下载本文档
文档简介
犐犆犛11.220
犅41
中华人民共和国国家标准
犌犅/犜17494—2009
代替GB/T17494—1998
马传染性贫血病间接犈犔犐犛犃诊断技术
犇犻犪犵狀狅狊狋犻犮狋犲犮犺狀犻狇狌犲狊狅犳犻狀犱犻狉犲犮狋犈犔犐犛犃狋犲犮犺狀犻狇狌犲
犳狅狉犲狇狌犻狀犲犻狀犳犲犮狋犻狅狌狊犪狀犲犿犻犪犱犻狊犲犪狊犲
20090423发布20090901实施
中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局
发布
中国国家标准化管理委员会
书
犌犅/犜17494—2009
前言
本标准参照世界动物卫生组织(OIE)最新公布的《陆生动物诊断试验和疫苗手册》2004年版,并结
合我国现有动物卫生法规及农业部对马传贫的相关政策和措施修订,其技术内容与OIE所推荐的基本
一致。
本标准代替GB/T17494—1998《马传染性贫血病间接ELISA技术规程》。
本标准与GB/T17494—1998相比主要变化如下:
———“前言”部分作适当变动;
———删除第2章的内容;
———第4章“仪器设备”和第5章“试剂”部分改为“材料准备”,并对内容作较大的改动;
———第6章“配制溶液”部分放置在附录内;
———修订原标准中的所有语句和计量单位等错误用法。
本标准的附录A、附录B、附录C和附录D为规范性附录。
本标准由中华人民共和国农业部提出。
本标准由全国动物防疫标准化技术委员会(SAC/TC181)归口。
本标准由中国农业科学院哈尔滨兽医研究所负责起草。
本标准主要起草人:相文华、郭巍、赵立平、戴玉坤。
本标准所代替标准的历次版本发布情况为:
———GB/T17494—1998。
Ⅰ
书
犌犅/犜17494—2009
马传染性贫血病间接犈犔犐犛犃诊断技术
1范围
本标准规定了马传染性贫血病间接ELISA诊断技术的测定原理、材料准备、操作方法和结果判
定等。
本标准适用于检测马血清中的马传贫病毒抗体。可用于生产和经营马匹者对未注射马传贫疫苗马
匹的检疫、马传贫病马的定性,也可用于对注射马传贫疫苗马匹的免疫状态进行测定。
2测定原理
用制备的马传贫病毒抗原,包被聚苯乙烯微量板孔,使免疫反应在固相载体上进行。当被检血清中
有马传贫病毒抗体存在时,则与孔壁上的抗原形成抗原抗体复合物,再与酶标记的抗体(抗马免疫球蛋
白)反应,最后通过测定酶作用底物催化后的产物,进行马传贫病毒抗体的定性、定量测定。
3材料准备
3.1器材
3.1.196孔平底微量反应板。
3.1.2微量移液器。
3.1.3酶标测定仪。
3.1.4恒温箱。
3.1.5保湿盒等。
3.2试剂
3.2.1兔抗马IgG辣根过氧化物酶结合物(简称酶标抗体)为冻干品,见附录A。
3.2.2马传贫病毒抗原包被板见附录B。
3.2.3马传贫病毒标准阳性血清和标准阴性血清均为冻干品。
3.2.4磷酸盐缓冲液(0.02mol/L,pH7.2,PBS)配制方法见第C.1章。
3.2.5洗涤缓冲液(0.02mol/L,pH7.2,PBS0.05%吐温20)的配制方法见第C.2章。
3.2.6血清及酶标记抗体稀释液(0.02mol/L,pH7.2,PBS0.05%吐温200.1%白明胶10%健康牛
血清)的配制方法见第C.3章。
3.2.7底物缓冲液(pH5.0磷酸盐柠檬酸缓冲液,内含0.04%邻苯二胺及0.045%过氧化氢)的配制
方法见第C.4章。
3.2.8终止液(2mol/L,硫酸)的配制方法见第C.5章。
4操作方法
4.1冲洗包被板:向各孔注入洗涤缓冲液,浸泡3min,甩干,再注入洗涤缓冲液,重复3次。甩干孔内
残液,在滤纸上吸干。
4.2加被检血清及对照血清:将每份被检血清样品各取50μL加入到血清稀释板的各孔内,再将稀释
液0.95mL依次加入各孔内,作1∶20倍稀释。混匀后分别取100μL依次加入抗原包被反应孔中,每
份血清加两个孔。每块反应板设阴性血清和阳性血清对照各两孔,每孔100μL。盖好包被板置37
温馨提示
- 1. 本站所提供的标准文本仅供个人学习、研究之用,未经授权,严禁复制、发行、汇编、翻译或网络传播等,侵权必究。
- 2. 本站所提供的标准均为PDF格式电子版文本(可阅读打印),因数字商品的特殊性,一经售出,不提供退换货服务。
- 3. 标准文档要求电子版与印刷版保持一致,所以下载的文档中可能包含空白页,非文档质量问题。
最新文档
- 电动汽车车载充电器市场调研报告-主要企业、市场规模、份额及发展趋势
- 为什么过敏性鼻炎要在夏天治疗
- 酒店工作分析与总结
- 校服采购投标方案
- 公路工程项目施工安全管理及措施
- 建设生产汽车发动机零件、内外饰件和空调项目环评可研资料环境影响
- 职业技术学院教师教学评价办法
- 2010年4月自考28050学前教育研究方法试题及答案含解析
- 振动计量器具检定规程
- 施工安全技术交底书(空气压缩机作业)
- 人教版七年级(下)第三次月考数学试题(含答案)
- 旧水闸、旧泵站拆除方案
- 第五章 测量效度
- 外墙真石漆施工工艺标准
- 电容式传感器的测量电路引言课件
- 小升初小古文考试中常见的词语意思解释具体语境义
- HCMV感染对妊娠的影响及诊治进展的中期报告
- 普惠金融应急预案
- 正畸治疗中的口腔健康维护(口腔正畸学课件)
- 2023ai大模型对我国劳动力市场潜在影响研究报告-智联招聘
- 国开学习网电大数据库应用技术第四次形考作业实验答案
评论
0/150
提交评论