糖皮质激素及其受体在细胞数量稳态调节方面的作用及机制课件

时间反复无常，鼓着翅膀飞逝糖皮质激素及其受体在细胞数量稳态调节方面的作用及机制糖皮质激素及其受体在细胞数量稳态调节方面的作用及机制时间反复无常，鼓着翅膀飞逝糖皮质激素及其受体在细胞数量稳态调节方面的作用及机制糖皮质激素及其受体在细胞数量稳态方面的调节作用及机制研究结果表明，糖皮质激素（glucocorticoids,GC）一方面能够抑制体内多种细胞的增殖，另一方面还对多种凋亡诱导因子导致的细胞凋亡具有拮抗作用。因此，认为GC能通过上述作用来保持细胞数量的稳定，这种对细胞数量的稳态调节可能是GC对机体稳态调节的一个重要方面。本次课主要讲授糖皮质激素/受体抑制细胞增殖和抗细胞凋亡的作用及其作用机制。这方面的研究有助于充分了解GC的生理和药理作用以及副作用产生的机制，同时对我们同学做一些较深入的新药研究工作可能会有一定的启发。要求光学、力学作图是初中教学的重点和难点。明确教纲、考纲的要求，深入研究学生相关的作图能力，对于了解学生，指导教学、编制试题无疑是有重要意义的。1教纲、考纲要求1.1光学部分(1)会用光的反射定律完成有关光路图。(2)能直接应用平面镜成像规律作出虚像，找出物和像的对应关系。(3)凸(凹)透镜特殊光线的作法(学生作业练习有要求，未见教纲有要求)。以上是教纲和练习的要求。值得注意的是：根据光的反射、折射定律作图，考纲没有要求。考纲为什么不要求，目的不得而知。1.2力学部分(1)绘制简单力的图示(独立操作水平)(七上)。(2)绘制杠杆的动力臂和阻力臂的图示(独立操作水平)(九上)以上是考纲要求，教纲要求和考纲要求相同。教纲还要求会画力的示意图。2数学基础调研这里值得关注和研究的是光学作图。初一学生学习这部分内容时，他们的相关几何知识是不具备的，因为《数学》上还没有开始教授。换句话说，《科学》教材与《数学》教材的相关知识技能脱节，这人为造成了教和学的巨大困难。为了客观反映学生的光学作图能力，笔者选择了刚升入初三的新生进行相关几何基础知识技能的诊断性调研测试。调研对象是初三常态学生131人，调研时间为2008年10月。调研11.如图1所示：已知∠1=35度，CO上直线1，且CO平分LAOB，则：①∠2=______度；②∠3=______度；③∠4=______度；④∠6=______度。调研结果及分析4个空中有两空以上答错者，计41人，占131人的31.3％。进一步分析表明，学业后位50％者有54.8％的人要答错两空以上，学业后位30％者有70.6％的人要答错两空以上。这说明，根据光的反射定律进行分析计算的教学，即使放到初三，也只适合于上位60％左右的学生学习，下位40％的学生特别是下位30％的学生的学习存在极大的困难。这样的教材难度偏高。调研22.求作：∠A的角平分线。3.已知∠A，求作：∠A’，使得∠A’=∠A。4.已知直线L与直线外的一点A，求作：过A点并与L垂直的直线。调研结果分析2～4题共3题，每题2分。应用于预测根据光的反射定律，用尺规作图的能力和答对率。3题中有1题以上(含1题)作错者，就意味着这部分学生根据光的反射定律，用尺规作图时能力欠缺或者完全没有能力。这样的学生占131人的38.2％，在后位30％者中，有26人0分，4人2～4分，共30人，占34人的88.2％，这就是说，在后位30％者中，绝大部分学生(有约88％的人)是没有(或缺乏)简单尺规作图的能力的。这也说明，根据光的反射定律，用尺规作图，那怕是简单作图，即使放在初三教学，也只适合于上位60％左右的学生学习。事实上，根据光的反射定律，用尺规作图，比上述单纯的尺规作图，难度、综合性要高得多。且看下面的光学作图与几何作图的对应关系，就一目了然了。此外，从作图依据来说，学生还必须知道：①三边对应相等的三角形是全等三角形，②全等三角形的对应角相等等几何知识。还有，“直接应用平面镜成像规律作出虚像，找出物和像的对应关系，”学生必须具备的几何作图能力是轴对称作图。由以上详尽分析可以容易地找到教学难点所在：相当一部分学生(特别是后位30％的学生)几何基础作图存在缺陷。3教学达成度调研分析3.1光学作图，完成下列光路图调研对象初一常态学生144人(2个班)；调研时间：2007年上学期期中考试后。题目来源2007年上学期期中卷。教学达成度①52.3％；②61.5％。画错者主要分布在学业后位40％学生里。能力缺陷的表现：①角平分线不会作。②过已知点求作一直线的垂线，不会作。③求作一个角，使它和已知角相等，不会作。通常后位30％学生的能力缺陷-较严重，三者都不会作的大有人在。3.2力学作图，画出下力的图示：①用40牛水平向左的力拉箱子；②放在斜面上重50牛的物体受到的重力。调研对象初一常态学生173人(3个班)；调研时间2005年6月。教学达成度①62.43％②60.69％平均61.56％能力缺陷的表现①力的图示需要表示出力的3个要素，而学生中完全空白或完全错误者计11人，占173人的6.4％。②仅方向错误者，占173人的26.4％；③方向正确，但有缺陷，如无标度或无方向标，无大小等，占173人的4.0％。三者合计占173人的36.8％，其中①③两种错误者表现出一种智能结构性缺陷。第①小题左、右不分者占多数，也许是因为粗心造成的。