐乳成熟的时间

;酒精含量过高,不足以抑制

,可能导致豆腐

。材料抑制微生物的生长豆腐腐败变质腐乳的口味12%延长微生物的生长腐败变质5:1生物选修1一专题复习(二)防止

.1.用来腌制腐乳的玻璃瓶,洗刷干净后要用

消毒。2.装瓶时,操作要

。整齐地摆放好豆腐、加入卤汤后,要用胶条将瓶口

。封瓶时,最好将瓶口通过酒精灯的

,防止瓶口被污染。杂菌污染沸水迅速小心密封火焰3、抑制微生物的生长应加

。盐、酒、卤汤生物选修1一专题复习四、泡菜制作1、乳酸菌:原核、分裂生殖、异养厌氧3、流程:菜叶、盐水、装坛、密闭2、原理:C6H12O6→2C3H6O3+2ATP4、测定亚硝酸盐:NO2-+对氨基苯磺酸→玫瑰红生物选修1一专题复习专题1-3制作泡菜并检测亚硝酸盐含量一、基础知识1、乳酸菌①____细胞的______生物;②种类(常见):________菌和______菌③增殖方式:______生殖;④分布:空气、_____、植物体表、人或动物的______等。单原核乳酸链球乳酸杆分裂土壤肠道常用于生产酸奶生物选修1一专题复习⑤代谢类型:____________

在_____条件下,能分解葡萄糖为_______,可用来生产泡菜和______。⑥反应式:_______________________________异养厌氧型无氧乳酸酸奶C6H12O6酶2C3H6O3(乳酸)+少量能量制作泡菜的原理:乳酸菌无氧呼吸将葡萄糖分解成乳酸生物选修1一专题复习2、亚硝酸盐①理化特性:为___色粉末,___溶于水。白易在人体内的代谢特点:正常情况下亚硝酸盐可以_________;只有在特定条件下(适宜的_____、___和___________作用),才会转变为致癌物——_______。随尿排出

PH

温度

一定亚硝胺

的微生物

1、材料准备(1)选择泡菜坛:标准是

,否则容易引起蔬菜腐烂。(2)选择原料:质地鲜嫩、无虫咬、无烂痕斑点。火候好无裂纹无砂眼坛沿深盖子吻合好生物选修1一专题复习2、制作过程(1)原料处理:将新鲜蔬菜预先清洗、晾晒,然后切成

。(2)配制盐水:泡菜盐水按清水和盐为

质量比配制,并将盐水

备用。(3)装坛:将预处理的新鲜蔬菜混匀后装坛,装至

时,放入

等佐料,并继续装至

满,再徐徐倒入配制好的盐水,使盐水

。(4)封坛发酵:盖上泡菜坛盖子,在坛盖边沿的__中注满

进行密封发酵。发酵时间受到

影响。条状或片状4∶1煮沸冷却半坛蒜瓣、生姜、香辛料八成浸没全部菜料水槽水温度生物选修1一专题复习在______条件下,亚硝酸盐与_________发生_________后,与________________结合形成__________。将显色反应后的样品与已知浓度的______进行______,可大致估算出泡菜中亚硝酸盐的含量。测定亚硝酸盐的步骤包括:①__________;②______________;③______________;④______。配制溶液时,需要加入盐酸的是___________________________;需要避光保存的是___________________________________________;比色时需静置15min的原因是________________。盐酸酸化对氨基苯磺酸重氮化反应N­1­萘基乙二胺盐酸盐玫瑰红色染料标准液目测比较配制溶液配制标准显色液制备比色样品处理液对氨基苯磺酸溶液和提取剂对氨基苯磺酸溶液;N­1­萘基乙二胺盐酸盐使反应充分进行生物选修1一专题复习三、检测亚硝酸盐的含量1、实验原理在

条件下,亚硝酸盐与

发生

后,与

结合形成

。将显色反应后的样品与已知浓度的

进行

,可大致估算出泡菜中亚硝酸盐的含量。检测亚硝酸盐的方法是

。盐酸酸化对氨基苯磺酸重氮化反应N­1­萘基乙二胺盐酸盐玫瑰红色染料标准液目测比较2、操作过程(1)配制溶液(2)配制标准显色液(3)制备样品处理液(4)比色比色法生物选修1一专题复习泡菜风味形成的关键是加入

