临床生物化学检验-第8章诊断酶学

` 掌浆浆膜腔积液酶学检测的意义`血浆血浆酶的生理病理变酶含量的表示方疾疾病时体液酶浆酶的生理病理变酶与同工酶的酶的概念：酶是具有极高催化效率、能特异地催化某核酸酶:参与核糖核酸加工和成一类核酸分子具酶的本质：绝大部分酶为蛋白质。酶促反应：由酶所催化的反应称为酶促反应。酶活性：酶催化化学反应的能力称为酶活性。酶的底物：酶催化作用的物质。酶的特异性：酶对作用物的选择性。酶的激活剂：加速酶促反应的物质。酶的抑制剂：减慢或终止酶促反应的物质。同工酶的概念同工酶：有些酶虽然其蛋白的分子结构、理化性质乃至免疫学性质不同，但其活性中心的三维结构相同或相似，可以催化相同的化学反应，其本质为由不同基因编码的多肽链，或由同一转录生成的不同mRN所翻译的不同多肽链组成的蛋白质。由于同工酶的分布具有较明显的组织差异，或者在同一细胞内的定位不同，使同工酶检测对不同组织的疾病及组织损伤的严重程度的评估都具有较大的意义。一、临床常用酶与同工酶及亚表8-1.临床化学分析中一些重要的同工酶同工相关疾CK-BB,CK-MB,CK-心梗、肌病、颅脑损LD1,LD2,LD3,LD4,心梗、肌病、肺梗死肿红细胞型 型，溶酶体癌、血液病、骨肿γ-γ-GT1,γ-GT2,γ-GT3,γ-肝癌、梗阻性黄心梗、肝心梗、肝转氨酶及其同工酶转氨

AST：其含量心>肝>骨骼肌>肾。肝中70%存在于肝细胞线粒体中。AST有两种同工酶ASTs和AST ALT：其含量肝>肾>心>骨骼肌。大部分存在 在肝中T低于心肌，主要存在于线粒体中。病变轻的肝病如急性肝炎TS；慢性肝炎，肝硬化时，病变累及线粒体，AST>AST／ALT比值正常约为1.151，慢性肝炎，肌酸激酶及其同工酶CK-BBCK-BB：脑型CK，主要分布于脑肌酸激

AMI，特异性很高。AMILD同工

一般成年人存在如下规部分正常儿童血中可见 测定LD同工酶有助于相应组织病变 组织分布LD1（心肌）、LD5（横纹肌、肝）、LD3（脾、肺ALPALP中ALP、（病）、副甲状旁腺功能亢进、佝偻病、软骨症、性和继发性骨肿瘤、骨折和肢端肥大症的患者血中都可升高，尤其是变形性骨炎，增高非常明显，可达正常上限值的我国常用于早期佝偻病和软骨病，升高早于血钙、磷变化以及X线检查，是一个很灵敏的指。、测定还可用于黄疸的鉴别，阻塞性黄疸时常早期明显升高，甚至可达正常上限值的-倍，在完全阻塞性黄疸病例中，％病例血中超过正常上限倍。一般而言持续低于正常上限值倍时，阻塞性黄疸可能性较小，肝性黄疸时轻度升高，一般不超过正常上限的-倍，约有半数性肝癌血中升高，升高程度也常较明显，甚至可达正常上限值的-倍。如在无黄疸肝脏疾血中发现升高应警惕肝癌可能。AMYAMY、内无S-AMY，只含P-AMY酶谱：若同时测定一组性质不同的酶，比较各酶活性的变化，就能根据酶增高或减少的“谱型”作 心肌酶心肌酶CK、CK-MB、LDH、肝酶ALT、AST、LDHALP、γ-GTChE、MAO二、血浆酶的来细胞功能变化与血浆酶概许多组织的疾病常表现为血液中一些酶活性异常正常情况下，在组织细胞内发挥催化作用的酶在中含量甚微，只有组织受损造成细胞破坏或细胞膜通细胞的转换率增高或细胞的增殖加快，其特异的标志酶细胞内酶的合成或诱导增强或酶的清除受阻也可引起血可酶分成血浆特异可酶分成血浆特异酶和非血特异酶两大类的来 非血浆特异

