基因工程的工具课件

DNA重组技术的基本工具生长快、肉质好的转基因鱼(中国)乳汁中含有人生长激素的转基因牛(阿根廷)基因工程的概念：基因工程的别名基因拼接技术或DNA重组技术操作环境生物体外操作对象基因操作水平DNA分子水平基本过程剪切----拼接----导入----表达结果人类需要的基因产品资料分析：

位于费城托马斯·杰斐逊大学的希拉里和她的同事成功地将人体狂犬病抗体的基因移入烟草作物中。

转基因烟草作物可以产生一种人体蛋白质，而这种物质能抗击致命性的狂犬病病毒。

此转基因实验实现了哪种生物的哪些性状在另外哪种生物中表达？性状的表达与我们从前学过的什么过程有关？1、将人体狂犬病抗体的基因切割下来。2、将该基因整合到烟草的DNA分子上。DNA重组技术的基本工具：准确切割DNA的工具（“分子手术刀”）——限制性核酸内切酶（又叫：限制酶）DNA片段的连接工具（“分子缝合针”）——DNA连接酶基因转移工具（“分子运输车”）——基因进入受体细胞的载体基因的大小以纳米计算，要对它进行剪切、拼接等操作，没有非常精细的工具是不行的。进行基因操作最少需要以下三种工具：从哪里可以找到这种切割外来的DNA而对自身不切割的物质？科学家已经找到多少种这种酶？这种酶具有什么作用？限制酶的作用：能识别特定核苷酸序列；将特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开。迄今已从近300种微生物中分离出4000种限制酶。原核生物思考：限制酶具有什么特性？一、限制性核酸内切酶限制性核酸内切酶限制酶重播黏性末端和平末端两种不同的末端是如何形成的？思考：在自然界中有一些生物的DNA可能进入另一种生物的细胞中。我们有没有学过相关的实例？现今存在的原核生物为什么没有在长期的进化过程中被外源DNA的入侵而灭绝，仍能保持一种稳定状态？有什么保护机制？怎样才能使外来的DNA失效从而保护自身？分子缝合针──DNA连接酶

连接酶的作用是：将切断的DNA片段与受体细胞的DNA连接：二、DNA连接酶

限制酶切割后有两种不同的结果，一种产生黏性末端，一种产生平末端。那么恢复它们的连接时，所用DNA连接酶是否可以不加选择？思考：两种DNA连接酶的来源与作用部位的区别。DNA连接酶DNA聚合酶连接DNA链双链单链连接部位在两DNA片段之间形成磷酸二酯键将单个核苷酸加到已存在的核酸片段的末端上，形成磷酸二酯键思考：DNA聚合酶和DNA连接酶有何相同和不同点？总结：作用于磷酸二酯键的酶有哪几种？

常用的运载体：质粒、λ噬菌体的衍生物、动植物病毒等。最常用的是：质粒。（概念）假如目的基因导入受体细胞后不能复制将怎样？作为载体没有切割位点将怎样？目的基因是否进入受体细胞，你如何察觉？如果载体对受体细胞有害将怎样？能复制并带着插入的目的基因一起复制有切割位点有标记基因的存在，将来可用含氨苄青霉素的培养基鉴别。但真正用作载体的质粒，都是经过人工改造的。不属于质粒被选为基因运载体的理由是A、能复制B、有多个限制酶切点C、具有标记基因D、它是环状DNAD练习在基因工程中，切割运载体和含有目的基因的DNA片段，需使用（）同种限制酶B.两种限制酶同种连接酶D.两种连接酶A以下是两种限制酶切割后形成的DNA片段，试分析：①GC…②…

AATTC③…GC④G…CG……G…CGCTTAA…(1)其中①和

是由一种限制酶切割形成的末端，

两者要重组成一个DNA分子，所用DNA连接酶通常是

。（2）

和

是由另一种限制酶切割形成的

末端，两者要形成重组DNA片段，所用的连接酶通常是

。反馈练习：基因工程是在DNA分子水平上进行设计施工的。在基因操作的基本步骤中，不进行碱基互补配对的步骤是（）A、人工合成目的基因B、目的基因与运载体结合C、将目的基因导入受体细胞D、目的基因的检测和表达C基因工程常用的受体细胞有（）