不同方法对微生物检测菌落蔓延的影响

第第页不同方法对微生物检测菌落蔓延的影响在食品微生物检测过程中，菌落总数检测经常受到微生物菌落扩散的影响，造成结果精确     度下降甚至无法得到检测结果，食品菌落总数测定结果就无法真实地表现出食品的卫生状况。为削减菌落扩散的影响，本文通过对5种削减或防止菌落扩散方法进行的测试讨论，我们一起来学习一下吧！

1材料与试剂1.1食品检样

巴氏消毒牛奶、原味面包

1.2仪器

全自动菌落分析仪

立式压力蒸汽灭菌器

生化培育箱

均质机

恒温水浴锅

培育皿（直径90mm）

1.3试剂

琼脂

平板计数琼脂（PCA）

氯代三苯基四氮唑（TTC）

2方法2.1对比组

根据国标正常检测，制成检验培育基平板后培育基不加掩盖。

2.2加掩盖组

根据国标法制作检验平板后，加入5mL灭菌培育基掩盖住原培育基。采纳两种不同的掩盖方案，加掩盖组一是检验平板做好后，加入的掩盖培育基的琼脂质量分数为2.0%（配方：琼脂20g，水98g），加掩盖组二琼脂含量质量分数为4.0%（配方：琼脂40g，水960g）。

2.3加滤纸组

培育皿灭菌前在培育皿皿盖中放置两层滤纸，目的是在菌落总数检测培育的过程中可以汲取肯定量的冷凝水，防止微生物细胞或孢子随着冷凝水迁移，削减菌落扩散的发生，然后根据国标法制作不加掩盖的平板。

2.4加TTC组

每100mLPCA培育基中加人0.1%TTC溶液2.5mL混匀，根据国标法制作不加掩盖的平板。TTC染色液能够使菌落呈现红色而培育基和食品残渣颗粒不会被染色，有利于菌落计数时真实菌落的鉴别，且不会对微生物特殊是细菌的生长繁殖造成影响。

3结果3.1过期巴氏消毒牛奶不同组别、不同稀释度菌落蔓延状况统计

过期巴氏消毒牛奶不同组别、不同稀释度菌落扩散状况统计见表1。

3.2过期面包不同组别、不同稀释度菌落扩散状况统计

过期面包不同组别、不同稀释度菌落扩散状况统计见表2。

3.3菌落总数检测结果

菌落总数检测结果见表3。

从以上3.1过期巴氏消毒牛奶不同组别、不同稀释度菌落扩散状况统计表和3.2过期面包不同组别、不同稀释度菌落扩散状况统计表中可以看出不经过处理的对比组平板，菌落扩散特别严峻，巴氏消毒牛奶和面包分别达到了77.8%、94.4%；加TTC组菌落扩散也很严峻，均达到了75.0%，与对比组相比有所改善；加滤纸组菌落扩散分别达到了69.4%和75.0%，菌落扩散对检验的影响也较大；加掩盖组一菌落扩散分别达到了38.9%、44.4%，对菌落扩散有较好的抑制作用，可以保证检验得到结果；加掩盖组二菌落扩散分别达到了25.0%、27.8%，菌落扩散的到了较好的掌握，是防止菌落扩散全部试验方法中最佳的。

对3.3菌落总数检测结果分析：以过期巴氏消毒牛奶为例：对比组、加TTC组、加滤纸组、加掩盖组一、加掩盖组二平均菌落数分别为91000、91000、87000、89000、80000CFU/mL，各组得到的数据相差不大，对食品检验的最终报告不会造成实际的影响，说明检验过程中通过肯定的方法防止菌落扩散对检验结果的影响较小，可以在实际工作中采纳。分析过期面包的检验结果可以得到同样的结论。

4争论掌握菌落扩散在食品微生物检测中特别重要，面包、馒头、蛋糕、米粉、饼干等多种食品在检验过程中简单消失菌落扩散状况，其他食品的检验也会或多或少消失，对检验工作造成困扰。加掩盖组二对菌落扩散的抑制作用很明显，相比对比组平均下降52.8%和66.6%；加掩盖组一的效果也不错，相比对比组平均下降38.9%和50.0%。

同一种食品采纳不同的配方、加工工艺、不同的温度对微