细胞酶：存在于各组织细胞中进行代谢的酶类。有少量酶释入血液。其中大部分无专一性，只有小部分来源于特定的组织，有专一性。这类酶细胞内外浓度差异悬殊，病理情况下极易升高，其下降的临床意义很小酶酶的去酶半衰相对约120约100CK-约88CK-约87CK-约8512048三、血浆酶的生理变多多酶的男差异不大，但少数酶如CK、ALP-GT等 差异 高于女性。其原因可能 酶来源组织的重量不同有关中有中有些酶的而变化。最明显的一个例子是新生 中ALP略高于成人，1~5岁增至成人的2~3倍，然后渐下降，到10~15岁，ALP又明显升高，可达成人的3~5倍，20后降至成人值；ACP也有类中大多数酶不受进食的影响，故测酶活性不一定需要空进采血。但高脂、高糖饮食ALP活性升高。而酗酒可使清-GT升高，如未累及肝脏，戒酒后酶活性下降。此数天可导 AMY下降运运ALT中多种酶，如CK、LDH、AST妊妊娠时随着胎盘的形成和长大，胎盘组织可分泌一些酶进入血液，如耐热妊妊娠时随着胎盘的形成和长大，胎盘组织可分泌一些酶进入血液，如耐热L、LH、L和T（少数）等，引 中这些酶升高。在妊娠后期（7~9月）更为明显其中有些酶与同工酶有种族差异，G6PD的陷和变异的发生率为11%，土耳其南部犹太人可高达我国 为。此外，一些酶活性还与体重、身高的增长、 改变、昼夜变化及家庭因素等有关。四、血浆酶的病理变