第②小题把重力的方向作成沿斜面向上或垂直于斜面向上者很多，也许“斜面”是一个干扰因素。③一个重30N物体静止在水平面上，受到水平向右50N的拉力，请用力的图示法表示这个物体所受的重力和拉力。调研对象初一常态学生144人；调研时间：2007年上学期期中考试后。题目来源2007年上学期期中卷。教学达成度59.0％4教学建议4.1对教材编写的建议如果要较为深入地研究几何光学，如光的反射、折射作图，凸(凹)透镜成像规律的几何证明，平面镜和透镜组合作图等等，都需要将该部分内容移置初二或初三讲授，才较为恰当。即使后移，这部分内容也还是教学的难点。难点所在，上述调研已经能充分说明。4.2对教师教学的建议(1)根据光的反射定律、折射定律、平面镜成像规律作图，新课讲授时，尺规作图的方法作渗透性讲授，但这部分的作业要求应适当弱化，等到期中考试复习时，作业要求可提高、强化。这样，学生所学的必备几何知识、技能与相应的光学作图要求就可以较好地切合了，这样可以有效地避免《数学》和《科学》教材的脱轨，同时也体现了灵活处理教材、用教材教的思想。根据光的反射定律作图，一些教师指导学生用量角器、直尺来作，未尝不可，但从规范角度讲，似更应该用尺规作图。(2)力学作图，物体的受力分析是教学的重点和难点。其中受力方向应引起教学的高度注意。上述调研结果充分表明，学生或因粗心，或因不理解或因没有掌握而常常“左”“右”不分；“上”“下”不分；“竖直”和“垂直”不分，这样的学生不在少数，有的学生“竖”和“坚”不分，常常把重力的方向写成“坚直向下”，年年强调，年年都有这类学生。力的图示是初中生学习的重点内容之一，教学要求较高；力的示意图是高中生学习的重点内容之一，强调的是物体的受力分析，这是关键；两者的共同点都需要作出力的方向。因此，如果抓住这个关键，教学达成度是可以提高的。(3)应当鼓励学生互帮互学。有些学生缺乏学习自觉性，做不到不懂就问(问老师或同学)。可以指定学习基础较好的学生和学习基础较差的学生结对，落实责任制，帮助学习，检查督促学习，这样，可以对心智及其技能有缺陷的学生有所帮助和提高。4.3对学生学习的建议严格要求学生用铅笔作图，做到细心准确。认真审题，尽力避免不该出现的错误。近些年来，对大学生的职业生涯规划进行指导已成为众多教育机构及教育工作者热衷于探讨与研究的问题，这无疑会推动大学生就业工作的顺利开展。然而，在学校教育工作中，教师也在接受教育，他们与学生一样属于发展中的个体，特别是当今处于教育改革背景下的教师，将面临更多的成长压力。“机遇从来只青睐有准备的头脑”。制定有效的职业生涯规划可以使教师更好地利用教育改革的契机实现自己专业发展的目标。职业生涯指一个人终身职业经历的模式。职业经历包括职位、工作经验和任务，受到价值观、需求与情感的影响。教师的职业生涯是与教师在学校教书育人的一系列职业经历相关联的模式，如在学校的从教经历、教研活动与教学经验的丰富、教育理想与愿望的实现以及得到学生与社会的认可与尊重等。职业生涯规划简称生涯规划，又称为职业生涯设计，是指个人与组织相结合，在对职业生涯的主客观条件进行测定、分析、总结的基础上，对自己的兴趣、爱好、能力、特点进行综合分析与权衡，结合时代特点，根据自己的职业倾向，确定最佳的职业奋斗目标，并为实现这一目标做出行之有效的安排。对教师而言，职业已基本确定，因此，制定职业生涯规划可以帮助教师真正了解自己，筹划未来，拟定一生的发展方向。教师职业生涯规划的本质不仅仅是业务方面的发展，更重要的是教师个人德性的成长，是教师的人生观、价值观、教育观的体现，是教师人生幸福与快乐的源泉。教师职业生涯规划是达到教师成功的人生境界――自主发展境界的必由之路。教师制定职业生涯规划的意义帮助新教师快速适应教育工作新教师刚刚踏上工作岗位，会有一两年的适应期。新教师知识面广、观念新、可塑性强，无疑给学校注入了新的血液，对推动学校的发展发挥着积极作用。新教师由于受好奇心、新鲜感、上进心等强烈动机的驱使，工作热情高、信心足。但新教师的困惑也会在高涨的工作热情中产生，他们会日益感受到工作现实与理想的差距，各种不如意、烦恼、压抑等不良情绪会接踵而来。这在很大程度上是由于他们缺乏明确的发展目标，不了解自己发展的途径与方法。最好的解决方法就是在新教师上岗之初对其进行职业生涯规划指导，使其认识到教师工作的特点与发展路径，发挥其自身潜能，克服职业初期的盲目心理，增强发展的目的性、计划性，提高竞争能力，争取成功机会。帮助教师有效克服职业倦怠有研究表明，在教师从教十余年后，由于缺少有意识的训练，教师的教学水平与能力往往处于“高原反应”状态，致使教师缺乏成就感，产生职业倦怠心理。职业倦怠是指个体无法应付外界的过度要求而产生的身心耗竭状态，这种状态会严重阻碍教师的专业发展，甚至会影响教师的身心健康。而职业生涯规划可以使教师在认识、规划自己的职业发展中不断调整发展目标，调节发展心态，使教师对自己的职业永远充满新鲜感与使命感，依靠激情与理性应对不良情绪的产生和蔓延，使职业倦怠感得到有效抑制。推动教师的专业发展教师的专业发展是指教师在教学专业上不断成长的过程。在这一过程中，教师得以更新专业结构、提升专业水准、获得持续发展。教师的专业发展包括职前教师培养、新教师入职辅导与在职教师的持续进修三个有机统一的阶段。教师的职业生涯规划可以帮助教师更加理性地看待自己的成长过程，科学地制定更新专业结构、提升专业水准的步骤与方法，抓住每一次在职进修的机会，不断调整知识结构。