。按照清水与盐的质量比是

。氢氧化铝乳液的作用

。调味料4:1吸附样品滤液中的杂质腌制的条件控制腌制的时间、温度和食盐的用量腌制过程中亚硝酸盐含量的变化是先增加后减少泡菜坛内有一层白膜的原因产膜酵母的繁殖加盐的作用:灭菌、渗出蔬菜中的水、调味生物选修1一专题复习与传统发酵有关的几类微生物的比较酵母菌醋酸菌毛霉乳酸菌生物学分类生活方式适宜温度主要生殖方式出芽生殖二分裂生殖孢子生殖二分裂生殖主要用途酿酒、发面酿醋制作腐乳制作酸奶、泡菜真核生物原核生物真核生物原核生物异养兼性厌氧异养需氧异养需氧异养厌氧20℃左右30~35℃15~18℃室温生物选修1一专题复习果酒果醋腐乳泡菜微生物类型原理反应条件检测方法酵母菌,真核,兼性厌氧醋酸菌,细菌,好氧菌毛霉,真菌,好氧乳酸菌,细菌,厌氧菌酵母菌的无氧呼吸产生酒精20℃左右,无氧酸性重铬酸钾与其反应呈灰绿色醋酸菌的有氧呼吸产生醋酸30~35℃,通入氧气品尝、pH试纸检测等毛霉产生蛋白酶和脂肪酶等催化有机物分解15~18℃接种,酒精含量控制在12%左右乳酸菌无氧呼吸产生乳酸常温,无氧条件pH检测,亚硝酸盐的检测方法生物选修1一专题复习生物选修1一专题复习培养基按照物理性质可分为

在液体培养基中加入

(是从红藻中提取的一种多糖,在配制培养基中用作凝固剂)后,制成琼脂固体培养基。微生物在固体培养基表面生长,可以形成肉眼可见的

。液体培养基固体培养基。凝固剂琼脂菌落按照培养基的用途,可将培养基分为

.选择培养基鉴别培养基培养基的化学成分包括

、氮源。水无机盐碳源生物选修1一专题复习2、成分:水、无机盐、碳源、氮源、例如:培养乳酸杆菌时需要在培养基中添加

;培养霉菌时需要将培养基的pH调至

;培养细菌时需要将pH调至

;培养厌氧微生物时需要提供

的条件。还需要满足微生物生长对___、____的要求PH氧气维生素酸性中性或微碱性无氧特殊营养物质生物选修1一专题复习五.以下选择培养基可以分离哪些微生物?加入青霉素的培养基

杀死细菌、放线菌,分离酵母菌、霉菌等真菌加入高浓度食盐的培养基

杀死多种微生物,分离出金黄色葡萄球菌不加氮源的无氮培养基

分离出自生固氮菌(非固氮菌因缺少氮源被淘汰)不加含碳有机物的无碳培养基

分离出自养型微生物(异养微生物因缺少有机物被淘汰)加入抗生素的培养基利用抗生素抗性基因作标记基因,选择分离出导入目的基因的工程菌生物选修1一专题复习2、消毒:指使用较为温和的

仅杀死物体

的部分对人体有害的微生物(不包括

)。常用的方法

。物理或化学方法表面内部指使用______的理化因素杀死物体内外所有的微生物,包括

。常用的方法有_______、________、__________煮沸消毒法巴氏消毒法化学药剂消毒法强烈灼烧灭菌干热灭菌高压蒸汽灭菌3、灭菌:芽孢和孢子芽孢和孢子生物选修1一专题复习

无菌操作泛指在培养微生物的操作中,所有防止________污染的方法。_________必须无菌、_________也必须要无菌、___________时不能带入其他杂菌主要包括:杂菌2.消毒与灭菌的概念及两者的区别