酶的合成异常：病理情形下，血浆酶的合成改变以降低为主。由于大部分血浆酶都在肝脏合成，故肝脏疾患是引起血浆酶的合成下降的主要因素。癌时酸性磷酸酶的合成增高，导致血浆中该酶的浓度升高；酶的释放异常：酶的释放异常是疾病状态下血浆酶活性改变的最主要原因。其影响因素主要包括：细胞内和血浆中酶浓度的差异；酶蛋白分子量的大小；酶在细胞中的定位等因素。第二含量的表示方酶活性单位：酶活性单位有惯用单位、国际单位惯用单20世纪50年代以前酶活性单位命名混乱，常用首先报告该种酶测定方法的临床酶学家的名字来命名其单位。国际单位：在特定的条件下，1分钟内使1微摩尔底物转变的酶量为一个国际单位，以IU表示，1IU=1μmol·min-1。Katal单位：1979年国际生化 为了使酶活性位与国际单位制（SI）的反应速率相一致，推荐用Katal单位。即在规定条件下，每s时间内催化转化1摩尔底物的酶量。1katal=1mol·s-1。我国法定计量单位制中的酶催化活性单位katal，其对中酶量而言显然过大，故常用单位为μkatal或nkatal。1katal=60×106U，1U=1μmol·min-1=16.67nmol·s-1=16.67nkatal。酶活性浓度单位：临测定的不是酶的绝对量而是活性浓度。酶活性浓度以每单位体积所含的酶活性单位数表示。表示方法：目前在临床化学中，各国学者几乎都习惯用U/L来表示体液中酶催化浓度。近些年来，我国各级临床多基本使用U/L来表示酶活性浓度。酶活性浓度单位的计算：目前主要应用吸光系数法酶浓度严格来说是指酶分子的质量浓度，应用酶蛋白浓自20世纪70年代以来，随着免疫学技术的发展，酶的定量分析技术中出现了许多利用酶的抗原性，通过抗原抗体反应直接测定酶蛋白质量的新方法。与经典的测定酶活性方法比较，这些免疫化学测定法不仅灵敏度高，并可能测定一些以前不易测定的酶，为临床提供了新的信息和资料。放射放射疫测分为直接法与间接法。直接法是将放射性核素将沉淀分离并进行定量测定。方要有免疫、化学发光免疫测定、酶免测定、荧光酶免疫测定等。国内曾有用免疫淀法测定酶活性的报告（如SOD的测定）酶质量免疫化学测定法的优缺灵灵敏度特异性优无活性蛋白的酶测同工酶测酶质量免疫化学测定法的优缺抗抗局限成本高操作繁第三病时体液酶学一、肝胆疾病的血浆肝肝性肝炎最灵敏的指标，且其血活性的高低常与临床的病情发展相一m-AST的升高可作为判断肝坏死的指肝硬ALT常用于肝硬化的长期监肝硬化的失代偿期，AST显著升GGT常用来判断肝纤维化的程胆道胆道疾GGT是反映胆汁淤积、胆道梗阻最敏感的血浆ALT和AST呈轻度或中度升二、心肌和骨骼肌疾病的血浆心肌心肌损心肌梗死后2～4小时CK活性即开始升高，可作判断溶栓治疗后是否出现再灌注的指CK-MB特异性较好，其质量法有取代酶法的趋LD1>LD2(翻转比率骨骼骨骼肌损在各种肌肉损伤和疾病（如碰伤、挫伤、癫痫发作、多发性肌炎、横纹肌溶解症）时C活性都显著升高，其升高幅度往往高于心肌梗死患三、胰腺疾病的血浆血浆中AMY主要来源于胰腺、唾液腺，是胰腺疾病尤AMY开始升高，224h达到峰值，～d可下降至正常，其升高程度与胰腺的损伤程度不具有相关性。而尿AMY约于发病后12~24小时开始升高，下降也较AMY慢，所以在急性胰腺炎后期测定尿AMY更有价值。急性腮腺炎、急性阑尾炎、肠梗阻、胆石症等患者血浆AMY均可升高，但高于500U/L少见（腮腺炎患者除外）。慢性胰腺炎患者血浆AMY活性可正常或轻度升高，不具有意义。血浆中LPS主要来源于胰腺，其升高主要见于急性胰腺炎和胰。急性胰腺炎时，血浆LPS于4～8h开始升高，24h可达1015dLPS对急性腺炎灵敏度为80%～10%，特异性为82%～84，优于AMY。腮腺炎时，血浆AMY升高但LPS通常不升高，故LPS亦可作为胰腺炎与腮腺炎的鉴别指标。四、其他体液酶的临床应尿液正常尿尿液正常尿液中含酶量极尿液AMY上有较大意尿NAG测定有助于肾脏损伤的判浆膜腔积液有助于鉴别积液来源，对疾病进ADA升高主要见于结核性渗和治疗监AMY升高（300IU/L）多见 或继漏出液LDH活性 相近 脑脊液和细菌性脑膜炎时LDH可升高较显NSE用 现病史男，3岁，因心悸胸闷天入院。活动后气短，并有下肢水肿。体格检查：体温36.℃，脉搏10次/分，呼吸频率2次/分，血压100/60Hg，急性痛苦病容。[检查]CK-MB：160U/L，心电图示Ⅱ、Ⅲ、B型脑利钠肽前体(oB)是心脏为弥补收缩无力而增大时心壁被拉伸时由心脏释放到血液中的化学物质。一旦从心脏释放到血液中，oBP就会分割为N-oBP和BP。N-oBP被FA批准用于心衰的与评估，以及急性冠脉综合症患者的风险评估；也有表明，N-oBP在评估心血管的风险增加和稳定性冠状动脉疾病患者的率方面具有预后价值。意见：表现为心力衰竭的急性心肌梗死。分析：该患者最可能的为急性心肌梗死，同工酶是具有相同的催化功能，但其分子组成、空间构象、理化性质、生物学性质以及分布和细胞内定位不同的一类酶。亚型指在编码过程中，由于翻译修饰差异所形成的多种形式的一类酶。后者可再分为外分泌酶和细胞酶等。正常情况下中酶活性相对恒定，但一些病理情况常导致中酶活性at