这也体现了终身学习的理念，在学习化社会中，教师的职业也是一个需要终身学习的职业。通过规划职业生涯，教师会更加深刻地体会“活到老，学到老”这一古老的格言，不断求得专业上的进步，不断提升专业素质。培养教师的职业精神在市场经济环境中，功利主义的价值观大行其道，使“教书育人、行为示范、潜心治学、淡泊名利”等传统的教师职业精神经历危机与考验。为此。20世纪90年代末，英国著名教育学家艾弗?古德森提出了“有原则职业精神”，强调教育首先是一种道德的和伦理的职业。教师的职业精神是教师的灵魂，职业生涯规划可以不断地让教师反思、回顾自己的职业历程，摆脱世俗功利的干扰，体会自身的职业价值，建立职业情感，树立职业信心和职业理想，勇于承担职业责任。正如著名教育家魏书生所说：“有作为的人每天都在塑造着新我，每天都从一个新的角度认识世界、认识自我、设计自我。他的心灵像电闪雷鸣，不断放射出新的光芒，发出新的声音。”教师制定职业生涯规划的途径教师制定职业生涯规划是学校和教师的共同责任，因此，二者要相互协调，积极发挥各自的职能。正确认识教师职业角色角色原指演员在戏剧、电影中扮演的剧中人物。1934年，美国社会学家米德把这个戏剧行业中的术语移用到社会学理论研究中。他认为，每个人都是各种角色的总和，如家庭角色、社会角色，等等。社会角色是指与人们的某种社会地位、身份相一致的一整套权利、义务的规范和行为模式，是人们对具有特定身份的人的行为的期望。教师是一种社会职业，在不同的历史时期，人们对教师的期望是不完全相同的，例如，传统意义上的教师角色是“传道、授业、解惑者”、“人类灵魂的工程师”、“园丁”、“春蚕”等等。而在教育改革的今天，这样的角色认知已不能满足人们的期望。于是，有学者将教师的职业角色分为三个层面：在教学层面上，教师要成为学生学习活动的组织者、激发者（引导者、促进者）；在师生关系层面上，教师要成为学生的朋友（或心理咨询师）；在教师自我发展层面上，教师要成为自我发展的主人。人们要想成功地扮演某种社会角色，必须首先形成职业角色认知，理解所扮演角色应有的行为规范。因此，认清教师应承担的职业角色是教师制定职业生涯规划的基础和前提，根据职业角色的内涵规划不同阶段的发展目标，会使教师的职业道路永远充满生机。进行科学的自我评价美国思想家史蒂芬?柯维认为：“你不可能在一夜之间成为一个行动正确的人，这是持续一辈子的自我更新过程。过去错误的行动态度是：‘不到破损不堪，绝不轻言修补’。现在正确的态度是‘如果没有任何破损，那是你检查不够周全的缘故’。”自我评价是行为主体对行为的自我检查与评定，可以帮助教师及时调整职业生涯规划，应贯穿于教师职业生涯规划的始终。科学的自我评价应坚持客观性、全面性、理论与实践相结合、激励性等原则，将他人对自己的评价与自我分析结合起来。评价自己除了要评价自己的兴趣、爱好、特长、性格、气质以外，学校还要为教师进行自我评价建立科学的指标体系，以便于教师理性而全面地认识自我。自我评价的指标体系应包括教育观念、知识结构、教学状况、教育能力、人际合作能力、教育科研水平等。树立职业理想，明确职业目标教师应根据对职业角色的认识、对自己的评价以及学校的发展需要，树立自己的职业理想，选择自己的职业发展目标。职业发展目标的设定是职业生涯规划的核心，因此，在选择个人职业发展目标时要谨慎、细心，充分考虑好这样几个方面的问题：设定目标的原因，欲达到目标的途径，达到目标所需的能力、训练及教育，达到目标可能得到的帮助和阻力各有哪些，等等。同时，在选择发展目标时，要体现出层次性，可将目标分为近期目标（一般为1～2年）、中期目标（一般为3～5年）和长期目标（一般为5～10年）。为减少行动的盲目性，近期目标还可细分为日目标、周目标、月目标、年目标等。经营职业生涯规划俗话说“计划赶不上变化”。由于实践中影响教师职业生涯的因素很多，有的变化因素可以预测，而有的变化因素难以预见，因此，制定好职业生涯规划之后并不意味着生涯规划工作的停止，而是要随着各种因素的变化不断调整职业生涯规划，经营职业生涯规划。经营自己的职业生涯规划就是不断地对职业生涯规划进行评估、修订。修订的内容包括职业的重新选择，职业生涯路线的选择，人生目标的修订，实施措施与计划的变更等。教师成长和发展的过程就是不断地否定之否定的过程，所以，教师应正视职业发展过程中的矛盾与问题，及时更新职业生涯规划内容，以保证自己的持续健康发展。学校要为教师的职业生涯规划提供指导教师的职业生涯规划离不开学校的指导，自20世纪70年代以来，职业生涯管理已不再仅仅是帮助个人成长的手段，而已逐渐成为有远见的组织的关键性战略资产。因此，学校应定期聘请专家帮助教师认识、掌握职业生涯规划的知识与技巧，为教师科学地规划自己的职业生涯创造良好的氛围，建立有效的导向与激励机制，使教师体会到落实职业生涯规划带来的进步与快乐，更深层次地体会教师职业的神圣价值，从而使教师乐于从教、愿意为教育事业的繁荣与发展倾注自己的心血。维持细胞数量的稳态对于有机体的生长发育、组织器官功能的维持以及防止肿瘤等疾病的发生发展具有重要意义。糖皮质激素（GC）是调节机体生长发育以及维持机体稳态的重要激素，该激素和其受体（GR）在保持细胞数量的稳态方面具有重要作用.一、GC/GR抑制细胞增殖和抗凋亡的作用