消毒:使用较温和理化因素,仅杀死物体表面或内部的一部分对人体有害的微生物的过程。不能杀死芽孢和孢子。灭菌:使用强烈的理化因素消灭物体内外所有微生物,包括芽孢和孢子。各种器具培养基转移菌种生物选修1一专题复习(2)灼烧灭菌——如接种环等:接种时,用于接种工具或其他金属用具灭菌。直接在酒精灯火焰的充分燃烧层灼烧可以迅速彻底灭菌(3)干热灭菌:用于耐高温需干燥物品(玻璃器皿、金属用具)(4)高压蒸汽灭菌——培养基:用于培养基等物品的灭菌生物选修1一专题复习四、纯化大肠杆菌纯化大肠杆菌就是为了获得大肠杆菌的_________,这需在培养时,尽量使菌落中的菌体来自于____________的分裂,即这个菌落的细菌群体由___________繁殖而来,这就需要接种时尽量接种_____的大肠杆菌。一个大肠杆菌一个大肠杆菌单个最常用的方法平板划线法稀释涂布平板法纯种菌落生物选修1一专题复习三.大肠杆菌的纯化培养:㈠制备牛肉膏蛋白胨固体培养基1.计算:2.称量:3.溶化:牛肉膏、蛋白胨易吸潮,要快、加盖4.灭菌:5.倒平板:分散成单个细胞,形成单个菌落加入琼脂,不断用玻棒搅拌的原因?防止琼脂糊底而导致烧杯破裂将配置好的培养基转移至锥形瓶中,放入

,在压力为

KPA,温度为

度下灭菌。将培养皿放入

内灭菌。

高压蒸汽灭菌锅100干热灭菌箱121待培养基冷却至________时在_________附近操作进行:50℃左右酒精灯火焰生物选修1一专题复习①在火焰旁右手拿锥形瓶,左手拔出______(如图1)。④待平板________后,将平板_______放置(如图4)。棉塞火焰进行灭菌,防止一条缝隙皿盖冷却凝固倒过来瓶口微生物污染培养基②右手拿锥形瓶,使锥形瓶的瓶口迅速通过_____,目的是____________________________________(如图2)。③左手将培养皿打开_________,右手将培养基倒入培养皿,立刻盖上_____(如图3)。图1图2图3图4生物选修1一专题复习3.思考讨论答:平板冷凝后,皿盖上会凝结水珠,凝固后的培养基表面的湿度也比较高,将平板倒置,既可以防止培养基表面的水分更好地挥发,又可以防止皿盖上的水珠落入培养基,造成污染。倒过来1.平板冷凝后,要将平板

放置?生物选修1一专题复习2.为什么在操作的第一步以及每次划线之前都要灼烧接种环?在划线操作结束时,仍然需要灼烧接种环吗?为什么?答:操作的第一步灼烧接种环是为了避免接种环上可能存在的微生物污染培养物;

每次划线前灼烧接种环是为了杀死上次划线结束后,接种环上残留的菌种,使下一次划线时,接种环上的菌种直接来源于上次划线的末端,从而通过划线次数的增加,使每次划线时菌种的数目逐渐减少,以便得到菌落。

划线结束后灼烧接种环,能及时杀死接种环上残留的菌种,避免细菌污染环境和感染操作者。3.思考讨论生物选修1一专题复习3.在灼烧接种环之后,为什么要等其冷却后再进行划线?答:以免接种环温度太高,杀死菌种。4.在作第二次以及其后的划线操作时,为什么总是从上一次划线的末端开始划线?答:划线后,线条末端细菌的数目比线条起始处要少,每次从上一次划线的末端开始,能使细菌的数目随着划线次数的增加而逐步减少,最终能得到由单个细菌繁殖而来的菌落。3.思考讨论生物选修1一专题复习为了保持菌种的纯净,需对菌种进行保藏。对于频繁使用的菌种,我们可以采用________法,将菌种接种到________培养基上,菌落长成后置于____冰箱保存,将菌种放在低温环境中保藏的目的是_______________________,但时间长了菌种容易被_____________,因此每_____个月后需重新接种。对于需要长期保存的菌种,可以采用_________法,在3ml的甘油瓶中,装入1ml甘油后____,将1ml菌液转移到甘油瓶,充分混合,放在_____的冷冻箱保存。3.菌种的保存临时保藏甘油管藏降低微生物的新陈代谢速率3~6固体斜面4℃污染或产生变异灭菌-200C生物选修1一专题复习(6)若用大肠杆菌进行实验,使用过的培养基及其培养物必须经过_______处理后才能丢弃,以防止培养物的扩散。灭菌生物选修1一专题复习第6课时土壤中分解尿素的细菌的分离与计数尿素是一种重要的农业氮肥,尿素并不能直接被农作物吸收。只有当土壤中的细菌将尿素分解成