GC能够抑制胸腺细胞、淋巴细胞和白血病细胞的增殖（后来证实GC还能诱导这些细胞凋亡），因此，GC被临床广泛用于抗炎，治疗自身免疫性疾病和淋巴细胞性肿瘤。GC还能抑制成纤维细胞、成骨细胞的增殖，这是临床长时间应用GC后导致皮肤萎缩、伤口愈合障碍、骨质疏松、甚至股骨头坏死（如在SARS治疗中出现的情况）的重要原因。GC还能抑制上皮细胞（如胃上皮细胞）及多种上皮来源的肿瘤细胞（如肺癌细胞、乳腺癌、卵巢癌、前列腺癌等）的增殖，这种作用是通过受体介导的。除了能抑制多种细胞的增殖外，GC对细胞凋亡同样具有重要的调节作用。如GC可诱导淋巴细胞、白血病细胞、多种骨髓瘤细胞凋亡.但对另一些细胞却有抗凋亡作用。如在神经细胞、心肌细胞、中性粒细胞、原代培养的肝细胞、肺上皮细胞以及卵巢卵泡细胞中，GC能拮抗有害刺激如去除血清或生长因子、缺氧、缺血/再灌、TNF-α等诱导的细胞凋亡。有报道在乳腺癌细胞、胰腺癌细胞、肺癌细胞、前列腺癌细胞以及神经纤维肉瘤细胞等肿瘤细胞中，由于放射线、抗癌药顺铂、卡铂等诱导的细胞凋亡也能被GC明显抑制。人工合成的GC－地塞米松（Dex）能抑制人卵巢癌细胞系（HO-8910）以及骨肉瘤HOS-8603细胞的增殖.

观察Dex与顺铂联用对卵巢癌HO-8910细胞的作用:发现Dex单用可以抑制细胞增殖（25-30%），但是与化疗药物顺铂联用时，却可以明显降低顺铂诱导该细胞凋亡的作用（细胞凋亡从70%降至30%）。由于GC/GR在同一细胞中既能抑制细胞增殖，又具有抗凋亡的作用，这就强烈提示Dex对细胞数量的调控并非单向的。Dex对多种上皮来源的肿瘤细胞的数量调节可能是一种稳态调节。它能使上皮来源的肿瘤细胞在多种刺激因素的作用下既不会过度增殖，也不因出现凋亡诱导因素而导致细胞数量的过度减少。GC/GR对细胞数量的稳态调节不仅与GC的生理作用（如调节生长发育，维持內环境稳定等）有关，还与GC的药理作用及其副作用（生长障碍、伤口愈合缓慢、骨质疏松、肌肉萎缩等）有关。因此，研究GC/GR对细胞数量稳态的调节作用及其作用机制是非常必要的。GC对机体的作用广泛而复杂，除了其受体介导的对基因表达的调节作用外，近年来的研究已证明GC还有非基因组（nongenomicaction）作用，而GR也可能有配体非依赖性的作用。GC可以通过多种复杂机制影响在细胞增殖和细胞凋亡通路中起关键作用的效应分子以及上游的信号转导蛋白和通路，调节细胞增殖和凋亡，维持细胞数量的稳态。二、GC/GR通过调节基因表达发挥抑制细胞增殖和抗细胞凋亡作用作为转录调节因子，GR主要通过调节基因表达介导GC的作用GR促进或抑制基因表达的作用可以发生在转录和转录后水平目前了解比较多的是GR介导的转录调节。（一）GC/GR调节基因转录的机制