之后,才能被植物利用。土壤中的细菌之所以能分解尿素,是因为他们能合成

。氨脲酶生物选修1一专题复习一、研究思路(1)思路:提供有利于

生长的条件(包括

等),同时

其他微生物生长。(2)实例:PCR技术利用的耐高温的

是从生活在热泉中的

细菌中提取的,之所以能从热泉中筛选出该菌是因为

。(3)选择培养基:在微生物学中,将允许

种类的微生物生长,同时

其他种类微生物生长的培养基,称做选择培养基。1、筛选菌株目的菌株pH抑制阻止DNA聚合酶Taq热泉的高温条件淘汰了绝大多数微生物特定抑制阻止营养温度生物选修1一专题复习2.统计菌落数目稀释涂布平板法显微镜直接计数(最常用)(1)稀释涂布平板法

①统计菌落数目时,当样品的稀释度足够高时,培养基表面生长的一个菌落,来源于样品稀释液中的

。通过统计平板上的

,就能推测出样品中大约含有多少活菌。为了保证结果准确,一般选择菌落数在

平板进行计数。一个活菌菌落数30~300生物选修1一专题复习微生物要利用尿素需要分泌

,不能分泌脲酶的微生物不能利用尿素。,其选择机制是

。加入青霉素___________加入高浓度食盐_____________;不加氮源________;不加含碳有机物___________。统计菌落数目的方法有___________和___________;一般选择菌落数在_______平板进行计数;成功统计菌落数目的关键是恰当的______;统计的菌落数比活菌的实际数目

是因为______________________________________酵母菌、霉菌等金黄色葡萄球菌固氮菌自养型微生物稀释涂布平板法直接计数显微镜30~300稀释度当两个或多个细胞在一起时,观察到的只是一个菌落只有能够以分泌脲酶从而以尿素作为氮源的微生物才能在该培养基上生长低脲酶生物选修1一专题复习②从平板上的菌落数推测出每克样品中的活菌数的计算方法是

。(平均菌落数÷涂布的稀释液体积)×稀释倍数③利用稀释涂布平板法成功统计菌落数目的关键是恰当的

。在实际操作中,通常选用一定稀释范围的样品液进行培养,以保证获得菌落数在

之间、适于计数的平板。测定土壤中细菌数量一般选用

。测定放线菌的数量,一般选用

测定真菌的数量,一般选用

。一般来说在一定的培养条件下同种微生物表现出稳定的菌落特征。

。稀释度30~300104105106103104105102103104形状、大小、隆起程度、颜色生物选修1一专题复习3.菌种的鉴定挑选选择培养基中不同形态的菌落接入含

培养基的斜面中,由于细菌合成的

酶分解尿素产生了

,使培养基的碱性增强,pH上升,使指示剂变色,菌落周围变

。酚红脲氨红生物选修1一专题复习八.微生物数量测定测定土壤中的细菌数,一般选用104、105、106倍的稀释液进行平板培养。

实验时,每一浓度至少涂布3个平板,以增强实验的说服力和准确性。

当样品的稀释度足够高时,培养基表面生长的菌落来源于样品稀释液中的一个活菌,通过统计平板上的菌落数,就能推测出样品大约含有多少个活菌。生物选修1一专题复习课题三分解纤维素的微生物的分离1)

是自然界中纤维素含量最高的天然产物,木材、作物秸秆等也富含纤维素。(2)纤维素酶是一种

酶,一般认为它至少包括三种组分,即

,前两种酶使纤维素分解成

,第三种酶将纤维二糖分解成

。纤维素最终被水解成葡萄糖,为微生物的生长提供营养。棉花复合C1酶、CX酶和葡萄糖苷酶纤维二糖葡萄糖生物选修1一专题复习纤维素分解菌的筛选(1)筛选方法:

法。能够通过颜色反应直接对微生物进行筛选。(2)刚果红染色法筛选纤维素分解菌的原理刚果红是一种染料,它可以与像纤维素这样的多糖物质形成

,但并不和水解后的

发生这种反应。当我们在含有纤维素的培养基中加入刚果红时,刚果红能与培养基中的纤维素形成红色复合物。当纤维素被纤维素酶分解后,刚果红-纤维素的复合物就无法形成,培养基中会出现以