迄今对GR调节基因转录的过程已有较深入的研究，已证明没有与配体结合时GR主要存在于胞浆，GC与GR结合可以导致其激活，激活的GR转入核内，通过以下方式调节基因转录：通过蛋白质－DNA相互作用直接调节靶基因转录通过蛋白质－蛋白质之间的相互作用间接调节靶基因转录1.通过蛋白质－DNA相互作用直接调节

靶基因转录

配体结合的GR在核内与靶基因启动子(promoter)中具有增强子作用的糖皮质激素反应元件（glucocorticoidresponseelement,GRE）结合，在该部位募集转录辅因子（如共激活因子），对组蛋白进行部位特异性的修饰，使染色质从紧密的抑制状态转为疏散的易于转录的激活状态。之后，核受体与RNA聚合酶II以及通用转录因子（GTF）相互作用，直接促进基因的转录；或者通过与负性的GRE（nGRE）结合，取代该部位原有的转录因子，抑制靶基因的转录。组蛋白是真核生物染色体的基本结构蛋白,是一类小分子碱性蛋白质,有五种类型：H1、H2A、H2B、H3、H4，它们富含带正电荷的碱性氨基酸,能够与DNA中带负电荷的磷酸基团相互作用。组蛋白是染色质中核小体的主要结构元件。核小体主要由四种组蛋白（H2A,H2B,H3和H4）构成。这四种组蛋白和缠绕着组蛋白的DNA共同组成了染色质。研究发现基因的表达并不仅仅由DNA决定，组蛋白的修饰（乙酰化、磷酸化和甲基化）所引起的结构变化同样能影响基因的开关，并且这种变化同样也调控着基因的转录，影响着基因的表达。组蛋白的乙酰化和去乙酰化能打开或关闭某些基因，增强或抑制某些基因的表达。

在多种疾病中，都存在组蛋白编码错误的迹象。因此，有人将组蛋白编码称之为“第二套遗传密码”。组蛋白的乙酰化修饰对于研究基因的表达调控至关重要。蛋白的乙酰化和去乙酰化是蛋白活性调节的一种重要的形式，通过乙酰化或去乙酰化，改变了染色质结构或是转录因子的活性，可以调节基因转录的活性。

染色质免疫沉淀技术(chromatinimmunoprecipitationassay,CHIP)是目前唯一研究体内DNA与蛋白质相互作用的方法.基本原理:在活细胞状态下固定蛋白质-DNA复合物,并将其随机切断为一定长度范围内的染色质小片段,然后通过免疫学方法沉淀次复合体,特异性地富集目的蛋白结合的DNA片段,通过对目的片段的纯化与检测,从而获得蛋白质与DNA相互作用的信息.该方法可以用来研究组蛋白的各种共价修饰与基因表达的关系.2.通过蛋白质－蛋白质之间的相互作用

间接调节靶基因转录

GR可在转录水平与其他转录因子相互作用，调节启动子中不含GRE的基因表达。这种方式不需要GR与DNA结合。与其他转录因子相互作用的结果以抑制基因表达为主，其确切机制还不清楚，有可能与不同转录因子之间竞争数量有限的共激活因子有关。GR与AP-1、NF-к

B等转录因子之间的相互作用是GC/GR抗炎作用的重要机制之一。NF－кB与自身免疫性疾病目前已有证据表明核转录因子NF－кB可能通过信号传导通路，调控基因的表达，从而参与了很多自身免疫性和炎症性疾病的发生和发展。在正常情况下，NF－кB位于细胞胞浆内，一般由两个功能亚单位，即P65和P50，所组成，同时和其天然性的抑制因子IкB－a和IкB－b结合在一起，而后者阻止NF－кB进入细胞核，调控相关的靶基因。一旦细胞受到刺激（感染、氧化和抗原等），IкB磷酸化，相应的蛋白酶体发生降解，NF—кB激活，进入细胞核，与靶基因结合，后者可产生大量的炎症介质（如白介素1b和肿瘤坏死因子a），引起炎症反应的发生，同时基因的产物会进一步激活NF－кB，从而扩大局部的异常炎症反应。糖皮质激素可以抑制某些转录因子和相应基因的表达，如AP－1和NF—кB，从而抑制炎症反应。有证据显示，糖皮质激素可能是目前最强的NF－кB抑制因子。糖皮质激素可通过结合糖皮质激素受体，抑制活化的NF－кB（细胞胞浆内和细胞核核内），同时能抑制NF－кB与靶基因结合，起到抑制异常炎症反应的作用。最新研究显示，糖皮质激素还能增加NF－кB的抑制因子IкB的转录和表达。由此可以推测：GC通过抑制NF—кB而抑制肿瘤细胞的增殖的机制可能与其上述抗炎机制是类似的。GR与转录因子AP-1、NF-кB