为中心的

。这样,我们就可以通过是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌。刚果红染色红色复合物纤维二糖葡萄糖纤维素分解菌透明圈生物选修1一专题复习(1)土壤采集选择

的环境。(2)刚果红染色法分离纤维素分解菌的步骤倒平板操作、制备菌悬液、涂布平板(3)刚果红染色法种类一种是

进行颜色反应,另一种是在

。课题延伸对分解纤维素的微生物进行了初步的筛选后,只是分离纯化的第一步,为确定得到的是纤维素分解菌,还需要进行

的实验,纤维素酶的发酵方法有

两种。纤维素酶的测定方法,一般是对纤维素酶分解滤纸等纤维素后所产生的

进行定量的测定。富含纤维素先培养微生物,再加入刚果红倒平板时就加入刚果红发酵产纤维素酶液体发酵固体发酵葡萄糖生物选修1一专题复习提示:可将菌液接种在含牛肉膏蛋白胨的基础培养基与之对照,或者将纤维素改为葡萄糖。你能否设计一个对照实验,说明选择培养基的作用你能否设计一个对照实验,说明培养基是否被污染生物选修1一专题复习细胞分化:在生物个体发育过程中,细胞在

上出现稳定性差异的过程。,在培养了一段时间以后,会通过

,形成愈伤组织,愈伤组织的细胞

,是一种高度

的呈无定形状态的

细胞。由高度分化的植物组织或细胞产生愈伤组织的过程,称为植物细胞的

,或者叫做去分化。脱分化产生的愈伤组织继续进行培养,又可以重新分化成

等器官,这个过程叫做

。再分化形成的试管苗,移栽到地里,可以发育成完整的植物体。形态、结构和生理功能离体的植物组织或细胞细胞分裂排列疏松而无规则液泡化薄壁脱分化再分化根芽生物选修1一专题复习材料:不同的

,培养的难易程度差别很大。植物材料的选择直接关系到试验的成败。对于同一植株材料,材料

的长短等都会影响实验结果。菊花组织培养一般选择

作材料。一般来说,容易进行

的植物容易进行组织培养。选取生长旺盛嫩枝进行组培的是嫩枝生理状态好,容易诱导脱分化和再分化。植物组织的年龄保存时间未开花植物的茎上部新萌生的侧枝无性繁殖植物组织培养的必要条件:

、和

。细胞离体一定的营养物质、激素其他外界条件生物选修1一专题复习常用的培养基是

培养基,其中含有的大量元素是

,微量元素是

,有机物有

等。激素大量元素和微量元素提供

,有机物提供

,蔗糖提供

,同时能够

。与微生物的培养不同,MS培养基则需提供大量

营养,还要加入

。MSN、P、S、K、Ca、MgFe、Mn、B、Zn、Cu、Mo、I、Co甘氨酸、烟酸、肌醇、维生素、蔗糖生活所必须的无机盐满足离体的植物细胞在正常代谢途径受一定影响后所产生的特殊营养要求碳源维持细胞的渗透压无机激素生物选修1一专题复习使用顺序实验结果先生长素,后细胞分裂素先细胞分裂素,后生长素同时使用激素:植物激素中

是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键性激素。在生长素存在的情况下,细胞分裂素的作用呈现加强趋势。在培养基中需要添加生长素和细胞分裂素等植物激素,其浓度、等

都影响结果。有利于分裂但不分化细胞既分裂也分化分化频率提高生长素细胞分裂素使用的先后顺序、用量的比例生物选修1一专题复习生长素/细胞分裂素比值与结果比值高时比值低时比值适中促根分化,抑芽形成促芽分化,抑根形成促进愈伤组织生长(4)环境条件:

pH、温度、光照pH控制在

左右,温度控制在

。C,每日用

。5.818-22日光灯照射12h生物选修1一专题复习植物组织培养过程:离体组织或细胞植物体脱分化细胞分裂素≈生长素愈伤组织芽根细胞分裂素>生长素细胞分裂素<生长素再分化生物选修1一专题复习制备MS固体培养基外植体消毒接种培养移栽栽培实验操作生物选修1一专题复习二、实验操作(一)制备MS固体培养基MS培养基包括20多种营养成分,实验室一般使用4。C保存配制好的培养基母液来制备1、配置各种母液①无机物中大量元素浓缩

倍,微量元素浓缩

倍,常温保存②激素类、维生素类以及用量较小的有机物一般可按1mg/ml的质量浓度

配制成母液③用母液配制培养基时,需要根据各种母液的浓缩倍数,计算用量10100单独生物选修1一专题复习由于菊花的茎段的组织培养比较容易,因此

.3、灭菌分装好的培养基连同其他器械一起进行

.不必添加植物激素高压蒸汽灭菌生物选修1一专题复习外植体的消毒外植体:

片段。选取菊花茎段时,要取生长旺盛的嫩枝。菊花茎段用流水冲洗后可加少许洗衣粉,用软刷轻轻刷洗,刷洗后在流水下冲洗20min左右。用

吸干外植体表面的水分,放入体积分数为

中摇动2~3次,持续

,立即将外植体取出,在

中清洗。取出后仍用无菌吸水纸吸干外植体表面水分,放入质量分数为

溶液中

。取出后,在无菌水中至少清洗3次,目的是

。注意:对外植体进行表面消毒时,就要考虑药剂的消毒效果,又要考虑植物的耐受能力。离体的组织和细胞无菌吸水纸70%的酒精6~7s无菌水0.1%的氯化汞1~2min漂洗消毒液生物选修1一专题复习(三)接种接种前用

将工作台擦拭一遍。1、接种室消毒2、无菌操作要求操作要在

完成,每次使用器械后,都需要用火焰

,接种后立即盖好瓶盖。3、材料的切取和接种70%的酒精酒精灯火焰旁灼烧灭菌插入茎段时应注意方向,

。茎段、茎尖基部插入培养基利于吸收水分和养分不要倒插(四)培养接种后的锥形瓶最好放在

中培养。培养期间应定期消毒。培养温度

,每日用

。无菌箱18~22℃日光灯光照12h生物选修1一专题复习JLSSYBYH月季的花药培养zxxkw生物选修1一专题复习

花粉是由

(即小孢子母细胞)经过

而形成的,因此,花粉是

细胞。花粉的发育要经历:

等阶段。花粉母细胞减数分裂单倍体的生殖四分体时期、单核期、双核期生物选修1一专题复习小孢子母细胞(

)时期单核(

)期双核期()细胞核(

)细胞核(

)细胞()细胞(

)个精子(

)分裂(

)分裂单核(

)期()分裂减数小孢子四分体居中靠边有丝生殖生殖花粉管营养有丝22NNNNNNNNN生物选修1一专题复习产生花粉植株的两种途径通过花药培养产生花粉植株(即单倍体植株)一般有两种途径,一种是花粉通过

阶段发育为植物,另一种是花粉在诱导培养基上先形成

,再将其诱导分化成植株。这两种途径之间并没有绝对的界限,主要取决于

。胚状体愈伤组织培养基中激素的种类及其浓度配比花药中的花粉胚状体脱分化愈伤组织花药中的花粉脱分化分化丛芽再分化丛芽诱导生根移栽生物选修1一专题复习影响花药培养的因素诱导花粉能否成功及诱导成功率的高低,受多种因素影响,其中

是主要的影响因素·亲本的生理状况:花粉早期是的花药比后期的更容易产生花粉植株,选择

。·合适的花粉发育时期:一般来说,在

,细胞核由中央移向细胞一侧的时期,花药培养成功率最高·花蕾:选择

的花蕾·此外

以及

等对诱导成功率都有一定影响·材料的选取:选择花药时,一般要通过

来确定其中的花粉是否处于适宜的发育期。确定花粉发育时期的最常用的方法是

。但是,某些植物的花粉细胞核不易着色,需采用

,这种方法能将花粉细胞核染成

。材料的选择培养基的组成月季的初花期单核期完全未开放亲本植株的生长条件材料的低温预处理接种密度镜检醋酸洋红法焙花青-铬矾法蓝黑色生物选修1一专题复习(二)材料的消毒5、

冲洗3~5次

花药的外面有花萼、花瓣保护,通常处于无菌状态1、花蕾用

浸泡

秒2、

清洗3、

吸干花蕾表面的水分4、放入

溶液中

分钟(质量分数为1%的次氯酸钙溶液或饱和漂白粉溶液)体积分数为70%的酒精无菌水质量分数为0.1%的氯化汞无菌水无菌吸水纸302~4生物选修1一专

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