、p53、STAT5等的相互作用在GC/GR对细胞增殖和凋亡调控中亦具有重要作用。已证明核转录因子NF-кB的靶基因IL-6对激素非依赖性的前列腺癌（AIPC）细胞具有明显增殖促进作用，Dex能抑制AIPC细胞的增殖。国内外研究结果均表明，GC/GR抑制NF-кB的转录活性和IL-6的表达是GC抑制AIPC细胞增殖的重要机制之一。（二）介导GC/GR对细胞增殖和凋亡调控作用的靶基因已证实GC/GR的增殖抑制作用是通过对细胞周期（如G1期）的阻滞实现的.并发现GC抑制细胞增殖的作用与其调节细胞周期的调节性蛋白的表达有关。GC/GR也可以通过调节凋亡相关蛋白的表达发挥抗凋亡作用，如有报道GC可以抑制凋亡诱导因子Fas或Bcl-2蛋白家族中促凋亡成员表达，上调Bcl-2蛋白家族中抗凋亡成员Bcl-2或凋亡抑制因子（Inhibitorsofapoptosis,IAPs）的表达产生抗凋亡作用。GC/GR抑制增殖和抗凋亡的作用还与它们在多种细胞中诱导下列蛋白表达有关，如与AKT/PKB有高度同源性的血清和糖皮质激素调节蛋白激酶－1（serumandglucocorticoidregulatedkinase,Sgk）、MAPK磷酸酶（MAPKphosphatase-1,MKP-1）、胰岛素样生长因子结合蛋白1、细胞抑制和DNA损伤诱导的蛋白（growtharrestandDNAdamage-inducible,GADD45）等。在以往研究GR对细胞增殖和凋亡调节的基础上，选择了一些参与细胞增殖、凋亡和变形运动的重要信号转导蛋白，研究了GC对它们的表达/活性的影响，发现了以下一些表达受GC调节的GR功能性靶基因。小G蛋白RhoBTGFβ1II型受体（TβRII）信号调控蛋白（SIRPα）1.小G蛋白RhoB

RhoB是小G蛋白Rho亚族成员，有报道该蛋白具有抑制细胞增殖的作用，并能被多种细胞毒应激原，如紫外线（UV）和化疗药5-FU，顺铂等诱导。Dex在人卵巢癌HO-8910和骨肉瘤细胞中能以浓度和时间依赖性的方式上调RhoBmRNA和蛋白质表达，GR的抑制剂RU38486能够抑制Dex上调RhoB的作用，表明这种作用通过GR介导。将野生型的RhoB表达载体转入HO-8910细胞，使其过度表达，可以使Dex抑制该细胞增殖的作用增强；而用RNA干扰技术抑制RhoB的表达，则可明显阻断Dex的上述作用。以上结果表明，GR上调RhoB参与了GC对该细胞的增殖抑制作用。用同样的方法也证明RhoB的上调与Dex诱导该细胞形态改变有关。近期的研究发现RhoB过表达或RhoB激活能使NF-кB的核转位增加，基础转录活性增强，因此，推测过表达的RhoB有可能参与了GC对该细胞顺铂诱导的抗凋亡作用。2.TGFβ1II型受体（TβRII）

转化生长因子β1（TGFβ1）对多种类型肿瘤细胞具有增殖抑制作用。介导其作用的有I型和II型TGFβ受体（TβRI和TβRII）。国外报道Dex能够抑制雄激素非依赖性的前列腺癌PC-3细胞的增殖，并能诱导该细胞表达TGFβ1。Dex在PC-3细胞和HO-8910细胞中能上调TβRII表达（约为对照的2.5倍）。该作用通过GR介导。将含有TβRII启动子的报告基因转入PC-3细胞中，证实Dex能够以浓度依赖性的方式增强TβRII报告基因的转录活性，表明Dex上调TβRII的作用发生在转录水平。用TβRII抗体阻断实验显示该抗体能明显阻断Dex对PC-3细胞的增殖抑制效应，表明Dex能通过诱导的TβRII表达，增强其信号转导介导其对PC-3细胞的增殖抑制作用。3.信号调控蛋白（SIRPα）

信号调控蛋白（Signalregulatoryproteinα,SIRPα）为一跨膜糖蛋白，属于免疫球蛋白超家族和抑制性受体家族成员。在单核巨噬细胞中高表达。其胞内区能够和多种具有酶活性的信号转导蛋白和接头蛋白结合，在多条信号转导通路发挥作用，参与多种细胞功能的调节，包括抑制细胞增殖、调节细胞的粘附和运动等。近来发现在小鼠巨噬细胞（RAW264.7）中，Dex可以浓度和时间依赖性的方式诱导该蛋白的表达。而在用RNA干扰技术阻断了GR表达的稳转细胞系RAW-H5中，SIRPα明显下调，其mRNA和蛋白质水平仅为对照的20%左右。将SIRPα表达载体转入RAW-H5细胞，可以明显减慢细胞的增殖速率。以上表明SIRPα表达受Dex调节，后者介导了GR对该细胞的增殖抑制作用。三、GC/GR对细胞增殖、凋亡调控的其他可能机制GC/GR的非核作用或非基因组作用

GR非配体依赖性的作用

（一）GC/GR的非核作用或非基因组作用

GC/GR能通过快速的非基因组作用方式改变细胞内多种信号转导通路，如MAPK家族信号转导通路、PI-3K-AKB信号转导通路、Ca2＋信号转导通路等的活性状态，而这些通路又可以通过影响下游的转录因子的活性，最终导致细胞内基因表达的改变，参与了细胞的增殖、凋亡的调控。GC还能抑制Caspases（如Caspase3,89）的活性，产生抗凋亡效应。（二）GR非配体依赖性的作用用RNA干扰技术阻断了小鼠巨噬细胞系（RAW264.7）细胞中GR的表达，建立了GR表达受抑的稳转细胞系RAW-H5，意外发现该细胞的增殖明显加快，传代后第6天细胞的数量是对照细胞的3倍左右。表明GR有明显抑制该细胞增殖的作用。用人工合成的Dex处理RAW264.7，在Dex浓度为10-7和10-6mol/L时细胞增殖的抑制率分别仅为25%和35%，这种配体作用和抑制受体表达导致的对细胞增殖影响的差异，提示GR抑制该细胞增殖的作用除了配体依赖性的以外，可能还具有配体非依赖性的作用。近年来越来越多的报道显示,包括GR在内的核受体的转录激活功能并非只依赖于配体，受体的翻译后修饰，如磷酸化、硝化/亚硝基化（nitration/nitrosylation）、乙酰化等也可以影响受体与激素结合、核转位、DNA结合和转录激活功能。如已证明多种跨膜信号转导通路中激活的蛋白激酶（如蛋白激酶A、ERK等）和磷酸酶能通过对核受体的可逆性磷酸化修饰，导致受体构象改变并影响其转录激活功能。有报道将雄激素受体（AR）的表达载体转染没有AR表达的前列腺癌PC-3细胞，使其表达，可以导致该细胞的增殖和侵袭能力降低，同时细胞表皮生长因子受体（EGFR）的磷酸化和EGFR引发的PI-3K信号转导通路也减弱。用免疫共聚焦和免疫共沉淀方法显示EGFR和AR在细胞内有共同的定位，提示AR有可能通过直接与EGFR相互作用，改变其下游的信号转导通路活性，调节细胞的增殖、粘附和侵袭等生物学行为。GR是否也有与AR同样的作用方式是个有兴趣的问题，值得进一步研究。四、GR靶基因群或基因表达调控网络的研究近年来一些实验室将高通量基因芯片技术和定量PCR技术相结合，研究GC处理组与对照组细胞基因表达的差异，以筛选对GC反应性的基因优点：快速和